| 前 言 | 第8-11页 |
| 第一篇 文献回顾 | 第11-41页 |
| 第一章 噬菌体抗体库技术的现状，进展和应用 | 第11-26页 |
| 第二章 蛋白质组技术及其应用现状 | 第26-41页 |
| 第二篇 实验部分 | 第41-95页 |
| 第一章 从大肠癌患者转移淋巴结构建人源性 抗大肠癌噬菌体Fab抗体库 | 第41-57页 |
| 第一节 实验材料 | 第41-43页 |
| 1.1 病例选择 | 第41页 |
| 1.2 载体、菌株和辅助噬菌体 | 第41-42页 |
| 1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 1.4 主要仪器 | 第42-43页 |
| 第二节 实验方法 | 第43-51页 |
| 2.1 淋巴细胞的分离纯化 | 第43页 |
| 2.2 总细胞RNA的提取(TRIZOL法) | 第43-44页 |
| 2.3 cDNA的合成(GIBCO BRL法) | 第44页 |
| 2.4 PCR扩增Fab抗体基因 | 第44-46页 |
| 2.5 PCR产物的纯化(spin-X纯化方法) | 第46-47页 |
| 2.6 Fd和轻链基因的克隆及噬菌体抗体库的建立 | 第47-49页 |
| 2.7 免疫印记法鉴定初级抗体库中噬菌体上有Fab段的表达 | 第49-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 第三节 实验结果 | 第51-52页 |
| 第四节 讨论 | 第52-57页 |
| 第二章 应用蛋白质组学方法筛选大肠癌特异性抗原和相应噬菌体抗体 | 第57-95页 |
| 第一节 实验材料 | 第57-62页 |
| 1.1 病例选择 | 第57页 |
| 1.2 主要实验仪器及计算机软件 | 第57-59页 |
| 1.3 主要试剂及其配制 | 第59-62页 |
| 第二节 实验方法 | 第62-71页 |
| 2.1 样品准备 | 第62-64页 |
| 2.2 双向电泳 | 第64-66页 |
| 2.3 聚丙烯酰胺凝胶染色 | 第66-67页 |
| 2.4 从2-DE胶到PVDF膜的转移电泳: | 第67-68页 |
| 2.5 噬菌体抗体库的富集筛选 | 第68-69页 |
| 2.6 Western blot印迹法检测PVDF膜上能与噬菌体抗体结合的抗原: | 第69页 |
| 2.7 提取差异蛋白点 | 第69-70页 |
| 2.8 蛋白质的质谱分析 | 第70-71页 |
| 第三节 实验结果 | 第71-72页 |
| 第四节 讨论 | 第72-95页 |
| 参考文献 | 第95-110页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文及其它成果 | 第110-111页 |
| 论文摘要 | 第111-117页 |
| Abstract | 第117页 |
| 致 谢 | 第124-125页 |
