| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词 | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 细胞色素P450氧化酶概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 细胞色素P450氧化酶的命名与分布 | 第10页 |
| 1.1.2 细胞色素P450氧化酶的结构特征及催化机制 | 第10-11页 |
| 1.1.3 细胞色素P450氧化酶在药物代谢中的作用 | 第11-12页 |
| 1.2 CYP3A家族简介 | 第12-14页 |
| 1.2.1 CYP3A4简介 | 第12-14页 |
| 1.3 细胞色素P450氧化酶研究的生物信息学方法 | 第14-15页 |
| 1.4 细胞色素P450氧化酶异源表达系统 | 第15-17页 |
| 1.4.1 大肠杆菌表达体系 | 第15页 |
| 1.4.2 酵母表达体系 | 第15-16页 |
| 1.4.3 哺乳动物细胞表达系统 | 第16页 |
| 1.4.4 病毒表达体系 | 第16-17页 |
| 1.5 T-2 毒素 | 第17-19页 |
| 1.5.1 T-2 毒素的性质和结构 | 第17-18页 |
| 1.5.2 T-2 毒素代谢转化 | 第18页 |
| 1.5.3 T-2 毒素与细胞色素P450氧化酶 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的目的、意义及实验总体设计 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 实验细胞来源 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验药品 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.5 生物信息学分析工具 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 CYP3A22原核表达 | 第23-25页 |
| 2.2.2 CYP3A22酵母表达 | 第25-27页 |
| 2.2.3 蛋白同源比对 | 第27-28页 |
| 2.2.4 CYP3A46及其突变体真核表达载体构建 | 第28-30页 |
| 2.2.5 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.2.6 S9组分提取 | 第31-35页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第35页 |
| 3 实验结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 CYP3A22原核系统表达 | 第35-38页 |
| 3.2 CYP3A22酵母系统表达 | 第38页 |
| 3.3 CYP3A真核表达 | 第38-41页 |
| 3.4 人CYP3A4和猪CYP3A家族蛋白的同源对比 | 第41-43页 |
| 3.5 CYP3A22和CYP3A46三维结构模拟模型 | 第43页 |
| 3.6 分子对接 | 第43-44页 |
| 3.7 CYP3A46与T-2 毒素羟化反应活性位点分析 | 第44-45页 |
| 3.7.1 CYP3A46突变载体构建 | 第44-45页 |
| 3.8 CYP3A46突变体真核表达 | 第45-46页 |
| 3.8.1 CYP3A46真核表达 | 第45-46页 |
| 3.9 CYP3A46及其突变体与T-2 毒素代谢差异 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 CYP3A22蛋白的原核表达体系总结 | 第49-50页 |
| 4.2 CYP3A家族与T-2 毒素对接结果 | 第50-51页 |
| 4.3 CYP3A结构与功能分析 | 第51-53页 |
| 5 总结 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
