| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-46页 |
| 1.1 MiRNA生物功能 | 第12-15页 |
| 1.1.1 MiRNA与生长发育 | 第12-13页 |
| 1.1.2 miRNA与细胞生长分化及凋亡 | 第13页 |
| 1.1.3 miRNA与疾病发生 | 第13-15页 |
| 1.2 传统方法检测miRNA | 第15-23页 |
| 1.2.1 Northern印迹分析检测miRNA | 第15-16页 |
| 1.2.2 微点阵(Microarray)芯片分析检测miRNA | 第16-18页 |
| 1.2.3 聚合酶链式反应(PCR)分析检测miRNA | 第18-23页 |
| 1.3 恒温扩增反应技术分析检测miRNA | 第23-36页 |
| 1.3.1 链顶替扩增技术检测miRNA | 第23-26页 |
| 1.3.2 滚环恒温指数扩增技术检测miRNA | 第26-31页 |
| 1.3.3 环介导等温扩增技术技术分析检测miRNA | 第31-36页 |
| 1.4 恒温指数扩增(IEXPAR)技术 | 第36-39页 |
| 1.4.1 恒温指数扩增技术分析检测miRNA | 第37-38页 |
| 1.4.2 基于恒温指数扩增技术检测肿瘤细胞 | 第38-39页 |
| 1.4.4 基于恒温指数扩增技术检测DNA甲基化 | 第39页 |
| 1.5 本论文研究目的及意义 | 第39-44页 |
| 1.6 本论文研究内容及创新点 | 第44-46页 |
| 第2章 MiRNA引发的IE XPAR反应中序列依赖性的探索研究 | 第46-68页 |
| 2.1 引言 | 第46-48页 |
| 2.2 实验部分 | 第48-50页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第48-49页 |
| 2.2.2 还原法制备AuNPs及其标记修饰 | 第49-50页 |
| 2.2.3 传统IEXAPR体系检测miRNAs的步骤 | 第50页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第50-67页 |
| 2.3.1 尝试利用Au纳米颗粒解决恒温指数扩增瓶颈问题 | 第51-56页 |
| 2.3.2 传统IEXPAR模板3'末端添加Poly(dT)10及巯基修饰 | 第56-59页 |
| 2.3.3 单链结合蛋白用于抑制非特异性扩增 | 第59-61页 |
| 2.3.4 传统IEXPAR模板3'末端修饰及添加SSB对其他miRNAs检测的影响 | 第61-67页 |
| 2.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 第3章 基于3WJ-IEXPAR恒温指数扩增反应检测分析植物microRNA | 第68-85页 |
| 3.1 引言 | 第68-69页 |
| 3.2 实验部分 | 第69-74页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第69-70页 |
| 3.2.2 模式植物拟南芥Total RNA的提取 | 第70-72页 |
| 3.2.3 实验过程 | 第72-74页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第74-84页 |
| 3.3.1 传统的IEXPAR检测分析3'-末端碱基2'-O-甲基化修饰的植物miRNA | 第74-75页 |
| 3.3.2 基于3WJ-IEXPAR检测分析miRNA的原理 | 第75-77页 |
| 3.3.3 基于3WJ-IEXPAR检测植物miRNA的校正曲线和线性范围 | 第77-80页 |
| 3.3.4 基于3WJ-IEXPAR检测分析方法的选择性评价 | 第80-83页 |
| 3.3.5 拟南芥样品Total RNA中ath-miR156a的分析 | 第83-84页 |
| 3.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 第4章 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 科研成果 | 第102页 |
