| 提要 | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-13页 |
| 第二章 材料 | 第13-17页 |
| 2.1 毒株及其抗体 | 第13-16页 |
| 2.1.1 牛腺病毒-3 | 第13页 |
| 2.1.2 牛细小病毒 | 第13-14页 |
| 2.1.3 呼肠孤病毒 | 第14-15页 |
| 2.1.4 牛腹泻病毒 | 第15页 |
| 2.1.5 副流感病毒-3 | 第15-16页 |
| 2.2 细胞 | 第16页 |
| 2.3 主要器材 | 第16页 |
| 2.4 主要试剂 | 第16-17页 |
| 第三章 方法 | 第17-24页 |
| 3.1 适宜牛血清外源病毒增殖广谱细胞系的选择 | 第17-18页 |
| 3.1.1 配制VERO细胞生长液 | 第17页 |
| 3.1.2 配制MDBK细胞生长液 | 第17页 |
| 3.1.3 配制BT细胞生长液 | 第17页 |
| 3.1.4 细胞接种 | 第17-18页 |
| 3.1.5 病毒接种 | 第18页 |
| 3.2 红细胞吸附试验 | 第18页 |
| 3.2.1 红细胞悬液制备 | 第18页 |
| 3.2.2 红细胞吸附试验 | 第18页 |
| 3.2.3 血吸附试验结果判定 | 第18页 |
| 3.3 免疫荧光实验 | 第18-19页 |
| 3.4 用不同培养基培养广谱细胞适应性及其生长特性比较 | 第19-20页 |
| 3.4.1 广谱细胞不同生长液配制 | 第19页 |
| 3.4.2 细胞培养 | 第19-20页 |
| 3.5 预试验 | 第20页 |
| 3.6 牛血清外源病毒检限 | 第20-22页 |
| 3.6.1 病毒滴度测定 | 第20-21页 |
| 3.6.1.1 BVDV(CV24株)病毒滴度测定 | 第20页 |
| 3.6.1.2 BAV病毒滴度测定 | 第20-21页 |
| 3.6.1.3 BPV病毒滴度测定 | 第21页 |
| 3.6.1.4 PI3病毒滴度测定 | 第21页 |
| 3.6.1.5 REO病毒滴度测定 | 第21页 |
| 3.6.2 细胞培养物连传3代外源病毒检出 | 第21-22页 |
| 3.6.2.1 盲传一代 | 第21-22页 |
| 3.6.2.2 盲传二代 | 第22页 |
| 3.6.2.3 盲传三代 | 第22页 |
| 3.7 RT-PCR法 | 第22-24页 |
| 3.7.1 标准曲线备 | 第22页 |
| 3.7.2 细胞培养物核酸提取 | 第22-23页 |
| 3.7.3 RT-PCR扩增 | 第23页 |
| 3.7.4 反应条件 | 第23-24页 |
| 第四章 结果与分析 | 第24-34页 |
| 4.1 适宜牛血清外源病毒增殖广谱细胞系结果 | 第24-27页 |
| 4.2 用不同培养基培养MDBK细胞适应性及其生长特性比较 | 第27-29页 |
| 4.3 预试验结果 | 第29-30页 |
| 4.4 五种病毒滴度结果 | 第30-31页 |
| 4.5 细胞培养物连传3代检出结果 | 第31-34页 |
| 4.5.1 传一代结果 | 第31页 |
| 4.5.2 传二代结果 | 第31-32页 |
| 4.5.3 传三代结果 | 第32页 |
| 4.5.4 五种病毒细胞培养物连传三代,三种方法综合检查结果 | 第32-34页 |
| 第五章 应用 | 第34-35页 |
| 第六章 结论 | 第35-36页 |
| 第七章 讨论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 摘要 | 第40-42页 |
| Abstract | 第42页 |
