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转录因子组合诱导成纤维细胞直接重编程为汗腺样细胞的实验研究

英文缩略词表第7-9页
中文摘要第9-13页
英文摘要第13-17页
前言第18-21页
一、NF-κB和LEF-1基因真核表达载体的构建第21-37页
    1. 材料第21-25页
        1.1 主要试剂第21-22页
        1.2 主要仪器第22-23页
        1.3 试剂配制第23-25页
    2. 方法第25-29页
        2.1 人成纤维细胞培养第25-26页
        2.2 实验分组与操作程序第26页
        2.3 NF-κB和Lef-1真核表达载体的构建第26-28页
        2.4 转染细胞并筛选稳定表达细胞系第28页
        2.5 实时荧光PCR检测成纤维细胞中RAMP1及CRLR mRNA表达水平第28-29页
    3. 结果第29-33页
        3.1 查询转录因子NF-κB和Lef-1的基因序列第29-31页
        3.2 NF-κB和Lef-1真核表达载体构建第31页
        3.3 G418筛选及NF-κB和Lef-1基因表达的检测第31-33页
    4. 讨论第33-37页
二、NF-κB和LEF-1重编程成纤维细胞第37-57页
    1. 材料第37-44页
        1.1 主要试剂第37-38页
        1.2 主要仪器第38-39页
        1.3 试剂配制第39-44页
    2. 方法第44-48页
        2.1 人成纤维细胞培养第44页
        2.2 实验分组与操作程序第44页
        2.3 转染细胞并筛选稳定表达细胞系第44-45页
        2.4 NF-κB和Lef-1重编程人成纤维细胞汗腺标志物的检测第45-47页
        2.5 NF-κB和Lef-1通路下游基因的检测第47-48页
        2.6 统计分析第48页
    3. 结果第48-55页
        3.1 汗腺标志物的检测第48-54页
        3.2. NF-κB和Lef-1通路下游基因的检测第54-55页
    4. 讨论第55-57页
三、动物体内实验第57-69页
    1. 材料第57-61页
        1.1 主要试剂第57-58页
        1.2 主要仪器第58-59页
        1.3 试剂配制第59-61页
    2. 方法第61-64页
        2.1 人成纤维细胞培养第61页
        2.2 实验分组与操作程序第61-62页
        2.3 转染细胞并筛选稳定表达细胞系第62页
        2.4 裸鼠的饲养第62页
        2.5 裸鼠脚掌移植实验第62-63页
        2.6 冰冻切片免疫荧光检测汗腺标志物在移植汗腺样细胞后裸鼠脚掌中的表达第63页
        2.7 NF-κB和Lef-1重编程的成纤维细胞裸鼠移植安全性实验第63-64页
        2.8 统计分析第64页
    3. 结果第64页
    3.1 裸鼠脚掌移植实验第64-65页
    3.2 冰冻切片免疫荧光检测汗腺标志物在移植汗腺样细胞后裸鼠脚掌中的表达第65-66页
    3.3 NF-κB和Lef-1重编程的成纤维细胞裸鼠移植安全性实验第66-67页
    4. 讨论第67-69页
全文总结第69-71页
参考文献第71-77页
综述第77-106页
    文献综述一第77-86页
    文献综述二第86-94页
    References第94-106页
攻读博士学位期间发表文章及参与科研情况第106-107页
致谢第107页

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