摘要 | 第8-9页 |
abstract | 第9页 |
第一章 绪论 | 第10-24页 |
1.1 miRNA的简介及种类 | 第10-11页 |
1.1.1 miRNA的简介 | 第10页 |
1.1.2 miRNA的常见种类 | 第10-11页 |
1.2 miRNA的检测方法 | 第11-12页 |
1.2.1 Northern印迹杂交技术 | 第11页 |
1.2.2 实时荧光定量PCR | 第11-12页 |
1.2.3 DNA微阵列技术 | 第12页 |
1.3 核酸等温扩增技术 | 第12-16页 |
1.3.1 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第13页 |
1.3.2 滚环扩增技术(RCA) | 第13-14页 |
1.3.3 单引物等温扩增技术(SPIA) | 第14页 |
1.3.4 依赖解旋酶的等温扩增技术(HDA) | 第14-15页 |
1.3.5 链置换反应技术(SDA) | 第15-16页 |
1.3.6 交叉引物扩增技术(CPA) | 第16页 |
1.4 荧光光谱检测技术 | 第16-21页 |
1.4.1 荧光产生的原理 | 第16-17页 |
1.4.2 DNA荧光探针及应用 | 第17-21页 |
1.5 本论文研究思路 | 第21-24页 |
第二章 基于支链滚环扩增耦合内切酶信号放大作用超灵敏荧光检测miRNA-155 | 第24-38页 |
2.1 前言 | 第24-25页 |
2.2 实验部分 | 第25-28页 |
2.2.1 材料和试剂 | 第25-26页 |
2.2.2 环状模板DNA的制备 | 第26-27页 |
2.2.3 miRNA-155 检测步骤 | 第27页 |
2.2.4 细胞提取物的制备 | 第27页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.2.6 荧光测量 | 第28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-37页 |
2.3.1 基于支链滚环扩增耦合内切酶信号放大作用超灵敏荧光检测miRNA-155 基本原理 | 第28-30页 |
2.3.2 可行性论证 | 第30-31页 |
2.3.3 琼脂糖凝胶电泳成像 | 第31-32页 |
2.3.4 实验条件的优化 | 第32-34页 |
2.3.5 特异性评估 | 第34页 |
2.3.6 检测性能评估 | 第34-35页 |
2.3.7 实际样品分析 | 第35-36页 |
2.3.8 抗干扰能力测试 | 第36-37页 |
2.4 结论 | 第37-38页 |
第三章 基于四步信号放大技术的超灵敏荧光传感器检测miRNA-122 | 第38-50页 |
3.1 前言 | 第38-39页 |
3.2 实验部分 | 第39-41页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
3.2.3 miRNA-122 检测过程 | 第40页 |
3.2.4 细胞提取过程 | 第40-41页 |
3.2.5 荧光检测 | 第41页 |
3.3 结果与讨论 | 第41-49页 |
3.3.1 基于四步信号放大反应的荧光生物传感器的工作原理 | 第41-42页 |
3.3.2 可行性论证 | 第42-44页 |
3.3.3 实验条件的优化 | 第44-45页 |
3.3.4 特异性检验 | 第45-46页 |
3.3.5 标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
3.3.6 实际样品检测 | 第47-48页 |
3.3.7 抗干扰能力测试 | 第48-49页 |
3.4 结论 | 第49-50页 |
第四章 结论与展望 | 第50-52页 |
4.1 结论 | 第50页 |
4.2 展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-62页 |
附录 | 第62页 |