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大肠杆菌MEP途径的构建及其产异戊二烯的研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
目录第6-8页
前言第8-9页
第一章 绪论第9-21页
    1.1 类异戊二烯的生物合成及调控第9-11页
    1.2 生物催化合成异戊二烯第11页
    1.3 异戊二烯焦磷酸异构酶(IPP isomerase)第11-13页
    1.4 异戊二烯物理、化学性质第13-14页
    1.5 异戊二烯工业应用前景第14页
        1.5.1 生产聚异戊二烯橡胶第14页
        1.5.2 生产聚丁基橡胶第14页
        1.5.3 合成 SIS第14页
        1.5.4 制备集成橡胶(SIBR)第14页
    1.6 异戊二烯制备方法及存在问题第14-19页
        1.6.1 化学合成法第14-15页
        1.6.2 脱氢法第15页
        1.6.3 裂解馏分分离法第15-16页
        1.6.4 两段萃取精馏法第16页
        1.6.5 上述方法存在问题第16页
        1.6.6 开展生物基异戊二烯研究的意义第16-19页
    1.7 本课题的提出及主要研究内容第19-21页
第二章 异戊二烯焦磷酸异构酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其催化功能验证第21-43页
    2.1 材料与方法第21-33页
        2.1.1 实验材料第21-22页
        2.1.2 实验仪器第22页
        2.1.3 实验方法第22-33页
    2.2 结果与讨论第33-43页
        2.2.1 大肠杆菌基因组的提取第33页
        2.2.2 PCR 扩增 idi 基因第33-34页
        2.2.3 idi 基因 PCR 扩增产物的回收纯化第34页
        2.2.4 pETDuet-1, idi 双酶切片段纯化第34-35页
        2.2.5 菌液 PCR 筛选阳性克隆第35页
        2.2.6 质粒电泳检测结果第35-36页
        2.2.7 pETDuet-idi 质粒双酶切电泳检测结果第36页
        2.2.8 异戊二烯焦磷酸异构酶的表达和纯化第36-37页
        2.2.9 异戊二烯焦磷酸异构酶的表达对菌落颜色的影响第37-38页
        2.2.10 β-carotene 含量的测定第38-41页
        2.2.11 重组菌的发酵及产量的定量第41-43页
第三章 讨论与结论第43-45页
    3.1 讨论第43-44页
    3.2 结论第44-45页
参考文献第45-49页
附录一 攻读硕士学位期间发表的论文第49-50页
附录二 idi 基因序列第50-51页
附录三 fni 基因序列第51-52页
致谢第52-53页
详细摘要第53-56页

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