| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-27页 |
| 1.1 大丽轮枝菌的生长及危害 | 第14-17页 |
| 1.1.1 大丽轮枝菌的形态 | 第14-15页 |
| 1.1.2 大丽轮枝菌的致病机理及研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2 T-DNA插入突变体研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.1 ATMT法转化机理 | 第17页 |
| 1.2.2 hiTAIL-PCR与T-DNA片段插入位点侧翼序列分析 | 第17-18页 |
| 1.3 温度相关基因功能研究进展 | 第18-24页 |
| 1.3.1 生物中温度应激诱导基因 | 第18-20页 |
| 1.3.2 酵母中温度敏感基因研究进展 | 第20-23页 |
| 1.3.3 温度敏感缺陷基因在丝状真菌中研究进展 | 第23页 |
| 1.3.4 大丽轮枝菌和温度关系 | 第23-24页 |
| 1.4 分泌系统调节蛋白与致病力关系研究进展 | 第24-27页 |
| 1.4.1 分泌系统调节蛋白在细菌中的研究进展 | 第24-25页 |
| 1.4.2 分泌系统调节蛋白在真菌中的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.4.3 大丽轮枝菌中分泌系统调节蛋白的研究进展 | 第26-27页 |
| 第二章 大丽轮枝菌T-DNA插入突变体的筛选及鉴定 | 第27-42页 |
| 2.1 实验材料试剂及仪器软件 | 第27页 |
| 2.1.1 实验材料及试剂 | 第27页 |
| 2.1.2 仪器软件 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 大丽轮枝菌活化培养 | 第27-28页 |
| 2.2.2 致病力测定 | 第28页 |
| 2.2.3 生物学特性测定 | 第28页 |
| 2.2.4 致病缺陷型突变体的分子验证 | 第28-32页 |
| 2.2.5 致病缺陷型突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析 | 第32-33页 |
| 2.2.6 致病相关基因的克隆 | 第33-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-41页 |
| 2.3.1 致病缺陷型突变体的筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.2 致病缺陷型突变体的分子检测 | 第37-38页 |
| 2.3.3 致病缺陷型突变体的生物学表型分析 | 第38-39页 |
| 2.3.4 致病缺陷型突变体的T-DNA插入位点侧翼序列分析 | 第39-40页 |
| 2.3.5 致病相关基因克隆与分析 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 VdNOP12的初步研究 | 第42-66页 |
| 3.1 实验材料试剂及仪器软件 | 第42页 |
| 3.1.1 实验试剂材料 | 第42页 |
| 3.1.2 供试棉花品种、菌株和质粒 | 第42页 |
| 3.1.3 实验仪器软件 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-56页 |
| 3.2.1 拷贝数验证及基因表达分析 | 第42-47页 |
| 3.2.2 敲除、回补突变体菌株的构建及分析 | 第47-53页 |
| 3.2.3 突变株致病力的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.2.4 生物学测定 | 第54页 |
| 3.2.5 细胞核DAPI染色 | 第54-55页 |
| 3.2.6 不同胁迫条件下生长表型 | 第55页 |
| 3.2.7 不同温度梯度下生长直径检测 | 第55页 |
| 3.2.8 本实验中所用引物列表 | 第55-56页 |
| 3.3 实验结果 | 第56-65页 |
| 3.3.1 T-DNA插入突变体发病情况 | 第56页 |
| 3.3.2 T-DNA插入突变体位点检测 | 第56-58页 |
| 3.3.3 敲除、回补突变体及其分析 | 第58-59页 |
| 3.3.4 致病力鉴定 | 第59-60页 |
| 3.3.5 VdNOP12亚细胞定位 | 第60-61页 |
| 3.3.6 生物学测定 | 第61-62页 |
| 3.3.7 非生物胁迫条件下生长表型 | 第62-63页 |
| 3.3.8 不同温度梯度生长表型检测 | 第63-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-66页 |
| 第四章 Vd LHS1的初步研究 | 第66-80页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第66页 |
| 4.2 实验方法 | 第66-69页 |
| 4.2.1 大丽轮枝菌Vd991中VdLHS1基因的克隆与分析 | 第66页 |
| 4.2.2 回补菌株的构建 | 第66-67页 |
| 4.2.3 ER-Tracker染色 | 第67页 |
| 4.2.4 生物学分析 | 第67-68页 |
| 4.2.5 不同胁迫条件的影响 | 第68页 |
| 4.2.6 致病力鉴定与分析 | 第68页 |
| 4.2.7 分泌酶的检测 | 第68-69页 |
| 4.2.8 本实验所用引物列表 | 第69页 |
| 4.3 实验结果 | 第69-79页 |
| 4.3.1 VdLHS1基因克隆及聚类分析 | 第69-70页 |
| 4.3.2 敲除、回补质粒的构建及转化子鉴定 | 第70-71页 |
| 4.3.3 亚细胞定位 | 第71-72页 |
| 4.3.4 生物学特性分析 | 第72-75页 |
| 4.3.5 外界非生物胁迫分析 | 第75-76页 |
| 4.3.6 致病力鉴定及分析 | 第76-77页 |
| 4.3.7 分泌酶的检测 | 第77-79页 |
| 4.4 讨论 | 第79-80页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 附录Ⅰ | 第90-91页 |
| 附录Ⅱ | 第91-95页 |
| 附录Ⅲ | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 作者简历 | 第97页 |
