摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与试剂 | 第14-17页 |
2.1 主要的材料与试剂 | 第14-15页 |
2.2 主要仪器和设备 | 第15-16页 |
2.3 主要试剂的配制 | 第16-17页 |
第3章 实验方法 | 第17-28页 |
3.1 原代平滑肌细胞培养 | 第17-18页 |
3.1.1 大鼠原代胸主动脉血管平滑肌细胞获取及培养:组织块贴壁法 | 第17页 |
3.1.2 细胞复苏 | 第17-18页 |
3.1.3 细胞传代 | 第18页 |
3.2 实验分组与处理方法 | 第18-28页 |
3.2.1 实验分组与内容 | 第18-19页 |
3.2.2 原代细胞的鉴定 | 第19页 |
3.2.3 CCK-8检测细胞活力 | 第19-20页 |
3.2.4 EdU试剂盒检测VSMC内DNA复制活性 | 第20-21页 |
3.2.5 流式细胞术测定细胞周期变化 | 第21页 |
3.2.6 划痕愈合实验测定细胞迁移 | 第21页 |
3.2.7 Transwell小室(孔径8μm)迁移实验 | 第21-22页 |
3.2.8 SA-β-Gal染色 | 第22页 |
3.2.9 细胞内活性氧的检测 | 第22-23页 |
3.2.10 Western blot 检测平滑肌细胞中 α-SMA、Calponin、Cx43、Cyclin D1SIRT1、P53、P21 及 P-AMPK 蛋白表达水平 | 第23-26页 |
3.2.11 Westernblot结合免疫细胞化学检测P65核转位 | 第26-27页 |
3.2.12 数据处理 | 第27-28页 |
第4章 实验结果 | 第28-39页 |
第一部分 TRPV1介导Rut抗VSMC增殖、迁移和表型转化:抑制NF-κB/Cx43途径 | 第28-36页 |
4.1 培养原代VSMC及鉴定 | 第28-29页 |
4.2 Rut对AngII诱导的VSMC增殖的影响 | 第29-30页 |
4.3 Rut对AngII诱导的VSMC周期分布的影响 | 第30-31页 |
4.4 Rut对AngII诱导的VSMC迁移的影响 | 第31-33页 |
4.5 Rut对AngII诱导的VSMC表型的影响 | 第33-34页 |
4.6 Rut抑制AngII诱导的Cx43表达上调 | 第34-35页 |
4.7 Rut抑制AngII诱导的NF-κBP65转位 | 第35-36页 |
第二部分 TRPV1介导Rut的抗VSMC衰老:激活AMPK/SIRT1途径 | 第36-39页 |
4.8 Rut对AngII诱导的VSMC衰老的影响 | 第36-37页 |
4.9 Rut抑制AngII诱导的VSMC衰老的机制:上调SIRT1表达而抑制P53/P21通路 | 第37-38页 |
4.10 Rut通过AMPK通路上调SIRT1表达 | 第38-39页 |
第5章 讨论 | 第39-43页 |
第6章 结论与展望 | 第43-44页 |
6.1 结论 | 第43页 |
6.2 下一步研究方向 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
综述 | 第50-60页 |
参考文献 | 第57-60页 |