摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1. 前言 | 第10-21页 |
1.1 柠檬简述 | 第10-11页 |
1.2 柑橘遗传转化研究进展 | 第11-14页 |
1.2.1 遗传转化方法 | 第11-12页 |
1.2.2 外植体系统 | 第12-13页 |
1.2.3 柠檬遗传转化进展 | 第13-14页 |
1.3 果树童期研究进展 | 第14-15页 |
1.3.1 童期概念 | 第14页 |
1.3.2 童期各组织发育和生化特征及影响因素 | 第14-15页 |
1.3.3 短童期柑橘种质资源的利用 | 第15页 |
1.4 柑橘多倍体育种 | 第15-18页 |
1.4.1 柑橘多倍体产生的基本方法 | 第16-17页 |
1.4.2 柑橘四倍体育种及应用 | 第17-18页 |
1.5 GFP基因的研究与应用 | 第18-20页 |
1.5.1 绿色荧光蛋白的生化特点和发光机理 | 第18页 |
1.5.2 绿色荧光蛋白基因的优点及其突变体改造与应用 | 第18-19页 |
1.5.3 GFP的应用 | 第19-20页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2. 材料与方法 | 第21-27页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 转化外植体材料 | 第21页 |
2.1.2 农杆菌菌株和质粒 | 第21-22页 |
2.1.3 转化过程所使用培养基类型及配方 | 第22页 |
2.1.4 主要生化试剂 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 带有GFP基因的农杆菌的检测 | 第23-25页 |
2.2.2 根癌农杆菌介导的柠檬遗传转化过程 | 第25-27页 |
2.2.2.1 柠檬实生苗准备步骤 | 第25页 |
2.2.2.2 农杆菌侵染液的制备 | 第25页 |
2.2.2.3 侵染与共培养 | 第25-26页 |
2.2.2.4 筛选培养 | 第26页 |
2.2.2.5 GFP检测 | 第26页 |
2.2.2.6 生根与移栽 | 第26-27页 |
3. 结果与分析 | 第27-32页 |
3.1 早花柠檬实生苗上胚轴的遗传转化 | 第27-29页 |
3.1.1 早花柠檬实生苗上胚轴的转化与再生 | 第27-28页 |
3.1.2 早花柠檬再生芽的荧光鉴定 | 第28-29页 |
3.1.3 早花柠檬遗传转化再生率与转化率统计 | 第29页 |
3.2 以四倍体费米耐劳柠檬上胚轴切段为外植体的GFP基因的遗传转化 | 第29-32页 |
3.2.1 四倍体费米耐劳柠檬的转化与再生 | 第29-30页 |
3.2.2 四倍体费米耐劳柠檬再生芽的荧光鉴定 | 第30-31页 |
3.2.3 四倍体费米耐劳柠檬遗传转化再生率与转化率统计 | 第31-32页 |
4.讨论 | 第32-36页 |
4.1 影响农杆菌介导的柠檬遗传转化的因素 | 第32-34页 |
4.1.1 选择合适的基因型进行转化 | 第32页 |
4.1.2 外植体状态 | 第32-33页 |
4.1.3 培养条件 | 第33-34页 |
4.1.4 其他因素 | 第34页 |
4.2 抗性芽的再生与生根 | 第34-35页 |
4.3 柠檬在遗传转化中的应用 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-44页 |
致谢 | 第44页 |