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油菜hau CMS线粒体基因组和不育基因的研究

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第12-14页
1 前言第14-42页
    1.1 研究问题的由来第14-15页
    1.2 芸薹属作物的物种分类和亲缘关系第15-16页
    1.3 植物线粒体基因组的起源和结构特点第16-18页
    1.4 植物线粒体基因组的组成和转录调控第18-20页
    1.5 植物线粒体基因组测序第20-22页
        1.5.1 基因组的测序方法第20页
        1.5.2 高等植物线粒体基因组测序第20-22页
    1.6 基于植物线粒体基因组分子标记的开发和利用第22页
    1.7 十字花科植物花药结构与发育的研究第22-26页
    1.8 MADS-box家族的基因在植物花药发育中的作用第26-30页
        1.8.1 植物MADS-box家族基因的发现第26-27页
        1.8.2 花发育的ABC模型第27-29页
        1.8.3 植物MADS-box家族蛋白的结构特征、基因功能和转录调控机制第29-30页
    1.9 细胞质雄性不育第30-41页
        1.9.1 细胞质雄性不育的概述第30-33页
        1.9.2 线粒体与细胞质雄性不育第33-34页
        1.9.3 油菜细胞质雄性不育第34-37页
        1.9.4 细胞质雄性不育的分子机理第37-41页
    1.10 本研究的目的意义第41-42页
2 材料与方法第42-53页
    2.1 实验材料第42页
        2.1.1 植物材料第42页
        2.1.2 载体和菌株第42页
    2.2 实验方法第42-53页
        2.2.1 CTAB法提取油菜叶片总DNA第42-43页
        2.2.2 油菜线粒体的提取第43-45页
        2.2.3 油菜不同组织RNA提取第45页
        2.2.4 半薄切片第45-46页
        2.2.5 扫描电镜第46-47页
        2.2.6 透射电镜第47页
        2.2.7 不同胞质类型线粒体基因组的共线性关系和聚类分析第47页
        2.2.8 6 种不同胞质类型MSS标记的开发第47-48页
        2.2.9 油菜线粒体中ogu CMS与nap两个亚基因组序列拷贝数的测定第48-49页
        2.2.10 RNA提取第49页
        2.2.11 亚细胞定位第49页
        2.2.12 基因的表达分析第49-51页
        2.2.13 原核表达实验第51页
        2.2.14 遗传转化的载体构建第51页
        2.2.15 拟南芥的遗传转化和芥菜型油菜转化第51页
        2.2.16 转录组数据分析第51-53页
3 结果与分析第53-97页
    3.1 油菜hau CMS不育系细胞学研究第53-58页
        3.1.1 油菜hau CMS不育系表型观察第53-54页
        3.1.2 芥菜型油菜和甘蓝型油菜hau CMS不育系的败育时期第54-56页
        3.1.3 芥菜型油菜hau CMS不育系花药的透射电镜分析第56-58页
    3.2 线粒体基因组测序及比较分析第58-80页
        3.2.1 芥菜型油菜hau CMS不育系和保持系的线粒体基因组测序第58-64页
        3.2.2 芥菜型油菜hau CMS不育系与保持系线粒体基因组的比较分析第64-70页
        3.2.3 植物线粒体基因组比较分析第70-73页
        3.2.4 甘蓝型油菜中不同胞质类型特异标记的开发与利用第73-80页
    3.3 hau CMS不育相关基因的研究第80-94页
        3.3.1 hau CMS不育相关基因orf288与hau CMS育性的关系第80-89页
        3.3.2 不育系特异的开放读码框orf325与hau CMS育性的关系第89-90页
        3.3.3 不育系特异的开放读码框orf220与hau CMS育性的关系第90-94页
    3.4 芥菜型油菜hau CMS不育系和保持系花药的转录组数据分析第94-97页
        3.4.1 芥菜型油菜hau CMS不育系和保持系差异表达基因的鉴定第94-95页
        3.4.2 芥菜型油菜hau CMS不育系和保持系差异表达基因的功能分析第95-97页
4 讨论第97-106页
    4.1 芥菜型油菜hau CMS不育系花药的败育时期第97-98页
    4.2 油菜hau CMS不育胞质来源以及芸薹属植物线粒体基因组的关系第98-99页
    4.3 植物线粒体基因组的亚计量效应第99-100页
    4.4 不同胞质类型特异标记的开发与利用第100-102页
    4.5 芥菜型油菜hau CMS的不育基因第102-103页
    4.6 细胞质雄性不育基因的转基因互补验证第103-105页
    4.7 芥菜型油菜hau CMS不育基因对早期雄蕊发育基因表达的影响第105-106页
5 总结与展望第106-108页
参考文献第108-128页
致谢第128-130页
附录第130-142页
    附录1 本研究用的的引物列表第130-133页
    附录2 Northern blotting第133-138页
    附录3 种子植物中68个不同属种的线粒体基因组信息第138-140页
    附录4 作者简介及研究生阶段发表论文成果第140-142页

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