摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
中英文缩略词表 | 第12-14页 |
第1章 引言 | 第14-21页 |
1.1 乙型肝炎病毒 | 第14页 |
1.2 HBV基因结构 | 第14-15页 |
1.3 HBV核心基因特征及其功能 | 第15-16页 |
1.4 HBV C基因突变特征及其意义 | 第16-17页 |
1.5 HBV C基因内部缺失突变体与非折叠蛋白质反应 | 第17-19页 |
1.6 本论文的研究内容 | 第19-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 材料 | 第21-24页 |
2.1.1 细胞株和质粒 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要设备 | 第22页 |
2.1.4 应用软件 | 第22-23页 |
2.1.5 主要的溶剂成分和试剂的配制 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-32页 |
2.2.1 样本采集及保存 | 第24页 |
2.2.2 引物设计与合成 | 第24页 |
2.2.3 病毒DNA提取 | 第24-25页 |
2.2.4 HBV C基因片段的扩增 | 第25-26页 |
2.2.5 HBV基因及氨基酸序列的比对 | 第26页 |
2.2.6 真核质粒pBud CE4.1-HBV-C和pBud CE4.1-HBV-CID的构建 | 第26-28页 |
2.2.7 Lipo Fiter进行质粒转染 | 第28页 |
2.2.8 ELASA检测HBe Ag表达量 | 第28-29页 |
2.2.9 RT-PCR | 第29-30页 |
2.2.10 图像分析及统计学检验方法 | 第30-32页 |
第3章 结果 | 第32-44页 |
3.1 研究对象一般特征 | 第32页 |
3.2 HBV-CID基因片段PCR扩增结果 | 第32-33页 |
3.3 HBV C基因内部缺失序列分析 | 第33-37页 |
3.3.1 HBV-CID突变体核苷酸缺失序列分析 | 第33页 |
3.3.2 HBV-CID氨基酸缺失序列分析 | 第33-36页 |
3.3.3 HBV CID突变体及其免疫表位缺失的分析 | 第36-37页 |
3.4 表达HBV核心基因及核心基因突变体的真核质粒的构建 | 第37-38页 |
3.5 转染的Hep G2细胞培养液与细胞裂解液HBe Ag表达分析 | 第38-39页 |
3.6 pBudCE4.1-HBV-CID对转染HepG2细胞中UPR相关蛋白基因表达 的影响 | 第39-44页 |
3.6.1 总RNA的质量 | 第39页 |
3.6.2 转染细胞中ATF4、ATF6、GRP78和XBP1基因m RNA表达水平 | 第39-44页 |
第4章 讨论 | 第44-49页 |
第5章 结论与展望 | 第49-50页 |
5.1 结论 | 第49页 |
5.2 展望 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附图 | 第57-62页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第62-63页 |
综述 HBV基因组C基因分子生物学的研究进展 | 第63-71页 |
参考文献 | 第68-71页 |