| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第10-23页 |
| 1.1 转基因大豆的发展现状 | 第10-11页 |
| 1.2 除草剂概述 | 第11-14页 |
| 1.2.1 除草剂的分类 | 第11-13页 |
| 1.2.2 草甘膦的作用机理 | 第13-14页 |
| 1.2.3 抗草甘膦转EPSPS基因大豆的抗性机理 | 第14页 |
| 1.3 大豆遗传转化再生体系 | 第14-16页 |
| 1.3.1 器官发生的植株再生 | 第14-15页 |
| 1.3.2 体细胞胚胎发生的植株再生 | 第15-16页 |
| 1.3.3 原生质体培养再生 | 第16页 |
| 1.3.4 花药和花粉培养再生 | 第16页 |
| 1.4 大豆遗传转化的主要方法 | 第16-21页 |
| 1.4.1 农杆菌介导法 | 第17-18页 |
| 1.4.2 基因枪转化法 | 第18页 |
| 1.4.3 电击和聚乙二醇转化法 | 第18页 |
| 1.4.4 花粉管通道法 | 第18-19页 |
| 1.4.5 超声波辅助农杆菌转化方法 | 第19页 |
| 1.4.6 原位转化法 | 第19-20页 |
| 1.4.7 微注射法 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 利用大豆胚尖遗传转化体系获得转基因大豆的研究 | 第23-38页 |
| 2.1 大豆胚尖再生体系的研究 | 第23-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.1.3 大豆胚尖再生体系操作步骤 | 第23-24页 |
| 2.1.4 大豆不同品种胚尖再生能力的比较 | 第24页 |
| 2.1.5 对大豆不同品种胚尖草甘膦筛选压的探究 | 第24-25页 |
| 2.1.6 结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.2 农杆菌介导大豆胚尖遗传转化体系的研究 | 第28-38页 |
| 2.2.1 植物材料与菌株材料 | 第28-29页 |
| 2.2.2 主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| 2.2.3 农杆菌介导大豆胚尖遗传转化的基本操作程序 | 第30-32页 |
| 2.2.4 抗性大豆植株的草甘膦涂抹筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.5 抗性植株的PCR检测 | 第33-35页 |
| 2.2.6 结果与分析 | 第35-38页 |
| 第三章 利用“微创刷”法获得转基因大豆的研究 | 第38-58页 |
| 3.1 植物材料与菌株材料 | 第38页 |
| 3.2 主要试剂的配制 | 第38页 |
| 3.3 “微创刷”法获得抗草甘膦转基因大豆的基本操作程序 | 第38-41页 |
| 3.3.1 种子消毒 | 第38页 |
| 3.3.2 外植体的准备 | 第38-39页 |
| 3.3.3 侵染菌液的准备 | 第39页 |
| 3.3.4 外植体的转化与共培养 | 第39页 |
| 3.3.5 转化苗预培养及移栽 | 第39-41页 |
| 3.3.6 T_0代转化苗的收获 | 第41页 |
| 3.4 T_1代转化苗的筛选与收获 | 第41-42页 |
| 3.4.1 T_1代转化苗的除草剂喷洒筛选 | 第41页 |
| 3.4.2 T_1代抗草甘膦大豆植株的PCR检测 | 第41-42页 |
| 3.4.3 T_1代转化苗的收获 | 第42页 |
| 3.5 T_2代抗草甘膦大豆植株的筛选与检测 | 第42-44页 |
| 3.5.1 T_2代抗草甘膦大豆植株的草甘膦涂抹筛选 | 第42页 |
| 3.5.2 T_2代抗草甘膦大豆植株PCR检测 | 第42页 |
| 3.5.3 T_2代抗草甘膦大豆植株RT-PCR检测 | 第42-44页 |
| 3.6 T_2代抗草甘膦大豆植株在喷施不同剂量草甘膦处理下相关生理指标测定 | 第44-45页 |
| 3.6.1 叶片叶绿素含量的测定 | 第45页 |
| 3.6.2 叶片莽草酸质量分数的测定 | 第45页 |
| 3.6.3 叶片光合速率的测定 | 第45页 |
| 3.7 结果与分析 | 第45-58页 |
| 3.7.1 “微创刷”法转化大豆各品种的植株再生情况 | 第45-46页 |
| 3.7.2 T_1代各大豆品种种子出苗率 | 第46-47页 |
| 3.7.3 T_1代大豆各品种转化苗草甘膦喷施筛选 | 第47-48页 |
| 3.7.4 T_1代大豆各品种叶片PCR检测 | 第48-50页 |
| 3.7.5 T_2代大豆叶片草甘膦涂抹筛选 | 第50-51页 |
| 3.7.6 T_2代大豆叶片PCR检测 | 第51-52页 |
| 3.7.7 T_2代抗草甘膦大豆植株RT-PCR检测 | 第52-54页 |
| 3.7.8 T_2代大豆相关生理指标测定 | 第54-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-60页 |
| 4.1 大豆不同品种胚尖不定芽再生能力的差异 | 第58页 |
| 4.2 大豆不同品种胚尖适宜的草甘膦筛选压 | 第58页 |
| 4.3 通过农杆菌介导胚尖遗传转化体系得到抗草甘膦转基因大豆 | 第58页 |
| 4.4 “微创刷”法转化大豆各品种得到抗草甘膦转基因大豆 | 第58-59页 |
| 4.5 转基因后代提高了对草甘膦的抗性 | 第59页 |
| 4.6 “微创刷”转基因法优于传统的农杆菌介导的胚尖遗传转化法 | 第59-60页 |
| 第五章 下一步研究工作打算 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
