缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-25页 |
实验一 冷冻对精子印记基因 DNA 甲基化修饰的长时程效性研究 | 第25-42页 |
1 材料 | 第25-27页 |
1.1 主要仪器和设备 | 第25-26页 |
1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-33页 |
2.1 研究对象 | 第27页 |
2.2 标本收集及处理 | 第27-28页 |
2.3 精液冻存及复苏 | 第28页 |
2.4 琼脂糖小球包埋 | 第28页 |
2.5 亚硫氰酸盐处理及 PCR 扩增 | 第28-30页 |
2.6 精子 DNA 提取及质粒 DNA 连接 | 第30-32页 |
2.7 转导及菌落 PCR 扩增 | 第32-33页 |
2.8 摇菌 | 第33页 |
2.9 甲基化检测 | 第33页 |
2.10 甲基化结果分析及作图 | 第33页 |
2.11 数据分析 | 第33页 |
3 结果 | 第33-40页 |
3.1 BSP 巢式引物特异性验证 | 第33-34页 |
3.2 冷冻对精子(含精浆) H19ICR 的 DNA 甲基化程度的影响 | 第34-36页 |
3.3 冷冻对精子(去除精浆)H19ICR的DNA甲基化程度的影响 | 第36-37页 |
3.4 CTC6结合位点DNA甲基化状态分析 | 第37-39页 |
3.5 冷冻对精子(含精浆和去除精浆)KvDMR1的DNA甲基化程度的影响 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
实验二 冷冻对精子凋亡的长时程效应研究 | 第42-48页 |
1 材料 | 第42页 |
2 方法 | 第42-44页 |
2.1 研究对象 | 第42页 |
2.2 标本收集、冻存与复苏 | 第42-43页 |
2.3 精子凋亡检测 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57-59页 |
个人简历和研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |