| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第17-25页 |
| 1.1 实验材料拟南芥简介 | 第17页 |
| 1.2 重金属胁迫对植物的危害 | 第17-19页 |
| 1.2.1 抑制种子的萌发 | 第17-18页 |
| 1.2.2 对生长发育的影响 | 第18页 |
| 1.2.3 对细胞膜透性的影响 | 第18页 |
| 1.2.4 对植物光合作用的影响 | 第18页 |
| 1.2.5 对植物抗氧化酶系统的影响 | 第18-19页 |
| 1.2.6 对植物DNA的影响 | 第19页 |
| 1.2.7 重金属对土壤中微生物活性的影响 | 第19页 |
| 1.2.8 重金属毒害等引起植物体内化学成分的改变 | 第19页 |
| 1.3 植物对重金属胁迫的抗性机制研究 | 第19-22页 |
| 1.3.1 根际微生物 | 第19-20页 |
| 1.3.2 根系分泌物 | 第20页 |
| 1.3.3 细胞壁 | 第20页 |
| 1.3.4 限制跨膜运输 | 第20-21页 |
| 1.3.5 螯合作用 | 第21页 |
| 1.3.6 其它胁迫相关蛋白的表达 | 第21-22页 |
| 1.3.7 促进重金属外排 | 第22页 |
| 1.3.8 液泡区室化重金属 | 第22页 |
| 1.4 主要协助转运蛋白超家族MFS | 第22-24页 |
| 1.4.1 MFS超家族的功能 | 第23页 |
| 1.4.2 MFS超家族蛋白底物转运机制 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第25页 |
| 2.2 主要试剂 | 第25-29页 |
| 2.2.1 常用分子生物学试剂盒 | 第25页 |
| 2.2.2 常用酶类 | 第25页 |
| 2.2.3 常用生化试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.4 常用溶液与试剂的配制 | 第26-29页 |
| 2.3 主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| 2.4 实验方法 | 第30-48页 |
| 2.4.1 灭菌与消毒 | 第30-31页 |
| 2.4.2 拟南芥的种植与培养 | 第31-32页 |
| 2.4.3 根长和鲜重的测量 | 第32页 |
| 2.4.4 热不对称交错PCR | 第32页 |
| 2.4.5 热不对称交错PCR(Tail-PCR) | 第32-35页 |
| 2.4.6 Trizol法提取总RNA | 第35-36页 |
| 2.4.7 cDNA合成 | 第36-37页 |
| 2.4.8 qRT-PCR | 第37页 |
| 2.4.9 植物过表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.4.10 大肠杆菌DH5α菌株感受态的制备过程 | 第38-39页 |
| 2.4.11 农杆苗GV3101感受态的制备与转化 | 第39页 |
| 2.4.12 引物设计 | 第39-40页 |
| 2.4.13 PCR反应体系及程序 | 第40-41页 |
| 2.4.14 琼脂糖凝胶电泳检测核酸 | 第41页 |
| 2.4.15 PCR产物纯化 | 第41-42页 |
| 2.4.16 琼脂糖凝胶电泳产物回收 | 第42页 |
| 2.4.17 提取质粒DNA | 第42-43页 |
| 2.4.18 限制性内切酶双酶切 | 第43页 |
| 2.4.19 T4连接反应 | 第43-44页 |
| 2.4.20 花序侵染法转化拟南芥 | 第44页 |
| 2.4.21 Cd含量测定 | 第44-45页 |
| 2.4.22 GSH含量测定 | 第45-47页 |
| 2.4.23 实验数据处理及统计分析 | 第47-48页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第48-64页 |
| 3.1 拟南芥Cd敏感cdm1突变体的分离及遗传分析 | 第48-49页 |
| 3.1.1 cdm1突变体的分离 | 第48页 |
| 3.1.2 cdm1突变体Cd敏感鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2 cdm1突变体的遗传分析 | 第49-53页 |
| 3.2.1 cdm1突变体的遗传分析 | 第49-50页 |
| 3.2.2 基因克隆 | 第50-52页 |
| 3.2.3 PTR3基因与其他物种中相似基因的同源分析 | 第52页 |
| 3.2.4 AtPTR3与其他物种氨基酸序列比对 | 第52-53页 |
| 3.3 PTR3基因的表达模式分析 | 第53-54页 |
| 3.3.1 PTR3基因的组织特异性表达 | 第53-54页 |
| 3.3.2 PTR3基因的Cd诱导表达 | 第54页 |
| 3.4 PTR3基因的过量表达 | 第54-58页 |
| 3.4.1 PTR3基因过表达载体构建 | 第54-55页 |
| 3.4.2 PTR3过表达植株的获得 | 第55-57页 |
| 3.4.3 PTR3过表达植株的表型分析 | 第57-58页 |
| 3.5 Cd胁迫下WT和PTR3基因过量表达植株中下游相关基因表达 | 第58-59页 |
| 3.6 Cd胁迫下WT、cdm1突变体和PTR3-OE中的Cd含量测定 | 第59-60页 |
| 3.7 BSO对PTR3基因过量表达植株Cd胁迫耐受性的影响 | 第60页 |
| 3.8 WT、cdml突变体和PTR3过表达植株中GSH含量测定 | 第60-61页 |
| 3.9 其它胁迫表型分析 | 第61-64页 |
| 3.9.1 cdml突变体对铅(Pb)的胁迫 | 第61-62页 |
| 3.9.2 cdml突变体对砷(As)的胁迫 | 第62页 |
| 3.9.3 cdml突变体对锌(Zn)的胁迫 | 第62-63页 |
| 3.9.4 cdml突变体对H_2O_2的胁迫 | 第63-64页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第72页 |
