| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-32页 |
| ·尿酸氧化酶 | 第16-18页 |
| ·尿酸氧化酶简介 | 第16-17页 |
| ·人尿酸氧化酶的分子进化历史 | 第17-18页 |
| ·尿酸有关疾病及其治疗现状 | 第18-20页 |
| ·尿酸氧化酶研究进展 | 第20-21页 |
| ·牛乳铁蛋白肽(LfcinB) | 第21-24页 |
| ·牛乳铁蛋白肽简介 | 第21-22页 |
| ·LfcinB 的生物活性 | 第22-24页 |
| ·本课题的设计思路和研究内容 | 第24-32页 |
| ·设计思路 | 第24-28页 |
| ·研究内容 | 第28页 |
| ·本研究所用基因序列 | 第28-32页 |
| 第二章 狒狒尿酸氧化酶基因及其改造基因的克隆 | 第32-48页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料和方法 | 第32-43页 |
| ·菌种和质粒 | 第32页 |
| ·试剂及相关实验设备 | 第32-33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·所用引物 | 第33-35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·共有序列 rbUOX gene 43-603 和 rbUOX gene 625-897 的扩增 | 第43-44页 |
| ·rbUOX 全长基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·rbUOX-LfcinB、rbUOX-LfcinB_2及 rbUOX-LfcinB_3全长基因的扩增 | 第45-47页 |
| ·PCR 产物的 TA 克隆筛选 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第三章 表达载体的构建 | 第48-54页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料和方法 | 第48-51页 |
| ·菌种与质粒 | 第48-49页 |
| ·试剂及仪器 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第四章 狒狒尿酸氧化酶基因及改造基因在大肠杆菌中的表达 | 第54-60页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料和方法 | 第54-56页 |
| ·菌种和质粒 | 第54页 |
| ·试剂及仪器 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 第五章 重组蛋白生产发酵条件的初步优化 | 第60-66页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·材料和方法 | 第60-62页 |
| ·菌种 | 第60页 |
| ·试剂及仪器 | 第60-61页 |
| ·培养基 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-64页 |
| ·温度对目的蛋白诱导的影响 | 第62-63页 |
| ·诱导时间对目的蛋白的影响 | 第63页 |
| ·目的蛋白胞内存在形式 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第六章 重组蛋白的分离及其表征研究 | 第66-80页 |
| ·引言 | 第66页 |
| ·材料和方法 | 第66-69页 |
| ·试剂及仪器 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-78页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第69-70页 |
| ·BCA 法测定目的蛋白的产量及纯化收率 | 第70-72页 |
| ·目的蛋白的酶活检验 | 第72页 |
| ·MALDI-TOF-MS/MS 检测目的蛋白 | 第72-78页 |
| ·小结 | 第78-80页 |
| 第七章 重组蛋白免疫原性检测 | 第80-84页 |
| ·引言 | 第80页 |
| ·材料和方法 | 第80-82页 |
| ·试剂及仪器 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80-82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-84页 |
| 第八章 结论与展望 | 第84-86页 |
| 本论文的创新点 | 第86-87页 |
| 问题与建议 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-92页 |
| 附录 | 第92-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 博士期间发表的学术论文 | 第98-100页 |
| 作者和导师简介 | 第100-101页 |
| 附件 | 第101-102页 |
