摘要 | 第3-7页 |
abstract | 第7-13页 |
中英文缩略词表 | 第17-19页 |
第1章 引言 | 第19-25页 |
第2部分 PD-1/PD-L1信号通路对隐球菌性脑膜炎患者免疫功能的影响 | 第25-33页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 实验对象 | 第25-26页 |
2.2 实验试剂及材料 | 第26页 |
2.2.1 主要试剂 | 第26页 |
2.2.2 主要仪器 | 第26页 |
2.3 实验方法 | 第26-28页 |
2.3.1 标本收集 | 第26页 |
2.3.2 qRT-PCR检测PBMC中PD-1、PD-L1的mRNA水平 | 第26-28页 |
2.3.3 ELISA法检测其血浆PD-1、PD-L1蛋白的表达 | 第28页 |
2.3.4 统计学处理 | 第28页 |
2.4 实验结果 | 第28-29页 |
2.4.1 AmB对CM患者外周血PD-1、PD-L1mRNA表达水平的影响 | 第28-29页 |
2.4.2 AmB对CM患者外周血PD-1、PD-L1蛋白表达水平的影响 | 第29页 |
2.5 讨论 | 第29-33页 |
第3部分 PD-1/PD-L1信号通路对小鼠模型脑组织小胶质细胞/巨噬细胞活化和T淋巴细胞亚群的影响 | 第33-55页 |
3.1 实验材料 | 第33页 |
3.2 实验试剂及仪器 | 第33-36页 |
3.2.1 主要试剂 | 第33-35页 |
3.2.2 主要仪器 | 第35-36页 |
3.2.3 主要溶液的配制 | 第36页 |
3.3 实验方法 | 第36-44页 |
3.3.1 隐球菌脑膜炎动物模型建立及分组 | 第36-37页 |
3.3.2 HE染色观察各组小鼠脑组织病理改变 | 第37-38页 |
3.3.3 ELISA法检测小鼠脑脊液中Th1细胞因子IFN-γ、TNF-α及Th2细胞因子IL-6、IL-10以及趋化因子CXCL9和CXCL10的水平 | 第38页 |
3.3.4 分离脑组织小胶质细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞 | 第38-39页 |
3.3.5 小胶质细胞纯度检测 | 第39-40页 |
3.3.6 台盼蓝染色检测细胞活力 | 第40页 |
3.3.7 流式细胞仪检测外周血中PD-1/PD-L1表达情况及细胞纯度 | 第40-41页 |
3.3.8 免疫组织化学染色检测小胶质细胞活化标志物Iba | 第41页 |
3.3.9 免疫荧光染色检测小胶质细胞吞噬标志物Rab5、Rab | 第41-42页 |
3.3.10 qRT-PCR检测小鼠脑组织中小胶质细胞、CD4~+T、CD8~+T细胞表面PD-1、PD-L1mRNA表达水平 | 第42-43页 |
3.3.11 Westernblot检测小鼠脑组织小胶质细胞、CD4~+T、CD8~+T细胞PD-1、PD-L1蛋白表达水平 | 第43-44页 |
3.3.12 统计学处理 | 第44页 |
3.4 实验结果 | 第44-49页 |
3.4.1 各实验组小鼠死亡率比较 | 第44-45页 |
3.4.2 各组小鼠脑组织病理结果比较 | 第45页 |
3.4.3 各组小鼠细胞因子的变化 | 第45页 |
3.4.4 小胶质细胞、CD4~+T、CD8~+T细胞纯度及细胞活力检测结果 | 第45-46页 |
3.4.5 小胶质细胞/巨噬细胞活化标志物Iba1的表达情况 | 第46-47页 |
3.4.6 免疫荧光法检测小胶质细胞吞噬体标志物的表达情况 | 第47-48页 |
3.4.7 PD-1、PD-L1在各组细胞中的表达水平 | 第48-49页 |
3.5 讨论 | 第49-55页 |
结论与展望 | 第55-57页 |
结论 | 第55页 |
展望 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第65-66页 |
综述 PD-1/PD-L1信号通路在隐球菌性脑膜炎发病机制中的作用 | 第66-77页 |
参考文献 | 第73-77页 |