摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-18页 |
1.1 植物免疫系统 | 第9-13页 |
1.1.1 植物与病原物的相互作用 | 第10-11页 |
1.1.2 病原相关分子模式触发的免疫 | 第11-12页 |
1.1.3 效应分子诱导的免疫 | 第12-13页 |
1.2 植物先天免疫中植物类受体激酶蛋白的作用 | 第13页 |
1.3 植物LysM蛋白 | 第13-14页 |
1.4 CERK1的研究进展 | 第14-15页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第15-17页 |
1.6 本研究的技术路线 | 第17-18页 |
2 实验材料与方法 | 第18-24页 |
2.1 水稻材料 | 第18页 |
2.2 菌株和质粒 | 第18页 |
2.3 酶和生化试剂 | 第18页 |
2.4 培养基 | 第18页 |
2.5 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.6 OsCERK2基因的分离 | 第19页 |
2.7 OsCERK2过表达载体的构建 | 第19页 |
2.8 OsCERK2 RNAi载体的构建 | 第19-20页 |
2.9 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第20-21页 |
2.10 潮霉素筛选转基因植株 | 第21页 |
2.11 核酸操作 | 第21-22页 |
2.11.1 DNA提取 | 第21页 |
2.11.2 转基因植株PCR鉴定 | 第21-22页 |
2.11.3 RNA提取和RT-PCR | 第22页 |
2.12 白叶枯病接种与调查 | 第22-23页 |
2.13 病原物细胞壁物质处理 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-37页 |
3.1 OsCERK2基因的分离及生物信息学分析 | 第24-25页 |
3.1.1 OsCERK2基因的分离 | 第24页 |
3.1.2 生物信息学分析 | 第24-25页 |
3.2 过表达和RNAi载体的构建 | 第25-27页 |
3.3 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第27-28页 |
3.4 转基因植株潮霉素筛选 | 第28-29页 |
3.5 DNA提取 | 第29-30页 |
3.6 转基因植株PCR鉴定 | 第30页 |
3.7 纯合株系的筛选 | 第30-31页 |
3.8 RNA提取 | 第31-32页 |
3.9 半定量RT-PCR | 第32-34页 |
3.9.1 转基因植株中基因表达量分析 | 第32页 |
3.9.2 病原菌细胞壁提取物处理 | 第32-34页 |
3.10 转OsCERK2基因植株对水稻白叶枯病菌的抗性 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
4.1 OsCERK2可能参与几丁质诱导的防御信号传导 | 第37页 |
4.2 OsCERK2可能参与基本抗性或植物免疫反应 | 第37-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-47页 |
附录一 质粒的小量提取方法 | 第47页 |
附录二 酶切 | 第47-48页 |
附录三 目的片段的回收 | 第48页 |
附录四 病原菌细胞壁提取物的制备 | 第48-49页 |
附录五 OsCERK2全长cDNA序列 | 第49-50页 |
附录六 OsCERK2的蛋白序列 | 第50页 |
附录七 实验所用引物序列 | 第50-51页 |
附录八 农杆菌介导的水稻遗传转化程序 | 第51-53页 |
致谢 | 第53页 |