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定点改造的猪源胰高血糖素样肽-2在植物乳杆菌中的表达及生物活性研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 引言第10-18页
    1.1 我国养猪业中仔猪肠道问题综述第10-12页
        1.1.1 我国养猪业的发展概况第10页
        1.1.2 仔猪肠道问题对养殖业影响第10-11页
        1.1.3 针对仔猪肠道问题国内外对策第11-12页
    1.2 胰高血糖素样肽-2 的研究综述第12-15页
        1.2.1 GLP-2 的结构、功能及其作用的分子机制第12-14页
        1.2.2 GLP-2 国内外研究进展第14页
        1.2.3 GLP-2 的表达及其应用前景第14-15页
    1.3 乳酸菌表达系统综述第15-18页
        1.3.1 乳酸菌简介及其临床应用研究第15-16页
        1.3.2 乳酸菌的安全性评价第16页
        1.3.3 乳酸菌作为外源蛋白表达宿主第16-17页
        1.3.4 乳酸菌表达系统的问题和方向第17-18页
    1.4 本研究的目的和意义及其创新性第18页
第一部分 植物乳杆菌表达系统的构建第18-37页
    1 引言第18-19页
    2 材料和方法第19-33页
        2.1 实验材料第19-21页
        2.2 实验方法第21-33页
            2.2.1 宿主菌植物乳杆菌的分离、鉴定第21页
            2.2.2 pGLP-2 基因的改造第21-24页
            2.2.3 重组表达载体pSCPSP-p(Gly2)-GLP-2 的构建第24-27页
            2.2.4 植物乳杆菌感受态细胞的制备第27-28页
            2.2.5 电击转化第28页
            2.2.6 重组植物乳杆菌pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1的获得第28-29页
            2.2.7 目的蛋白p(Gly2)-GLP-2 的检测第29-33页
    3 结果第33-37页
        3.1 植物乳杆菌的分离、鉴定第33页
        3.2 p(Gly2)-GLP-2 目的基因电泳检测第33-34页
        3.3 重组表达载体pSCP-p(Gly2)-GLP-2 的构建第34-35页
            3.3.1 pMD20-p(Gly2)-GLP-2 双酶切第34页
            3.3.2 重组载体的双酶切鉴定和测序鉴定结果第34-35页
        3.4 阳性转化子pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1的筛选结果第35页
        3.5 目的蛋白p(Gly2)-GLP-2 的检测结果第35-37页
            3.5.1 Tricine-SDS-PAGE检测结果第35-36页
            3.5.2 ELISA检测结果第36-37页
    4 讨论第37页
第二部分 重组乳杆菌pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1的生物学活性分析第37-43页
    1. DSS诱导的小鼠慢性结肠肠炎模型的建立第37-40页
        1.1 实验材料和实验动物第37页
        1.2 DSS诱导小鼠慢性结肠肠炎模型建立过程及体重变化第37-40页
            1.2.1 DSS诱导的小鼠慢性结肠炎模型建立过程见表 1.2.1第37-38页
            1.2.2 上述石蜡切片制作过程如下:第38-40页
    2. 重组乳杆菌pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1对肠炎模型的治疗试验第40-41页
    3. 结果第41-43页
        3.1 慢性结肠炎模型建立前后小鼠体重变化结果第41-42页
        3.2 结肠组织切片观察及结肠的损伤评价第42-43页
第三部分 分析讨论及全文总结第43-47页
    1. 分析讨论第43-45页
    2. 全文总结第45-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-53页
附录第53页

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