| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 小菜蛾的危害性 | 第12页 |
| 1.2 过氧化物还原酶的发现与分类 | 第12-14页 |
| 1.3 过氧化物还原酶的抗氧化机制 | 第14-15页 |
| 1.4 昆虫中过氧化物还原酶序列的特性 | 第15-16页 |
| 1.5 昆虫过氧化物还原酶基因的功能研究 | 第16-18页 |
| 1.5.1 过氧化物还原酶存在的部位及其角色 | 第16-17页 |
| 1.5.2 过氧化物还原酶基因的应激表达 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1 供试虫源 | 第18页 |
| 2.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.4 试验方法 | 第19-20页 |
| 2.4.1 小菜蛾总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.4.2 合成cDNA | 第20页 |
| 2.5 PCR产物回收、克隆与测序 | 第20-23页 |
| 2.5.1 PCR及产物回收 | 第20-22页 |
| 2.5.2 目的片段与T载体连接与转化 | 第22-23页 |
| 2.5.2.1 制备感受态细胞 | 第22页 |
| 2.5.2.2 连接和转化 | 第22-23页 |
| 2.6 小菜蛾与其他昆虫的过氧化物还原酶进化树分析 | 第23-24页 |
| 2.7 小菜蛾过氧化物还原酶基因的表达谱分析 | 第24页 |
| 2.8 不同发育阶段、组织及不同胁迫下小菜蛾过氧化物还原酶基因的表达量测定 | 第24-26页 |
| 2.8.1 小菜蛾不同龄期样品收集 | 第24页 |
| 2.8.2 小菜蛾不同组织样品收集 | 第24页 |
| 2.8.3 不同环境因子胁迫下小菜蛾过氧化物还原酶基因应激表达量的测定 | 第24-26页 |
| 2.8.3.1 温度处理 | 第24-25页 |
| 2.8.3.2 紫外线(UV)照射处理 | 第25页 |
| 2.8.3.3 过氧化氢(H_2O_2)处理 | 第25页 |
| 2.8.3.4 杀虫剂处理 | 第25-26页 |
| 2.9 挑选特异性表达的小菜蛾过氧化物还原酶基因进行RNA干扰 | 第26-27页 |
| 2.10 荧光定量PCR测定小菜蛾过氧化物还原酶基因相对的表达量 | 第27页 |
| 2.11 数据分析 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-45页 |
| 3.1 小菜蛾过氧化物还原酶基因全长cDNA的克隆与分析 | 第28-32页 |
| 3.1.1 PxPrx1全长cDNA的克隆 | 第28-29页 |
| 3.1.2 PxPrx3全长cDNA的克隆 | 第29-30页 |
| 3.1.3 PxPrx5全长cDNA的克隆 | 第30-31页 |
| 3.1.4 PxPrx6全长cDNA的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2 小菜蛾与其他昆虫过氧化物还原酶的同源性分析 | 第32-34页 |
| 3.3 小菜蛾过氧化物还原酶基因的表达谱分析 | 第34-35页 |
| 3.4 小菜蛾过氧化物还原酶基因在不同发育阶段、不同品系的表达量分析 | 第35-36页 |
| 3.5 小菜蛾过氧化物还原酶基因在不同组织的表达量分析 | 第36-37页 |
| 3.6 不同环境因子胁迫下小菜蛾过氧化物还原酶基因应激表达量的测定 | 第37-43页 |
| 3.6.1 温度处理 | 第37-40页 |
| 3.6.1.1 冷处理 | 第37-38页 |
| 3.6.1.2 室温(25℃)对照组 | 第38-39页 |
| 3.6.1.3 热处理 | 第39-40页 |
| 3.6.2 紫外(UV)照射处理 | 第40-41页 |
| 3.6.3 过氧化氢(H_2O_2)处理 | 第41-42页 |
| 3.6.4 杀虫剂处理 | 第42-43页 |
| 3.7 RNA干扰后小菜蛾过氧化物还原酶基因表达变化 | 第43-45页 |
| 3.7.1 RNA干扰PxPrx3 | 第43-44页 |
| 3.7.2 RNA干扰PxPrx5 | 第44-45页 |
| 4 总结与讨论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 基因克隆中PCR反应条件 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
