| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第17-32页 |
| 1.1 禽源IgY研究进展 | 第17-19页 |
| 1.1.1 禽源IgY结构 | 第17-18页 |
| 1.1.2 禽源IgY生物学功能的研究 | 第18-19页 |
| 1.1.2.1 IgY的免疫功能 | 第18页 |
| 1.1.2.2 IgY的沉淀和凝集反应特性 | 第18-19页 |
| 1.1.3 IgY-Fc受体的研究 | 第19页 |
| 1.2 融合蛋白的基因工程重组表达技术研究进展 | 第19-22页 |
| 1.2.1 融合蛋白技术内容及关键 | 第20-21页 |
| 1.2.2 连接肽的分类组成 | 第21页 |
| 1.2.3 连接肽的构建 | 第21-22页 |
| 1.2.3.1 通过限制性内切酶位点构建连接肽 | 第21页 |
| 1.2.3.2 通过重叠延伸剪接构建连接肽 | 第21-22页 |
| 1.3 融合蛋白的种类及应用 | 第22-24页 |
| 1.3.1 Ig融合蛋白 | 第22页 |
| 1.3.2 Fc融合蛋白 | 第22-23页 |
| 1.3.3 人血清白蛋白融合蛋白 | 第23-24页 |
| 1.4 融合蛋白表达系统的选择 | 第24-26页 |
| 1.4.1 毕赤酵母简介 | 第24-25页 |
| 1.4.2 毕赤酵母诱导表达 | 第25-26页 |
| 1.5 泰山松花粉多糖的研究概况 | 第26-32页 |
| 1.5.1 多糖的研究概况 | 第26-27页 |
| 1.5.2 多糖的生物学活性 | 第27-30页 |
| 1.5.2.1 植物多糖对巨噬细胞的免疫调节研究 | 第27-28页 |
| 1.5.2.2 植物多糖对巨噬细胞产生NO的影响 | 第28-29页 |
| 1.5.2.3 植物多糖对巨噬细胞分泌细胞因子的影响 | 第29-30页 |
| 1.5.2.4 植物多糖对巨噬细胞的受体互作的影响 | 第30页 |
| 1.5.2.5 多糖的免疫药理作用 | 第30页 |
| 1.5.3 松花粉多糖的研究进展 | 第30-32页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-45页 |
| 2.1 菌株和细胞 | 第32页 |
| 2.2 试剂和仪器 | 第32-33页 |
| 2.3 禽波氏杆菌ompA-Fc毕赤酵母重组阳性转化子的构建 | 第33-39页 |
| 2.3.1 重组禽波氏杆菌ompA-Fc基因的PCR扩增 | 第33-36页 |
| 2.3.2 重组禽波氏杆菌ompA-Fc基因的克隆与测序 | 第36-37页 |
| 2.3.3 重组pPIC9-omp A表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.3.4 重组pPIC9-ompA-Fc质粒线性化 | 第38页 |
| 2.3.5 毕赤酵母阳性转化子的构建 | 第38-39页 |
| 2.4 禽波氏杆菌ompA-Fc融合蛋白诱导表达、鉴定及纯化 | 第39-40页 |
| 2.4.1 融合蛋白的表达与获取 | 第39页 |
| 2.4.2 融合蛋白的SDS-PAGE分析和Western blot鉴定 | 第39-40页 |
| 2.5 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS对巨噬细胞活性的影响 | 第40-43页 |
| 2.5.1 鸡腹腔巨噬细胞的分离 | 第40-41页 |
| 2.5.2 融合蛋白与TPPPS对鸡腹腔巨噬细胞毒性试验 | 第41页 |
| 2.5.3 TPPPS对鸡腹腔巨噬细胞胞饮活性的影响 | 第41页 |
| 2.5.4 TPPPS对鸡腹腔巨噬细胞分泌NO及TNF-α 的影响 | 第41-42页 |
| 2.5.5 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS对鸡腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第42页 |
| 2.5.6 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS佐剂对鸡腹腔巨噬细胞MHC-II分子分泌的影响 | 第42-43页 |
| 2.6 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS佐剂对疫苗免疫效果的研究 | 第43-45页 |
| 2.6.1 疫苗制备 | 第43页 |
| 2.6.2 动物试验 | 第43页 |
| 2.6.3 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS佐剂对疫苗在雏鸡体内特异性免疫反应的影响 | 第43-45页 |
| 2.6.3.1 血清抗体效价的测定 | 第43-44页 |
| 2.6.3.2 外周血CD4+，CD8+ T淋巴细胞含量的测定 | 第44页 |
| 2.6.3.3 T淋巴细胞转化率的测定 | 第44页 |
| 2.6.3.4 数据分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-61页 |
| 3.1 ompA-Fc毕赤酵母阳性转化子的构建 | 第45-49页 |
| 3.2 ompA-Fc融合蛋白的分泌表达 | 第49-51页 |
| 3.3 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS对鸡腹腔巨噬细胞细胞活性影响试验 | 第51-55页 |
| 3.3.1 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS对鸡腹腔巨噬细胞活力的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.2 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS佐剂对鸡腹腔巨噬细胞抗原呈递能力的影响 | 第53-55页 |
| 3.4 融合表达的鸡IgY Fc与TPPPS佐剂对雏鸡特异性免疫应答的影响 | 第55-61页 |
| 3.4.1 免疫雏鸡血清抗体效价的变化 | 第55-56页 |
| 3.4.2 免疫雏鸡血清细胞因子分泌的变化 | 第56-57页 |
| 3.4.3 免疫雏鸡外周血CD4+、CD8+淋巴细胞含量的变化 | 第57-58页 |
| 3.4.4 免疫雏鸡外周血淋巴细胞转化率的变化 | 第58-59页 |
| 3.4.5 免疫保护试验 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第78-79页 |
| 个人简介 | 第79页 |
