| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 人巨细胞病毒 | 第9-13页 |
| 1.1.1 人巨细胞病毒概述 | 第9-10页 |
| 1.1.2 人巨细胞病毒的感染及危害 | 第10-11页 |
| 1.1.3 人巨细胞病毒中免疫原性蛋白质 | 第11-13页 |
| 1.2 人巨细胞病毒诱导的免疫反应 | 第13-15页 |
| 1.2.1 体液免疫 | 第13-14页 |
| 1.2.2 细胞免疫 | 第14-15页 |
| 1.3 人巨细胞病毒的防治 | 第15-20页 |
| 1.3.1 化学药物 | 第15-16页 |
| 1.3.2 中药 | 第16页 |
| 1.3.3 毒性T淋巴细胞和免疫球蛋白 | 第16-17页 |
| 1.3.4 人巨细胞病毒疫苗 | 第17-20页 |
| 1.4 本论文的研究思路和研究内容 | 第20-21页 |
| 2 重组HCMV抗原表位的基因克隆、原核表达及产物纯化 | 第21-34页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.3.1 pp65_(490-508-g)B_(607-621) 基因的获得 | 第24-25页 |
| 2.3.2 pET-32a-pp65_(490-508-g)B_(607-621) 重组质粒的构建 | 第25-28页 |
| 2.3.3 重组质粒的诱导表达 | 第28页 |
| 2.3.4 重组蛋白的分离纯化 | 第28-29页 |
| 2.3.5 SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 2.4 实验结果 | 第30-32页 |
| 2.4.1 PCR扩增目的基因片段 | 第30页 |
| 2.4.2 重组质粒pET-32a-pp65_(490-508-g)B_(607-621) 的构建及双酶切验证 | 第30-31页 |
| 2.4.3 重组蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第31-32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-33页 |
| 2.6 小结 | 第33-34页 |
| 3 重组蛋白的体液免疫效果评价 | 第34-48页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第34页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第34-36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.3.1 动物免疫 | 第36-37页 |
| 3.3.2 Western blot法检测抗血清的特异性 | 第37-38页 |
| 3.3.3 间接ELISA方法的建立 | 第38-40页 |
| 3.3.4 间接ELISA法测定抗血清的效价 | 第40页 |
| 3.3.5 双抗夹心ELISA法检测抗原特异性 | 第40-41页 |
| 3.4 实验结果 | 第41-46页 |
| 3.4.1 Western blot检测抗血清的特异性 | 第41页 |
| 3.4.2 间接ELISA方法的建立 | 第41-45页 |
| 3.4.3 间接ELISA法测定抗血清的效价 | 第45-46页 |
| 3.4.4 双抗夹心ELISA法检测抗原特异性 | 第46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-47页 |
| 3.6 小结 | 第47-48页 |
| 4 重组蛋白的细胞免疫效果评价 | 第48-56页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第48页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 4.3.1 收集血清抗凝血 | 第49页 |
| 4.3.2 流式细胞仪检测 | 第49页 |
| 4.3.3 小鼠血清中IFN-γ 浓度的测定 | 第49-50页 |
| 4.3.4 小鼠血清中IL-2 浓度的测定 | 第50页 |
| 4.3.5 小鼠血清中IL-12 浓度的测定 | 第50页 |
| 4.3.6 统计学分析 | 第50页 |
| 4.4 实验结果 | 第50-53页 |
| 4.4.1 流式细胞仪检测 | 第50-51页 |
| 4.4.2 小鼠血清中IFN-γ 浓度的测定 | 第51-52页 |
| 4.4.3 小鼠血清中IL-2 浓度的测定 | 第52-53页 |
| 4.4.4 小鼠血清中IL-12 浓度的测定 | 第53页 |
| 4.5 讨论 | 第53-55页 |
| 4.6 小结 | 第55-56页 |
| 结论与展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录A 缩略语表及名称说明 | 第64-65页 |
| 附录B pET-32(a)载体质粒 | 第65-67页 |
| 附录C pET-32a-pp65_(490-508-g)B_(607-621) 测序结果 | 第67-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
