| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略表 | 第13-14页 |
| 文献综述 鸭疫里默氏杆菌病疫苗研究进展 | 第14-22页 |
| 试验研究 | 第22-82页 |
| 第一章 RA贵州株的分离鉴定及OmpA与 16S rRNA基因的序列分析 | 第22-40页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| 1.1 病料来源 | 第23页 |
| 1.2 试验动物 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 1.4 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-28页 |
| 2.1 病原菌的分离培养 | 第24页 |
| 2.2 生化鉴定 | 第24页 |
| 2.3 PCR扩增 | 第24-26页 |
| 2.4 血清型鉴定 | 第26页 |
| 2.5 药敏试验 | 第26页 |
| 2.6 动物致病性试验 | 第26页 |
| 2.7 RA OmpA及 16S rRNA基因序列分析 | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-37页 |
| 3.1 分离菌培养和形态特征 | 第28-29页 |
| 3.2 生化特性试验 | 第29页 |
| 3.3 PCR鉴定 | 第29-30页 |
| 3.4 血清型鉴定 | 第30页 |
| 3.5 药敏试验结果 | 第30-31页 |
| 3.6 动物回归试验结果 | 第31-32页 |
| 3.7 RA OmpA基因的序列分析 | 第32-35页 |
| 3.8 RA 16S rRNA基因的序列分析 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 第二章 三穗麻鸭白细胞介素-2 基因的克隆与序列分析 | 第40-54页 |
| 1 材料 | 第40-41页 |
| 1.1 试验动物 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-46页 |
| 2.1 引物设计 | 第41页 |
| 2.2 三穗麻鸭外周血淋巴细胞分离与培养 | 第41页 |
| 2.3 三穗麻鸭淋巴细胞的总RNA提取 | 第41-42页 |
| 2.4 三穗麻鸭dIL-2 基因的RT-PCR扩增 | 第42-43页 |
| 2.5 三穗麻鸭dIL-2 基因的克隆 | 第43-46页 |
| 2.6 三穗麻鸭dIL-2 基因的序列分析 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-53页 |
| 3.1 三穗麻鸭dIL-2 基因的RT-PCR扩增 | 第46-47页 |
| 3.2 三穗麻鸭dIL-2 基因重组质粒的鉴定 | 第47页 |
| 3.3 三穗麻鸭dIL-2 基因的测序结果 | 第47-48页 |
| 3.4 三穗麻鸭dIL-2 理化性质分析 | 第48页 |
| 3.5 三穗麻鸭dIL-2 蛋白亲疏水性分析 | 第48页 |
| 3.6 三穗麻鸭dIL-2 蛋白跨膜区域分析 | 第48-49页 |
| 3.7 三穗麻鸭dIL-2 蛋白二级结构分析 | 第49页 |
| 3.8 三穗麻鸭dIL-2 蛋白三级结构分析 | 第49-50页 |
| 3.9 三穗麻鸭dIL-2 基因相似性分析 | 第50-52页 |
| 3.10 三穗麻鸭dIL-2 基因遗传进化分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 第三章 RA OmpA与dIL-2 基因重组质粒的构建与鉴定 | 第54-72页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 主要材料 | 第54-55页 |
| 1.2 主要试剂 | 第55页 |
| 1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-64页 |
| 2.1 设计引物 | 第55页 |
| 2.3 OmpA基因的PCR扩增 | 第55-56页 |
| 2.4 dIL2OmpA融合基因的SOE-PCR扩增 | 第56-57页 |
| 2.5 克隆质粒pMD-OmpA和pMD-dIL-2OmpA的构建 | 第57-58页 |
| 2.6 真核表达质粒pcDNA3.1(+)-OmpA/pcDNA3.1(+)-dIL2OmpA的构建 | 第58-61页 |
| 2.7 重组质粒pcDNA3.1(+)-OmpA/pcDNA3.1(+)-dIL2OmpA的鉴定 | 第61-64页 |
| 3 结果 | 第64-69页 |
| 3.1 OmpA基因的PCR扩增 | 第64-65页 |
| 3.2 dIL2OmpA融合基因的SOE-PCR扩增 | 第65页 |
| 3.3 pMD-OmpA和pMD-dIL2OmpA的重组质粒鉴定 | 第65-67页 |
| 3.4 pcDNA3.1(+)-OmpA和pcDNA3.1(+)-dIL2OmpA的重组质粒鉴定 | 第67-68页 |
| 3.5 目的蛋白的Western blot检测 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| 第四章 重组质粒pcDNA3.1(+)-dIL2OmpA对雏鸭感染RA的免疫保护研究 | 第72-82页 |
| 1 材料 | 第73页 |
| 1.1 试验动物 | 第73页 |
| 1.2 主要材料 | 第73页 |
| 1.3 主要试剂 | 第73页 |
| 1.4 主要仪器 | 第73页 |
| 2 方法 | 第73-76页 |
| 2.1 RA菌株复苏 | 第73页 |
| 2.2 RA攻毒菌量测定 | 第73-74页 |
| 2.3 重组质粒提取 | 第74-75页 |
| 2.4 动物免疫试验 | 第75页 |
| 2.5 免疫效果评价 | 第75-76页 |
| 2.6 攻毒保护试验 | 第76页 |
| 3 结果 | 第76-80页 |
| 3.1 攻毒菌量的测定 | 第76-77页 |
| 3.2 重组质粒浓度 | 第77页 |
| 3.3 ELISA检测抗体水平结果 | 第77-79页 |
| 3.4 攻毒保护试验 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-82页 |
| 全文结论 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 附录一 发表论文情况 | 第90-91页 |
| 附录二 各种培养基、溶液及试剂的配制 | 第91-93页 |
| 附录三 测序序列信息 | 第93-101页 |
