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miR-218靶向调控HMGB1-RAGE通路抑制胶质瘤发生发展机制研究

中文摘要第3-6页
Abstract第6-8页
缩略词表Ⅰ第9-10页
缩略词表Ⅱ第10-14页
前言第14-23页
第一部分 胶质瘤中miRNA表达差异分析筛选及其靶基因预测第23-40页
    1.1 材料第23-24页
        1.1.1 主要仪器和材料第23-24页
        1.1.2 主要配制溶液第24页
        1.1.3 主要试剂第24页
    1.2 生物信息学分析miRNA在胶质瘤中表达差异第24-25页
    1.3 PCR Array筛选miRNA第25-30页
        1.3.1 研究对象选取第25-26页
        1.3.2 患者胶质瘤标本取材、处理和病理分级第26页
        1.3.3 样品的脱蜡处理第26页
        1.3.4 样品总RNA的提取第26-27页
        1.3.5 RNA质量检测第27-28页
        1.3.6 cDNA合成第28-29页
        1.3.7 Real-Time PCR第29页
        1.3.8 数据分析:采用ΔΔCt方法第29-30页
    1.4 生物信息学方法预测miR-218的靶基因第30-31页
    1.5 结果第31-36页
        1.5.1 PCR Array筛选胶质瘤中差异性表达的miRNA第31-33页
        1.5.2 生物信息学分析miRNA在胶质瘤中表达差异第33-34页
        1.5.3 预测表明HMGB1是miR-218的靶基因第34-36页
    1.6 讨论第36-39页
    1.7 结论第39-40页
第二部分 miR-218、HMGB1、RAGE的表达与不同病理级别胶质瘤及预后的关系第40-81页
    2.1 材料第40-44页
        2.1.1 主要仪器和材料第40-41页
        2.1.2 主要配制溶液第41-43页
        2.1.3 主要试剂第43-44页
    2.2.方法第44-59页
        2.2.1 研究对象选取第44-45页
        2.2.2 患者胶质瘤标本取材、处理和病理分级第45页
        2.2.3 肿瘤组织标本及正常脑组织标本总RNA(Total RNA)提取第45-46页
        2.2.4 测定RNA浓度、纯度、完整性第46页
        2.2.5 实时荧光定量PCR检测miR-218在正常脑组织及不同级别胶质瘤中表达第46-48页
        2.2.6 半定量PCR检测靶基因HMGB1、RAGE在不同级别胶质瘤中表达第48-50页
        2.2.7 实时荧光定量PCR检测HMGB1、RAGE在正常脑组织及不同级别胶质瘤中表达情况第50-52页
        2.2.8 免疫组组化学方法检测HMGB1、RAGE的表达情况第52-55页
        2.2.9 蛋白质印迹法检测HMGB1、RAGE的表达情况第55-58页
        2.2.10 所有纳入本研究患者随访第58页
        2.2.11 统计学分析第58-59页
    2.3 结果第59-76页
        2.3.1 提取Total RNA质量检验第59-60页
        2.3.2 miR-218在正常脑组织和胶质瘤中的表达第60-61页
        2.3.3 miR-218表达与胶质瘤临床病理特征的关联第61-62页
        2.3.4 miR-218低表达预测胶质瘤患者的预后不良第62-63页
        2.3.5 总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的单变量以及多变量Cox回归分析第63-64页
        2.3.6 半定量PCR初步测定HMGB1和RAGE在胶质瘤中的表达量第64-66页
        2.3.7 荧光定量PCR初步测定HMGB1和RAGE在胶质瘤中的表达量第66-69页
        2.3.8 免疫组织化学染色法检测HMGB1和RAGE蛋白在正常脑组织及胶质瘤内表达第69-72页
        2.3.9 蛋白印迹法检测HMGB1和RAGE蛋白在正常脑组织及胶质瘤内表达第72-75页
        2.3.10 胶质瘤内HMGB1和RAGE表达量与总生存时间(OS)及无进展生存时间(PFS)相关性分析第75-76页
    2.4 讨论第76-80页
    2.5 结论第80-81页
参考文献第81-86页
在学期间的研究成果第86-87页
致谢第87页

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