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紫外线B辐照诱导大鼠角膜上皮细胞凋亡与枸杞多糖对凋亡的抑制作用及其机理研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 绪论第12-32页
    1.1 紫外线第12-15页
        1.1.1 紫外线的三个波段及其主要特点第12-13页
        1.1.2 紫外线辐照损伤机制第13-14页
        1.1.3 紫外线的益处第14-15页
    1.2 紫外线对哺乳动物眼的损害第15-18页
        1.2.1 哺乳动物眼和角膜的结构第15页
        1.2.2 紫外线对于角膜的损害第15-17页
        1.2.3 紫外线对于晶状体和视网膜的损害第17-18页
    1.3 细胞凋亡第18-24页
        1.3.1 细胞凋亡简介第18-19页
        1.3.2 细胞凋亡的机制第19-22页
        1.3.3 细胞凋亡的常用检测方法第22-24页
    1.4 与细胞凋亡相关的细胞信号通路第24-28页
    1.5 枸杞多糖的药理学活性及其作用机理第28-31页
        1.5.1 枸杞与枸杞多糖及其药理学活性第28页
        1.5.2 枸杞多糖作用机理的研究现状第28-30页
        1.5.3 枸杞多糖对眼的保护作用的研究现状第30-31页
    1.6 本实验的研究目的和意义第31-32页
第二章 实验材料和方法第32-47页
    2.1 实验材料第32-36页
        2.1.1 实验动物第32页
        2.1.2 主要试剂及溶液配制第32-35页
        2.1.3 主要实验仪器(仪器名称:品牌,型号,生产国家)第35-36页
        2.1.4 主要实验耗材第36页
    2.2 实验方法第36-47页
        2.2.1 原代大鼠角膜上皮细胞的提取与培养第36页
        2.2.2 细胞接种第36-37页
        2.2.3 细胞免疫荧光实验第37页
        2.2.4 UVB辐照模型第37-38页
        2.2.5 LBPs处理实验模型第38页
        2.2.6 细胞形态微分干涉成像观察第38页
        2.2.7 Hoechst 33258 染色检测细胞核变化第38-39页
        2.2.8 细胞活力检测第39页
        2.2.9 细胞凋亡率检测第39-40页
        2.2.10 细胞线粒体膜电位检测第40页
        2.2.11 细胞活性氧水平检测第40页
        2.2.12 凋亡相关基因表达水平检测第40-43页
        2.2.13 蛋白质免疫印迹(western blotting)检测蛋白表达变化第43-44页
        2.2.14 转录组测序(RNA-seq)相关检测与分析第44-45页
        2.2.15 数据分析第45-47页
第三章 实验结果第47-75页
    3.1 原代大鼠角膜上皮细胞的纯度鉴定第47-48页
    3.2 UVB诱导大鼠角膜上皮细胞凋亡的动态变化和时序第48-54页
        3.2.1 UVB辐射后细胞形态的变化第48-49页
        3.2.2 UVB辐射后细胞活力的变化第49-50页
        3.2.3 UVB辐射后细胞凋亡率的变化第50-52页
        3.2.4 UVB辐射后细胞线粒体膜电位的变化第52页
        3.2.5 UVB辐射后凋亡基因mRNA水平的变化第52-54页
    3.3 LBPs对UVB诱导的大鼠角膜上皮细胞凋亡的抑制作用第54-60页
        3.3.1 LBPs提升经UVB辐照的RCE细胞的活力第54-55页
        3.3.2 LBPs对UVB辐照诱导的RCE细胞形态和核形态变化的影响第55-59页
        3.3.3 LBPs降低经UVB辐照的RCE细胞的凋亡率第59-60页
    3.4 LBPs对UVB诱导的大鼠角膜上皮细胞凋亡抑制作用的机理第60-64页
        3.4.1 LBPs阻止UVB诱导的细胞线粒体膜电位的损失第60-61页
        3.4.2 LBPs影响UVB诱导的细胞凋亡基因表达第61-62页
        3.4.3 LBPs减弱UVB引发的JNK磷酸化第62-63页
        3.4.4 LBPs减少UVB诱导的细胞ROS的释放第63-64页
    3.5 LBPs保护RCE细胞对抗UVB辐照诱导损伤的转录组分析第64-75页
        3.5.1 转录组文库的建立与基因比对第64-66页
        3.5.2 表达量分析与差异表达基因的分析第66-69页
        3.5.3 差异表达基因的GO功能富集分析第69-72页
        3.5.4 差异表达基因的KEGG富集分析:凋亡通路及JNK和p38 MAP激酶通路第72-75页
第四章 讨论第75-84页
    4.1 RCE细胞的原代培养经验与UVB辐照诱导RCE细胞凋亡的时序第75-78页
    4.2 LBPs作为保护药物的选择理由及其优势第78-79页
    4.3 LBPs通过凋亡的线粒体途径来抑制细胞凋亡第79-80页
    4.4 LBPs通过抑制JNK磷酸化抑制细胞凋亡第80-81页
    4.5 ROS与细胞凋亡的关系及LBPs抑制ROS水平的提升第81-82页
    4.6 UVB辐照诱导细胞损伤及LBPs抑制该损伤中转录组的变化第82-84页
第五章 结论第84-87页
    5.1 主要结论第84页
    5.2 实验展望第84-87页
参考文献第87-103页
附录 缩略词表第103-107页
在学期间的研究成果第107-108页
致谢第108-109页

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