| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 DNA甲基化概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 CpG岛 | 第9-10页 |
| 1.1.2 DNA甲基化的生成 | 第10页 |
| 1.1.3 DNA甲基化与肿瘤 | 第10-11页 |
| 1.2 影响DNA甲基化的因素 | 第11-14页 |
| 1.2.1 DNA甲基转移酶 | 第11-12页 |
| 1.2.2 组蛋白甲基化 | 第12页 |
| 1.2.3 饮食等环境因素 | 第12-13页 |
| 1.2.4 RNA干扰 | 第13-14页 |
| 1.2.5 病毒感染 | 第14页 |
| 1.3 DNA甲基化的检测方法 | 第14-17页 |
| 1.3.1 重亚硫酸盐测序法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 高效液相色谱 | 第15页 |
| 1.3.3 高效毛细管电泳法 | 第15页 |
| 1.3.4 甲基化敏感性限制内切酶法 | 第15-16页 |
| 1.3.5 甲基化结合蛋白分析方法 | 第16-17页 |
| 1.4 本文研究的内容 | 第17-18页 |
| 第二章 基于限制性内切酶和外切酶Ⅲ的无标记荧光检测DNA甲基化和甲基转移酶活性 | 第18-29页 |
| 2.1 引言 | 第18-20页 |
| 2.2 实验部分 | 第20-21页 |
| 2.2.1 试剂和仪器 | 第20页 |
| 2.2.2 探针DNA与目标DNA杂交 | 第20页 |
| 2.2.3 DNA甲基化及限制性内切酶和外切酶Ⅲ的作用 | 第20-21页 |
| 2.2.4 由化学试剂引起的DNA甲基化 | 第21页 |
| 2.2.5 在血清中检测M.SssI甲基转移酶活性 | 第21页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第21-28页 |
| 2.3.1 噻唑橙的荧光性能和它的浓度优化 | 第21-22页 |
| 2.3.2 HpaⅡ和ExoⅢ的功能验证及它们的浓度优化 | 第22-23页 |
| 2.3.3 目标DNA检测及验证其选择性 | 第23-25页 |
| 2.3.4 DNA甲基化及甲基转移酶活性的检测 | 第25-26页 |
| 2.3.5 化学试剂甲基化的检测 | 第26-27页 |
| 2.3.6 在人血清中检测M.SssI甲基转移酶的活性 | 第27-28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-29页 |
| 第三章 基于限制性内切酶HpaⅡ和聚苯胺的无标记电化学检测甲基转移酶活性 | 第29-41页 |
| 3.1 引言 | 第29-31页 |
| 3.2 实验部分 | 第31-33页 |
| 3.2.1 试剂和仪器 | 第31页 |
| 3.2.2 捕获探针DNA修饰金电极的制备 | 第31-32页 |
| 3.2.3 捕获DNA与目标DNA杂交 | 第32页 |
| 3.2.4 DNA甲基化及限制性内切酶HpaⅡ和外切酶Ⅲ的作用 | 第32页 |
| 3.2.5 HRP模拟酶和聚苯胺的形成 | 第32页 |
| 3.2.6 抑制剂对M.SssI甲基转移酶活性的抑制 | 第32-33页 |
| 3.2.7 电化学测试 | 第33页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第33-40页 |
| 3.3.1 聚苯胺的电化学性能 | 第33-35页 |
| 3.3.2 电化学检测M.SssI甲基转移酶活性 | 第35-38页 |
| 3.3.3 在人血清中测定M.SssI甲基转移酶的活性 | 第38-39页 |
| 3.3.4 不同浓度抑制剂对M.SssI甲基转移酶活性的抑制 | 第39-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 总结与展望 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
