英文缩略词表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
英文摘要 | 第13-17页 |
前言 | 第18-21页 |
一、NF-κB和LEF-1基因真核表达载体的构建 | 第21-37页 |
1. 材料 | 第21-25页 |
1.1 主要试剂 | 第21-22页 |
1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
1.3 试剂配制 | 第23-25页 |
2. 方法 | 第25-29页 |
2.1 人成纤维细胞培养 | 第25-26页 |
2.2 实验分组与操作程序 | 第26页 |
2.3 NF-κB和Lef-1真核表达载体的构建 | 第26-28页 |
2.4 转染细胞并筛选稳定表达细胞系 | 第28页 |
2.5 实时荧光PCR检测成纤维细胞中RAMP1及CRLR mRNA表达水平 | 第28-29页 |
3. 结果 | 第29-33页 |
3.1 查询转录因子NF-κB和Lef-1的基因序列 | 第29-31页 |
3.2 NF-κB和Lef-1真核表达载体构建 | 第31页 |
3.3 G418筛选及NF-κB和Lef-1基因表达的检测 | 第31-33页 |
4. 讨论 | 第33-37页 |
二、NF-κB和LEF-1重编程成纤维细胞 | 第37-57页 |
1. 材料 | 第37-44页 |
1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
1.2 主要仪器 | 第38-39页 |
1.3 试剂配制 | 第39-44页 |
2. 方法 | 第44-48页 |
2.1 人成纤维细胞培养 | 第44页 |
2.2 实验分组与操作程序 | 第44页 |
2.3 转染细胞并筛选稳定表达细胞系 | 第44-45页 |
2.4 NF-κB和Lef-1重编程人成纤维细胞汗腺标志物的检测 | 第45-47页 |
2.5 NF-κB和Lef-1通路下游基因的检测 | 第47-48页 |
2.6 统计分析 | 第48页 |
3. 结果 | 第48-55页 |
3.1 汗腺标志物的检测 | 第48-54页 |
3.2. NF-κB和Lef-1通路下游基因的检测 | 第54-55页 |
4. 讨论 | 第55-57页 |
三、动物体内实验 | 第57-69页 |
1. 材料 | 第57-61页 |
1.1 主要试剂 | 第57-58页 |
1.2 主要仪器 | 第58-59页 |
1.3 试剂配制 | 第59-61页 |
2. 方法 | 第61-64页 |
2.1 人成纤维细胞培养 | 第61页 |
2.2 实验分组与操作程序 | 第61-62页 |
2.3 转染细胞并筛选稳定表达细胞系 | 第62页 |
2.4 裸鼠的饲养 | 第62页 |
2.5 裸鼠脚掌移植实验 | 第62-63页 |
2.6 冰冻切片免疫荧光检测汗腺标志物在移植汗腺样细胞后裸鼠脚掌中的表达 | 第63页 |
2.7 NF-κB和Lef-1重编程的成纤维细胞裸鼠移植安全性实验 | 第63-64页 |
2.8 统计分析 | 第64页 |
3. 结果 | 第64页 |
3.1 裸鼠脚掌移植实验 | 第64-65页 |
3.2 冰冻切片免疫荧光检测汗腺标志物在移植汗腺样细胞后裸鼠脚掌中的表达 | 第65-66页 |
3.3 NF-κB和Lef-1重编程的成纤维细胞裸鼠移植安全性实验 | 第66-67页 |
4. 讨论 | 第67-69页 |
全文总结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
综述 | 第77-106页 |
文献综述一 | 第77-86页 |
文献综述二 | 第86-94页 |
References | 第94-106页 |
攻读博士学位期间发表文章及参与科研情况 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |