| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-30页 |
| 综述一 牛病毒性腹泻病毒的研究进展 | 第15-24页 |
| 1 BVDV概况及流行病学 | 第15-17页 |
| 2 BVDV基因结构及其编码的蛋白 | 第17-20页 |
| 2.1 BVDV的基因结构 | 第17页 |
| 2.2 BVDV编码的蛋白 | 第17-20页 |
| 3 BVDV持续性感染及免疫抑制 | 第20-22页 |
| 3.1 BVDV与先天性免疫 | 第20-22页 |
| 3.2 BVDV与获得性免疫 | 第22页 |
| 4 牛病毒性腹泻病毒防治现状 | 第22-24页 |
| 综述二 microRNAs研究进展 | 第24-30页 |
| 1 microRNA概述 | 第24-27页 |
| 1.1 microRNA的发现 | 第24页 |
| 1.2 microRNA的加工成熟 | 第24-25页 |
| 1.3 microRNA的调控机制 | 第25-27页 |
| 2 microRNA的主要研究方法 | 第27页 |
| 3 microRNA与病毒复制 | 第27-28页 |
| 4 microRNA与细胞凋亡 | 第28-29页 |
| 5 microRNA与细胞自噬 | 第29页 |
| 6 小结与展望 | 第29-30页 |
| 第二章 实验研究 | 第30-97页 |
| 实验一 影响BVDV病毒复制的miRNAs的筛选及鉴定 | 第30-44页 |
| 1 材料与方法 | 第31-40页 |
| 1.1 材料 | 第31页 |
| 1.2 方法 | 第31-40页 |
| 3 结果 | 第40-42页 |
| 3.1 BVDV NADL病毒TCID50的检测 | 第40页 |
| 3.2 BVDV NADL株的E0基因标准曲线的建立 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 实验二 bta-miR-33a靶向bim基因调控细胞凋亡影响BVDV复制的分子机制研究 | 第44-71页 |
| 1 材料与方法 | 第45-58页 |
| 1.1 材料 | 第45-46页 |
| 1.2 方法 | 第46-58页 |
| 2 结果 | 第58-69页 |
| 2.1 凋亡通路中miR-33a靶蛋白的预测 | 第58-59页 |
| 2.2 双荧光素酶报告基因系统载体的构建 | 第59页 |
| 2.3 双荧光素酶报告基因荧光水平检测 | 第59-60页 |
| 2.4 实时定量PCR鉴定bta-miR-33a靶基因的转录水平 | 第60-61页 |
| 2.5 实时定量PCR检测bta-miR-33a对BVDV NADL转录水平的影响 | 第61页 |
| 2.6 Western blot鉴定bta-miR-33a靶蛋白的表达水平 | 第61-62页 |
| 2.7 流式细胞仪检测bta-miR-33a对MDBK细胞凋亡的影响 | 第62页 |
| 2.8 过表达慢病毒载体的构建 | 第62-63页 |
| 2.9 过表达慢病毒的包装 | 第63-64页 |
| 2.10 过表达慢病毒的滴度的测定 | 第64页 |
| 2.11过表达慢病毒感染MDBK后过表达的情况 | 第64-65页 |
| 2.12 过表达bim基因的MDBK细胞的凋亡水平 | 第65-66页 |
| 2.13 Western blot鉴定感染慢病毒后bim蛋白的表达水平 | 第66页 |
| 2.14 miR-33a对过表达bim蛋白的MDBK细胞的拯救 | 第66-67页 |
| 2.15 实时定量PCR检测同时用bta-miR-33a和BVDV NADL处理慢病毒感染过后的MDBK细胞的bim mRNA的水平 | 第67-68页 |
| 2.16 miR-33a对过表达bim基因的MDBK凋亡水平的影响 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 4 小结 | 第70-71页 |
| 实验三 miR-302c通过JAK-STAT通路抑制BVDV复制的分子机制的研究 | 第71-97页 |
| 1 材料与方法 | 第72-80页 |
| 1.1 材料 | 第72-73页 |
| 1.2 方法 | 第73-80页 |
| 2 结果 | 第80-95页 |
| 2.1 BVDV NADL全基因组中miRNA靶基因的预测 | 第80-81页 |
| 2.2 双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第81-83页 |
| 2.3 双荧光素酶报告基因分析鉴定bta-mi R-302c、bta-miR-205和bta-miR-497的靶基因 | 第83-84页 |
| 2.4 实时定量PCR检测miRNAs对BVDV NADL转录水平的影响 | 第84-85页 |
| 2.5 BVDV NADL感染miRNAs处理后的MDBK细胞早期的病毒滴度的检测 | 第85-87页 |
| 2.6 bta-miR-302c处理MDBK细胞后对JAK-STAT通路中各个因子转录水平的影响 | 第87-89页 |
| 2.7 BVDV NADL病毒感染MDBK细胞后对JAK-STAT通路中各个因子转录水平的影响 | 第89-91页 |
| 2.8 bta-miR-302c和BVDV NADL病毒处理MDBK细胞后对细胞JAK-STAT通路中各个因子转录水平的影响 | 第91-92页 |
| 2.9 Western blot检测bta-miR-302c和BVDV NADL病毒处理MDBK细胞后对JAK-STAT通路蛋白表达水平 | 第92-94页 |
| 2.10 流式细胞仪检测bta-miR-302c处理MDBK后细胞的凋亡水平 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-96页 |
| 4 小结 | 第96-97页 |
| 结论 | 第97-98页 |
| 创新点 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 作者简介 | 第113-114页 |
| 附件 | 第114页 |
