摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 引言 | 第10-18页 |
1.1 我国养猪业中仔猪肠道问题综述 | 第10-12页 |
1.1.1 我国养猪业的发展概况 | 第10页 |
1.1.2 仔猪肠道问题对养殖业影响 | 第10-11页 |
1.1.3 针对仔猪肠道问题国内外对策 | 第11-12页 |
1.2 胰高血糖素样肽-2 的研究综述 | 第12-15页 |
1.2.1 GLP-2 的结构、功能及其作用的分子机制 | 第12-14页 |
1.2.2 GLP-2 国内外研究进展 | 第14页 |
1.2.3 GLP-2 的表达及其应用前景 | 第14-15页 |
1.3 乳酸菌表达系统综述 | 第15-18页 |
1.3.1 乳酸菌简介及其临床应用研究 | 第15-16页 |
1.3.2 乳酸菌的安全性评价 | 第16页 |
1.3.3 乳酸菌作为外源蛋白表达宿主 | 第16-17页 |
1.3.4 乳酸菌表达系统的问题和方向 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的和意义及其创新性 | 第18页 |
第一部分 植物乳杆菌表达系统的构建 | 第18-37页 |
1 引言 | 第18-19页 |
2 材料和方法 | 第19-33页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-33页 |
2.2.1 宿主菌植物乳杆菌的分离、鉴定 | 第21页 |
2.2.2 pGLP-2 基因的改造 | 第21-24页 |
2.2.3 重组表达载体pSCPSP-p(Gly2)-GLP-2 的构建 | 第24-27页 |
2.2.4 植物乳杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
2.2.5 电击转化 | 第28页 |
2.2.6 重组植物乳杆菌pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1的获得 | 第28-29页 |
2.2.7 目的蛋白p(Gly2)-GLP-2 的检测 | 第29-33页 |
3 结果 | 第33-37页 |
3.1 植物乳杆菌的分离、鉴定 | 第33页 |
3.2 p(Gly2)-GLP-2 目的基因电泳检测 | 第33-34页 |
3.3 重组表达载体pSCP-p(Gly2)-GLP-2 的构建 | 第34-35页 |
3.3.1 pMD20-p(Gly2)-GLP-2 双酶切 | 第34页 |
3.3.2 重组载体的双酶切鉴定和测序鉴定结果 | 第34-35页 |
3.4 阳性转化子pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1的筛选结果 | 第35页 |
3.5 目的蛋白p(Gly2)-GLP-2 的检测结果 | 第35-37页 |
3.5.1 Tricine-SDS-PAGE检测结果 | 第35-36页 |
3.5.2 ELISA检测结果 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37页 |
第二部分 重组乳杆菌pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1的生物学活性分析 | 第37-43页 |
1. DSS诱导的小鼠慢性结肠肠炎模型的建立 | 第37-40页 |
1.1 实验材料和实验动物 | 第37页 |
1.2 DSS诱导小鼠慢性结肠肠炎模型建立过程及体重变化 | 第37-40页 |
1.2.1 DSS诱导的小鼠慢性结肠炎模型建立过程见表 1.2.1 | 第37-38页 |
1.2.2 上述石蜡切片制作过程如下: | 第38-40页 |
2. 重组乳杆菌pSCP-p(Gly2)-GLP2LP1对肠炎模型的治疗试验 | 第40-41页 |
3. 结果 | 第41-43页 |
3.1 慢性结肠炎模型建立前后小鼠体重变化结果 | 第41-42页 |
3.2 结肠组织切片观察及结肠的损伤评价 | 第42-43页 |
第三部分 分析讨论及全文总结 | 第43-47页 |
1. 分析讨论 | 第43-45页 |
2. 全文总结 | 第45-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 | 第53页 |