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转OsCERK2基因水稻对白叶枯病的抗病性分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 前言第9-18页
    1.1 植物免疫系统第9-13页
        1.1.1 植物与病原物的相互作用第10-11页
        1.1.2 病原相关分子模式触发的免疫第11-12页
        1.1.3 效应分子诱导的免疫第12-13页
    1.2 植物先天免疫中植物类受体激酶蛋白的作用第13页
    1.3 植物LysM蛋白第13-14页
    1.4 CERK1的研究进展第14-15页
    1.5 本研究的目的与意义第15-17页
    1.6 本研究的技术路线第17-18页
2 实验材料与方法第18-24页
    2.1 水稻材料第18页
    2.2 菌株和质粒第18页
    2.3 酶和生化试剂第18页
    2.4 培养基第18页
    2.5 主要仪器设备第18-19页
    2.6 OsCERK2基因的分离第19页
    2.7 OsCERK2过表达载体的构建第19页
    2.8 OsCERK2 RNAi载体的构建第19-20页
    2.9 农杆菌介导的水稻遗传转化第20-21页
    2.10 潮霉素筛选转基因植株第21页
    2.11 核酸操作第21-22页
        2.11.1 DNA提取第21页
        2.11.2 转基因植株PCR鉴定第21-22页
        2.11.3 RNA提取和RT-PCR第22页
    2.12 白叶枯病接种与调查第22-23页
    2.13 病原物细胞壁物质处理第23-24页
3 结果与分析第24-37页
    3.1 OsCERK2基因的分离及生物信息学分析第24-25页
        3.1.1 OsCERK2基因的分离第24页
        3.1.2 生物信息学分析第24-25页
    3.2 过表达和RNAi载体的构建第25-27页
    3.3 农杆菌介导的水稻遗传转化第27-28页
    3.4 转基因植株潮霉素筛选第28-29页
    3.5 DNA提取第29-30页
    3.6 转基因植株PCR鉴定第30页
    3.7 纯合株系的筛选第30-31页
    3.8 RNA提取第31-32页
    3.9 半定量RT-PCR第32-34页
        3.9.1 转基因植株中基因表达量分析第32页
        3.9.2 病原菌细胞壁提取物处理第32-34页
    3.10 转OsCERK2基因植株对水稻白叶枯病菌的抗性第34-37页
4 讨论第37-39页
    4.1 OsCERK2可能参与几丁质诱导的防御信号传导第37页
    4.2 OsCERK2可能参与基本抗性或植物免疫反应第37-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-47页
附录一 质粒的小量提取方法第47页
附录二 酶切第47-48页
附录三 目的片段的回收第48页
附录四 病原菌细胞壁提取物的制备第48-49页
附录五 OsCERK2全长cDNA序列第49-50页
附录六 OsCERK2的蛋白序列第50页
附录七 实验所用引物序列第50-51页
附录八 农杆菌介导的水稻遗传转化程序第51-53页
致谢第53页

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