摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 水稻抗病基因的研究 | 第11-20页 |
前言 | 第11页 |
1.1 植物的抗病基因 | 第11-12页 |
1.2 水稻中的抗病相关基因 | 第12-16页 |
1.2.1 NBS(nucleotide binding site,核苷酸结合位点)类 | 第12-13页 |
1.2.2 RLK(receptor protein kinases,受体类蛋白激酶)类 | 第13-14页 |
1.2.3 CLAT(clathrin,网格蛋白) | 第14-15页 |
1.2.4 bZIP转录因子 | 第15-16页 |
1.3 水稻反转座子突变体的研究 | 第16-18页 |
1.3.1 水稻反转座子的发现和分离 | 第17页 |
1.3.2 水稻反转座子Tos17的应用 | 第17-18页 |
1.3.3 Tos17反转座子存在的问题 | 第18页 |
1.4 本研究的选题 | 第18-20页 |
第二章 Tos17插入突变体鉴定 | 第20-31页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 药品及试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-25页 |
2.2.1 种植Tos17插入突变体,繁殖种子 | 第21页 |
2.2.2 基因组DNA提取 | 第21-22页 |
2.2.3 第一轮PCR,鉴定有无Tos17插入 | 第22-24页 |
2.2.4 第二轮PCR,鉴定Tos17插入的纯合体 | 第24-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
2.3.1 第一轮PCRTos17转座子鉴定结果 | 第25-27页 |
2.3.2 第二轮PCR鉴定纯合体结果 | 第27-30页 |
2.4 讨论 | 第30-31页 |
第三章 目标基因与GFP融合的瞬时表达载体构建及蛋白质细胞定位 | 第31-41页 |
3.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.1.1 菌株与质粒 | 第31页 |
3.1.2 药品及试剂 | 第31-32页 |
3.1.3 实验仪器 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-35页 |
3.2.1 目标基因全长cDNA克隆 | 第32页 |
3.2.2 入门载体构建 | 第32-33页 |
3.2.3 GFP标记的目标基因瞬时表达载体的构建 | 第33-34页 |
3.2.4 重组质粒的鉴定与测序 | 第34页 |
3.2.5 瞬时表达和亚细胞定位 | 第34-35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-40页 |
3.3.1 重组表达载体的鉴定 | 第35-38页 |
3.3.2 亚细胞定位结果 | 第38-40页 |
3.4 讨论 | 第40-41页 |
第四章 基因表达分析 | 第41-49页 |
4.1 实验材料 | 第41-42页 |
4.1.1 植物材料 | 第41页 |
4.1.2 药品及试剂 | 第41-42页 |
4.1.3 实验仪器 | 第42页 |
4.2 实验方法 | 第42-46页 |
4.2.1 诱抗剂BTH处理水稻突变体以及野生型 | 第42-43页 |
4.2.2 水稻总RNA的提取以及反转录反应 | 第43-45页 |
4.2.3 RT-PCR鉴定野生型中NBS、RLK、CLAT、bZIP基因的表达 | 第45页 |
4.2.4 RT-PCR鉴定防卫反应标记基因PBZ1的表达情况 | 第45-46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-47页 |
4.3.1 野生型日本晴中NBS、RLK、CLAT、bZIP基因的表达结果 | 第46页 |
4.3.2 防卫反应标记基因PBZ1的表达结果 | 第46-47页 |
4.4 讨论 | 第47-49页 |
第五章 水稻突变体对白叶枯菌的抗性分析及防卫反应相关酶活性测定 | 第49-56页 |
5.1 实验材料 | 第49-50页 |
5.1.1 植物材料和菌株 | 第49页 |
5.1.2 药品及试剂 | 第49-50页 |
5.1.3 实验仪器 | 第50页 |
5.2 实验方法 | 第50-52页 |
5.2.1 水稻白叶枯菌培养 | 第50页 |
5.2.2 接种 | 第50页 |
5.2.3 水稻突变体对白叶枯菌的抗病性测定和评价 | 第50-51页 |
5.2.4 叶片中PAL酶活性测定 | 第51页 |
5.2.5 叶片中LOX酶活性测定 | 第51-52页 |
5.3 结果与分析 | 第52-54页 |
5.3.1 各突变体对白叶枯菌的抗病性 | 第52-53页 |
5.3.2 各突变体的叶片中PAL酶活性 | 第53页 |
5.3.3 各突变体叶片中LOX酶活性 | 第53-54页 |
5.4 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
附录 | 第66页 |