摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 植物抗逆相关的生理生化机制 | 第10-18页 |
1.1.1 植物耐盐机制 | 第10-14页 |
1.1.2 植物耐旱机制 | 第14-16页 |
1.1.3 植物耐低温机制 | 第16-18页 |
1.2 NAC转录因子 | 第18-19页 |
1.3 研究的目的及意义 | 第19-20页 |
1.4 研究的技术路线 | 第20-21页 |
2 转SlNAC2基因拟南芥纯合子筛选与鉴定 | 第21-28页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
2.1.3 仪器设备 | 第21页 |
2.1.4 RT-PCR引物序列 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 转基因拟南芥纯合子的筛选 | 第22-25页 |
2.2.1.1 种子消毒及播种 | 第22页 |
2.2.1.2 幼苗培养、筛选及栽培 | 第22-23页 |
2.2.1.3 种子收获 | 第23页 |
2.2.1.4 转基因拟南芥半定量RT-PCR分析 | 第23-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-27页 |
2.3.1 转基因拟南芥纯合子的筛选 | 第25-26页 |
2.3.2 外源基因在拟南芥纯合体中的表达 | 第26-27页 |
2.4 小结 | 第27-28页 |
3 转基因拟南芥抗逆性分析 | 第28-53页 |
3.1 实验材料 | 第28-29页 |
3.1.1 植物材料 | 第28页 |
3.1.2 实验试剂 | 第28页 |
3.1.3 仪器设备 | 第28-29页 |
3.2 实验方法 | 第29-34页 |
3.2.1 存活率测定 | 第29页 |
3.2.2 种子萌发率测定 | 第29-30页 |
3.2.3 根长及侧根数测定 | 第30页 |
3.2.4 组织含水量测定 | 第30页 |
3.2.5 气孔检测 | 第30页 |
3.2.6 叶绿素荧光测定 | 第30页 |
3.2.7 可溶性蛋白含量测定 | 第30页 |
3.2.8 脯氨酸测定 | 第30-32页 |
3.2.9 电导率测定 | 第32页 |
3.2.10 抗氧化酶活性测定 | 第32-34页 |
3.3 结果与分析 | 第34-51页 |
3.3.1 存活率 | 第34-36页 |
3.3.2 种子萌发率 | 第36-38页 |
3.3.3 根长及侧根数 | 第38-40页 |
3.3.4 组织含水量 | 第40-42页 |
3.3.5 气孔 | 第42-44页 |
3.3.6 叶绿素荧光 | 第44-46页 |
3.3.7 可溶性蛋白含量 | 第46-47页 |
3.3.8 脯氨酸含量 | 第47-48页 |
3.3.9 电导率 | 第48-49页 |
3.3.10 抗氧化酶活性 | 第49-51页 |
3.4 讨论 | 第51页 |
3.5 小结 | 第51-53页 |
4 转基因拟南芥抗逆性的分子机制分析 | 第53-71页 |
4.1 实验材料 | 第53页 |
4.1.1 植物材料 | 第53页 |
4.1.2 实验试剂 | 第53页 |
4.1.3 仪器设备 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-56页 |
4.2.1 幼苗培养 | 第53-54页 |
4.2.2 总RNA提取 | 第54页 |
4.2.3 基因芯片分析 | 第54-55页 |
4.2.3.1 荧光标记 | 第54页 |
4.2.3.2 芯片杂交和洗涤 | 第54页 |
4.2.3.3 芯片扫描 | 第54页 |
4.2.3.4 数据分析 | 第54-55页 |
4.2.4 实时荧光定量PCR | 第55-56页 |
4.3 结果与分析 | 第56-69页 |
4.3.1 RNA提取及质量检测 | 第56-57页 |
4.3.2 基因芯片分析 | 第57-67页 |
4.3.2.1 芯片扫描 | 第57页 |
4.3.2.2 散点图 | 第57-58页 |
4.3.2.3 差异表达基因统计 | 第58页 |
4.3.2.4 GO分析 | 第58-60页 |
4.3.2.5 显著上调基因 | 第60页 |
4.3.2.6 SlNAC2参与甜菜碱合成 | 第60-61页 |
4.3.2.7 SlNAC2参与植物发育调控 | 第61-63页 |
4.3.2.8 SlNAC2调控胁迫响应基因表达 | 第63-64页 |
4.3.2.9 SlNAC2基因调控的转录因子基因 | 第64-66页 |
4.3.2.10 KEGG信号通路 | 第66-67页 |
4.3.3 实时荧光定量PCR | 第67-69页 |
4.4 讨论 | 第69-70页 |
4.5 小结 | 第70-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
附录A 实验所需培养基 | 第80-82页 |
附录B DNA Marker | 第82-83页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |