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乙型肝炎病毒核心基因内部缺失突变体的筛查及其对非折叠蛋白反应调节作用

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
中英文缩略词表第12-14页
第1章 引言第14-21页
    1.1 乙型肝炎病毒第14页
    1.2 HBV基因结构第14-15页
    1.3 HBV核心基因特征及其功能第15-16页
    1.4 HBV C基因突变特征及其意义第16-17页
    1.5 HBV C基因内部缺失突变体与非折叠蛋白质反应第17-19页
    1.6 本论文的研究内容第19-21页
第2章 材料与方法第21-32页
    2.1 材料第21-24页
        2.1.1 细胞株和质粒第21页
        2.1.2 主要试剂第21-22页
        2.1.3 主要设备第22页
        2.1.4 应用软件第22-23页
        2.1.5 主要的溶剂成分和试剂的配制第23-24页
    2.2 方法第24-32页
        2.2.1 样本采集及保存第24页
        2.2.2 引物设计与合成第24页
        2.2.3 病毒DNA提取第24-25页
        2.2.4 HBV C基因片段的扩增第25-26页
        2.2.5 HBV基因及氨基酸序列的比对第26页
        2.2.6 真核质粒pBud CE4.1-HBV-C和pBud CE4.1-HBV-CID的构建第26-28页
        2.2.7 Lipo Fiter进行质粒转染第28页
        2.2.8 ELASA检测HBe Ag表达量第28-29页
        2.2.9 RT-PCR第29-30页
        2.2.10 图像分析及统计学检验方法第30-32页
第3章 结果第32-44页
    3.1 研究对象一般特征第32页
    3.2 HBV-CID基因片段PCR扩增结果第32-33页
    3.3 HBV C基因内部缺失序列分析第33-37页
        3.3.1 HBV-CID突变体核苷酸缺失序列分析第33页
        3.3.2 HBV-CID氨基酸缺失序列分析第33-36页
        3.3.3 HBV CID突变体及其免疫表位缺失的分析第36-37页
    3.4 表达HBV核心基因及核心基因突变体的真核质粒的构建第37-38页
    3.5 转染的Hep G2细胞培养液与细胞裂解液HBe Ag表达分析第38-39页
    3.6 pBudCE4.1-HBV-CID对转染HepG2细胞中UPR相关蛋白基因表达 的影响第39-44页
        3.6.1 总RNA的质量第39页
        3.6.2 转染细胞中ATF4、ATF6、GRP78和XBP1基因m RNA表达水平第39-44页
第4章 讨论第44-49页
第5章 结论与展望第49-50页
    5.1 结论第49页
    5.2 展望第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-57页
附图第57-62页
攻读学位期间的研究成果第62-63页
综述 HBV基因组C基因分子生物学的研究进展第63-71页
    参考文献第68-71页

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