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过表达线粒体铁蛋白在由6-OHDA诱导的帕金森模型中的保护机制的研究

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
缩略表第12-14页
引言第14-16页
第一章 文献综述——帕金森病的致病机理及研究进展第16-59页
    1.1 造成PD 的遗传因素第16-24页
        1.1.1 PARK1(α-Synuclein)第18-20页
        1.1.2 PARK2 (PARKIN)第20-21页
        1.1.3 DJ-1第21-22页
        1.1.4 PINK1第22-23页
        1.1.5 LRRK2第23-24页
    1.2 造成PD 的环境因素-氧化应激与帕金森病第24-32页
        1.2.1 氧化应激的证据第24-28页
        1.2.2 铁与氧化应激第28-32页
    1.3 细胞质铁蛋白和线粒体铁蛋白第32-40页
        1.3.1 细胞质铁蛋白(cytosolic ferritin)第32-35页
        1.3.2 线粒体铁蛋白(mitochondrial ferritin,MtFt)第35-40页
    References第40-59页
第二章 过表达线粒体铁蛋白在由6-OHDA 诱导的帕金森模型中的保护机制的研究第59-104页
    2.1 前言第59-60页
    2.2 材料与方法第60-67页
        2.2.1 材料第60-61页
        2.2.2 细胞培养、转染及阳性单克隆的筛选第61-62页
        2.2.3 用MTT 法测定细胞活力及细胞生长状况第62页
        2.2.4 用荧光显微镜观察细胞核形态变化第62页
        2.2.5 用PI 单染流式细胞术检测细胞凋亡第62-63页
        2.2.6 细胞内活性氧的测定第63页
        2.2.7 线粒体膜电位的测定第63-64页
        2.2.8 细胞内钙离子浓度的测定第64页
        2.2.9 细胞内NO 的测定第64-65页
        2.2.10 细胞内脂质过氧化损伤测定第65页
        2.2.11 用细胞免疫荧光法检测细胞色素C 的释放第65页
        2.2.12 细胞内LIP(liable iron pool)的检测第65-66页
        2.2.13 线粒体复合物I 活力的测定第66页
        2.2.14 Western Blot 检测MtFt、Bcl-2、Bax、ferritin、cytochrome C. Inos.T fR 和NF-kB 的表达第66-67页
        2.2.15 数据统计及分析第67页
    2.3 实验结果第67-86页
        2.3.1 单克隆MtFt 转染筛选鉴定、细胞活力和细胞生长的测定第67-70页
        2.3.2 MtFt 对细胞内活性氧和NO 产生的影响第70-71页
        2.3.3 MtFt 对细胞对细胞线粒体膜电位的影响第71-72页
        2.3.4 细胞内钙离子的变化第72-73页
        2.3.5 MtFt 对脂质过氧化的作用第73-74页
        2.3.6 MtFt 对细胞铁库内铁含量的影响第74-75页
        2.3.7 MtFt 对线粒体复合物I(complexI)活力的影响第75-76页
        2.3.8 荧光显微镜观察细胞核形态的变化第76-77页
        2.3.9 PI 单染-流式细胞分析(FACS analysis)细胞凋亡率第77-80页
        2.3.10 细胞免疫荧光观察细胞色素C 的释放第80-83页
        2.3.11 western blot 检测细胞内MtFt、Bcl-2、Bax、TfR、ferritin第83-86页
    2.4 讨论第86-93页
    结论第93-94页
    本研究的主要创新点第94-95页
    References第95-104页
发表和待发表的论文第104-105页
致谢第105页

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