| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 海洋放线菌 | 第9-10页 |
| 1.1.1 海洋放线菌的种属及分布 | 第9页 |
| 1.1.2 海洋放线菌的应用 | 第9-10页 |
| 1.2 聚酮合酶 | 第10-13页 |
| 1.2.1 聚酮合酶简介 | 第10页 |
| 1.2.2 聚酮合酶的分类 | 第10-13页 |
| 1.3 聚酮合酶的应用 | 第13页 |
| 1.4 聚酮类化合物及其应用 | 第13-15页 |
| 1.4.1 红霉素及其应用 | 第13-14页 |
| 1.4.2 放线紫红素及其应用 | 第14-15页 |
| 1.4.3 查尔酮合酶 | 第15页 |
| 1.5 课题研究目的及研究意义 | 第15-17页 |
| 1.6 课题实验方案 | 第17-18页 |
| 第二章 海洋放线菌的筛选及鉴定 | 第18-24页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 培养基 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 预处理 | 第19页 |
| 2.2.2 菌株的筛选 | 第19-20页 |
| 2.2.3 菌株的保藏 | 第20页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.5 1%琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| 2.2.6 海洋放线菌的鉴定 | 第21页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第21-24页 |
| 第三章 目的基因片段的克隆 | 第24-31页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.1 材料 | 第24页 |
| 3.1.2 试剂盒 | 第24页 |
| 3.1.3 常用试剂 | 第24页 |
| 3.1.4 主要设备 | 第24-25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 3.2.1 特异性引物的设计 | 第25页 |
| 3.2.2 退火温度的优化 | 第25-26页 |
| 3.2.3 目的基因片段的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 3.2.4 PCR产物的回收 | 第27-28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-31页 |
| 3.3.1 PCR条件的优化 | 第28-29页 |
| 3.3.2 聚酮合酶基因片段的扩增 | 第29页 |
| 3.3.3 目的基因片段PCR产物的回收 | 第29-31页 |
| 第四章 重组质粒的构建与鉴定 | 第31-39页 |
| 4.1 材料 | 第31-32页 |
| 4.1.1 菌种与载体 | 第31页 |
| 4.1.2 酶及化学试剂 | 第31页 |
| 4.1.3 试剂盒 | 第31页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第31-32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 4.2.1 培养基的制备 | 第32-33页 |
| 4.2.2 目的基因片段与pMD19-T载体的连接 | 第33页 |
| 4.2.3 大肠杆菌(DH5α)感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第33页 |
| 4.2.4 重组质粒的转化 | 第33-34页 |
| 4.2.5 重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第34页 |
| 4.2.6 重组质粒的提取 | 第34-35页 |
| 4.2.7 重组质粒的扩增鉴定 | 第35-36页 |
| 4.2.8 重组质粒的测序 | 第36页 |
| 4.3 结果与分析 | 第36-39页 |
| 4.3.1 重组质粒的转化的结果 | 第36页 |
| 4.3.2 重组质粒菌落PCR结果 | 第36-37页 |
| 4.3.3 重组质粒的提取结果 | 第37-38页 |
| 4.3.4 重组质粒扩增鉴定结果 | 第38页 |
| 4.3.5 重组质粒的测序结果与分析 | 第38-39页 |
| 第五章 目的基因片段的生物信息学分析 | 第39-49页 |
| 5.1 实验方法 | 第39-40页 |
| 5.2 序列分析及蛋白质结构预测 | 第40-48页 |
| 5.2.1 DNA序列分析 | 第40页 |
| 5.2.2 氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
| 5.2.3 蛋白质性质的预测 | 第41-42页 |
| 5.2.4 二级结构预测 | 第42-44页 |
| 5.2.5 信号肽预测 | 第44-45页 |
| 5.2.6 跨膜结构域的预测 | 第45-47页 |
| 5.2.7 三级结构预测 | 第47-48页 |
| 5.3 结论 | 第48-49页 |
| 5.3.1 序列分析 | 第48页 |
| 5.3.2 蛋白质结构预测 | 第48-49页 |
| 第六章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53页 |