中文摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词表Ⅰ | 第9-10页 |
缩略词表Ⅱ | 第10-14页 |
前言 | 第14-23页 |
第一部分 胶质瘤中miRNA表达差异分析筛选及其靶基因预测 | 第23-40页 |
1.1 材料 | 第23-24页 |
1.1.1 主要仪器和材料 | 第23-24页 |
1.1.2 主要配制溶液 | 第24页 |
1.1.3 主要试剂 | 第24页 |
1.2 生物信息学分析miRNA在胶质瘤中表达差异 | 第24-25页 |
1.3 PCR Array筛选miRNA | 第25-30页 |
1.3.1 研究对象选取 | 第25-26页 |
1.3.2 患者胶质瘤标本取材、处理和病理分级 | 第26页 |
1.3.3 样品的脱蜡处理 | 第26页 |
1.3.4 样品总RNA的提取 | 第26-27页 |
1.3.5 RNA质量检测 | 第27-28页 |
1.3.6 cDNA合成 | 第28-29页 |
1.3.7 Real-Time PCR | 第29页 |
1.3.8 数据分析:采用ΔΔCt方法 | 第29-30页 |
1.4 生物信息学方法预测miR-218的靶基因 | 第30-31页 |
1.5 结果 | 第31-36页 |
1.5.1 PCR Array筛选胶质瘤中差异性表达的miRNA | 第31-33页 |
1.5.2 生物信息学分析miRNA在胶质瘤中表达差异 | 第33-34页 |
1.5.3 预测表明HMGB1是miR-218的靶基因 | 第34-36页 |
1.6 讨论 | 第36-39页 |
1.7 结论 | 第39-40页 |
第二部分 miR-218、HMGB1、RAGE的表达与不同病理级别胶质瘤及预后的关系 | 第40-81页 |
2.1 材料 | 第40-44页 |
2.1.1 主要仪器和材料 | 第40-41页 |
2.1.2 主要配制溶液 | 第41-43页 |
2.1.3 主要试剂 | 第43-44页 |
2.2.方法 | 第44-59页 |
2.2.1 研究对象选取 | 第44-45页 |
2.2.2 患者胶质瘤标本取材、处理和病理分级 | 第45页 |
2.2.3 肿瘤组织标本及正常脑组织标本总RNA(Total RNA)提取 | 第45-46页 |
2.2.4 测定RNA浓度、纯度、完整性 | 第46页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR检测miR-218在正常脑组织及不同级别胶质瘤中表达 | 第46-48页 |
2.2.6 半定量PCR检测靶基因HMGB1、RAGE在不同级别胶质瘤中表达 | 第48-50页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR检测HMGB1、RAGE在正常脑组织及不同级别胶质瘤中表达情况 | 第50-52页 |
2.2.8 免疫组组化学方法检测HMGB1、RAGE的表达情况 | 第52-55页 |
2.2.9 蛋白质印迹法检测HMGB1、RAGE的表达情况 | 第55-58页 |
2.2.10 所有纳入本研究患者随访 | 第58页 |
2.2.11 统计学分析 | 第58-59页 |
2.3 结果 | 第59-76页 |
2.3.1 提取Total RNA质量检验 | 第59-60页 |
2.3.2 miR-218在正常脑组织和胶质瘤中的表达 | 第60-61页 |
2.3.3 miR-218表达与胶质瘤临床病理特征的关联 | 第61-62页 |
2.3.4 miR-218低表达预测胶质瘤患者的预后不良 | 第62-63页 |
2.3.5 总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的单变量以及多变量Cox回归分析 | 第63-64页 |
2.3.6 半定量PCR初步测定HMGB1和RAGE在胶质瘤中的表达量 | 第64-66页 |
2.3.7 荧光定量PCR初步测定HMGB1和RAGE在胶质瘤中的表达量 | 第66-69页 |
2.3.8 免疫组织化学染色法检测HMGB1和RAGE蛋白在正常脑组织及胶质瘤内表达 | 第69-72页 |
2.3.9 蛋白印迹法检测HMGB1和RAGE蛋白在正常脑组织及胶质瘤内表达 | 第72-75页 |
2.3.10 胶质瘤内HMGB1和RAGE表达量与总生存时间(OS)及无进展生存时间(PFS)相关性分析 | 第75-76页 |
2.4 讨论 | 第76-80页 |
2.5 结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-86页 |
在学期间的研究成果 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |