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海洋球石藻(Emiliania huxleyi)病毒两种功能基因的克隆表达及其初步应用研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第1章 引言第12-32页
    1.1 海洋原核藻类病毒-蓝藻病毒第12-13页
    1.2 海洋真核微藻类病毒第13-20页
        1.2.1 海洋真核微藻类病毒的研究概况第13页
        1.2.2 海洋真核藻类 DNA 病毒第13-18页
        1.2.3 海洋真核藻类 RNA 病毒第18-20页
    1.3 海洋球石藻病毒第20-31页
        1.3.1 海洋球石藻病毒的结构特点、分类及丰度第20-21页
        1.3.2 海洋球石藻病毒与宿主之间的相互作用关系第21-26页
        1.3.3 球石藻病毒基因特点及功能基因第26-29页
        1.3.4 球石藻及其病毒与生态环境的关系第29-31页
    1.4 本论文的研究目的与意义第31-32页
第2章 重组海洋球石藻(E.HUXLEYI)病毒硫氧还蛋白的表达及其在处理食品过敏原中的应用第32-51页
    2.1 材料与方法第34-40页
        2.1.1 实验藻种、病毒株第34页
        2.1.2 实验试剂和基因工程载体第34页
        2.1.3 E.huxleyi 的培养及病毒与宿主感染体系的建立第34页
        2.1.4 EhV 病毒颗粒的纯化与浓缩第34-35页
        2.1.5 EhV99B1 Trx 基因的扩增第35-37页
        2.1.6 重组表达质粒的构建第37-38页
        2.1.7 重组质粒的诱导表达及蛋白纯化第38页
        2.1.8 重组 pGEX-4T-3\EhV-99B1-Trx Western Bloting 检测第38-39页
        2.1.9 重组 EhV-99B1 Trx 二硫键还原酶活性测定第39页
        2.1.10 重组 EhV-99B1 Trx 对牛奶中二硫键蛋白的还原第39-40页
    2.2 实验结果第40-49页
        2.2.1 EhV-99B1 Trx 基因的扩增及 T 克隆的构建第40页
        2.2.2 重组载体的构建及鉴定第40-41页
        2.2.3 EhV-99B1 Trx 的生物信息学特征第41-46页
        2.2.4 EhV-99B1 Trx 的原核表达、纯化及鉴定第46-47页
        2.2.5 重组 EhV-99B1 Trx 对胰岛素分子中二硫键的还原作用第47-48页
        2.2.6 重组 EhV-99B1 Trx 对牛奶中二硫键蛋白过敏原的脱敏作用第48-49页
    2.3 分析与讨论第49-51页
        2.3.1 海洋球石藻病毒 EhV-99B1 Trx 的结构特点第49页
        2.3.2 重组海洋球石藻病毒 EhV-99B1 Trx 对蛋白质二硫键的还原能力第49-51页
第3章 球石藻病毒外壳蛋白的表达、抗体制备及其用于病毒感染的检测第51-72页
    3.1 材料与方法第52-59页
        3.1.1 实验藻种、病毒株(同第二章 2.1.1)第52页
        3.1.2 实验试剂、载体及溶液配制第52-53页
        3.1.3 E.huxleyi 的培养及病毒与宿主感染体系的建立(同第二章 2.1.1)第53页
        3.1.4 EhV 病毒颗粒的纯化与浓缩(同第二章 2.1.4)第53页
        3.1.5 EhV-99B1 MCP 的生物信息学分析第53页
        3.1.6 EhV-99B1 MCP 基因片段的扩增第53-56页
        3.1.7 重组表达质粒的构建第56-57页
        3.1.8 重组质粒的诱导表达及蛋白纯化第57-58页
        3.1.9 重组蛋白免疫动物实验第58页
        3.1.10 重组 EhV-99B1 MCP 的 Western Bloting 检测第58-59页
    3.2 实验结果第59-68页
        3.2.1 EhV-99B1 MCP 生物信息学特征第59-64页
        3.2.2 EhV-99B1 MCP 基因片段的扩增第64-65页
        3.2.3 重组表达质粒的构建及鉴定第65-66页
        3.2.4 EhV-99B1 MCP 的表达、纯化及鉴定第66-67页
        3.2.5 EhV-99B1 MCP 抗原表位的筛选及其免疫原性第67-68页
    3.3 分析与讨论第68-72页
        3.3.1 海洋球石藻病毒 EhV-99B1 MCP 的结构特点第68-69页
        3.3.2 海洋球石藻病毒 EhV-99B1 MCP 抗原表位及主要免疫功能区的特征第69-70页
        3.3.3 重组海洋球石藻病毒 EhV-99B1 MCP 的免疫原性及其作为诊断抗原的应用潜力第70-72页
第4章 本论文的总结与创新点第72-74页
    4.1 本论文的研究总结第72页
    4.2 本论文的研究展望第72-73页
    4.3 本论文的创新点第73-74页
致谢第74-75页
参考文献第75-87页
在学期间发表的学术论文第87页

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