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茶尺蠖化学感受相关基因的克隆与功能研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
英文缩略表第15-16页
第一章 引言第16-38页
    1.1 昆虫嗅觉感受机制第18-20页
        1.1.1 昆虫嗅觉感受器第18-19页
        1.1.2 嗅觉信号传导的分子机制第19-20页
    1.2 昆虫嗅觉感受的相关蛋白第20-32页
        1.2.1 昆虫气味结合蛋白的研究进展第20-26页
        1.2.2 昆虫化学感受蛋白的研究进展第26-28页
        1.2.3 昆虫嗅觉受体的研究进展第28-30页
        1.2.4 昆虫离子型受体的研究进展第30-32页
    1.3 昆虫味觉感受机制第32-36页
        1.3.1 味觉感受器第32-34页
        1.3.2 味觉受体的研究进展第34-36页
    1.4 研究思路第36-38页
        1.4.1 立题背景第36-37页
        1.4.2 研究内容第37-38页
第二章 茶尺蠖感器扫描及超微结构观察第38-49页
    2.1 材料与方法第39页
        2.1.1 供试昆虫第39页
        2.1.2 扫描电镜观察茶尺蠖触角及前足跗节感器类型第39页
        2.1.3 茶尺蠖触角及前足跗节感器的超微结构观察第39页
        2.1.4 感器的鉴定和命名第39页
    2.2 结果与分析第39-46页
        2.2.1 毛形感器(Sensilla trichodea)第40-41页
        2.2.2 锥形感器(Sensilla basiconica)第41-42页
        2.2.3 刺形感器(Sensilla chaetica)第42-43页
        2.2.4 栓锥形感器(Sensilla styloconica)第43-44页
        2.2.5 腔锥形感器(Sensilla coeloconica)第44-45页
        2.2.6 耳形感器(Sensilla auricillica)第45页
        2.2.7 鳞形感器(Sensilla squamiforniz)第45页
        2.2.8 B?hm氏鬃毛(B?hm bristles)第45页
        2.2.9 前足跗节的感器扫描第45-46页
    2.3 讨论第46-49页
第三章 茶尺蠖足转录组分析与寄主定位相关基因鉴定第49-76页
    3.1 材料与方法第50-54页
        3.1.1 供试昆虫第50页
        3.1.2 主要试剂第50页
        3.1.3 茶尺蠖成虫各组织总RNA的提取第50页
        3.1.4 cDNA文库的构建与Illumina测序第50-51页
        3.1.5 转录组的拼接组装与注释第51-53页
        3.1.6 气味结合蛋白的鉴定第53页
        3.1.7 化学感受蛋白的鉴定第53页
        3.1.8 RACE反应与PCR扩增全长第53-54页
    3.2 基因表达差异分析第54-58页
        3.2.1 雌雄足转录本表达丰度分析第54-55页
        3.2.2 化学感受基因的表达谱分析(RT-PCR和qRT-PCR)第55-58页
        3.2.3 化学感受相关基因的系统发育分析第58页
    3.3 结果与分析第58-73页
        3.3.1 转录组测序产出与组装第58-59页
        3.3.2 茶尺蠖成虫足转录组与其他昆虫同源比对第59页
        3.3.3 茶尺蠖成虫足转录组transcripts功能注释第59-61页
        3.3.4 化学感受相关基因的鉴定与序列分析第61-66页
        3.3.5 足转录本表达丰度分析第66-69页
        3.3.6 OBP基因系统发育与表达谱分析第69-71页
        3.3.7 CSP基因系统发育与表达谱分析第71-72页
        3.3.8 化学感受相关受体表达谱分析第72-73页
    3.4 讨论第73-76页
第四章 茶尺蠖气味结合蛋白结合特性以及免疫细胞定位分析第76-93页
    4.1 材料与方法第77-81页
        4.1.0 供试昆虫第77页
        4.1.1 主要试剂与仪器第77-78页
        4.1.2 原核表达载体的构建第78页
        4.1.3 EoblOBP3与EoblOBP6的表达与纯化第78-79页
        4.1.4 EoblOBP3与EoblOBP6抗体的纯化与特异性检测第79-80页
        4.1.5 EoblOBP6在跗节的免疫定位第80-81页
        4.1.6 EoblOBP3与EoblOBP6的荧光竞争结合试验第81页
    4.2 结果分析第81-91页
        4.2.1 EoblOBP3与EoblOBP6的诱导表达和纯化第81-84页
        4.2.2 EoblOBP3与EoblOBP6的配体结合特性分析第84-89页
        4.2.3 EoblOBP6蛋白的抗体特异性验证分析第89-90页
        4.2.4 EoblOBP6的不同感器免疫定位分析第90-91页
    4.3 讨论第91-93页
第五章 茶尺蠖嗅觉受体基因的鉴定与组织表达分析第93-102页
    5.1 材料与方法第93-95页
        5.1.1 供试昆虫第93-94页
        5.1.2 主要试剂第94页
        5.1.3 茶尺蠖成虫各组织总RNA的提取第94页
        5.1.4 cDNA文库的构建与Illumina测序第94页
        5.1.5 转录组的拼接组装与注释第94页
        5.1.6 嗅觉受体的发掘第94页
        5.1.7 嗅觉受体的表达谱分析第94-95页
    5.2 结果与分析第95-101页
        5.2.1 转录组测序产量统计第95-96页
        5.2.2 转录组与其它昆虫的同源比对第96页
        5.2.3 茶尺蠖触角转录组transcripts功能注释第96-97页
        5.2.4 EoblOR基因的鉴定与表达谱分析第97-101页
    5.3 讨论第101-102页
第六章 全文总结第102-107页
    6.1 结论与讨论第102-105页
        6.1.1 成虫触角和足跗节感器扫描及超微结构观察第102-103页
        6.1.2 茶尺蠖转录组测序分析与寄主定位相关基因鉴定第103-104页
        6.1.3 气味结合蛋白功能分析以及免疫细胞定位第104-105页
    6.2 深入研究的问题第105-106页
    6.3 展望第106-107页
参考文献第107-130页
致谢第130-131页
作者简历第131页

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