中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
1 绪论 | 第13-29页 |
1.1 前言 | 第13-14页 |
1.2 文献综述 | 第14-27页 |
1.2.1 脯氨酰寡肽酶(Prolyl oligopeptidase, POP) | 第15-22页 |
1.2.2 二肽基肽酶(Dipeptidyl peptidase, DPP) | 第22-24页 |
1.2.3 乙酰肽水解酶(Acylpeptide hydrolase, APH) | 第24-26页 |
1.2.4 谷氨酰内肽酶(Glutamyl endopeptidase, GEP) | 第26-27页 |
1.3 研究目的与意义 | 第27页 |
1.4 本文研究的主要内容和技术路线 | 第27-29页 |
1.4.1 研究的主要内容 | 第27-28页 |
1.4.2 技术路线 | 第28-29页 |
2 家蚕POP家族的生物信息学及表达模式分析 | 第29-47页 |
2.1 材料与方法 | 第29-36页 |
2.1.1 各数据库来源 | 第29页 |
2.1.2 分析软件 | 第29-30页 |
2.1.3 实验材料 | 第30页 |
2.1.4 主要仪器和试剂 | 第30-31页 |
2.1.5 生物信息学分析 | 第31-32页 |
2.1.6 家蚕POP家族基因的表达模式分析 | 第32-36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-45页 |
2.2.1 不同物种中POP家族基因成员的鉴定 | 第36-37页 |
2.2.2 不同物种中POP家族基因的系统发生 | 第37-43页 |
2.2.3 家蚕中POP家族基因的表达模式 | 第43-45页 |
2.3 总结与讨论 | 第45-47页 |
3 家蚕BmAPH候选基因的鉴定、序列分析及克隆 | 第47-63页 |
3.1 材料与方法 | 第47-53页 |
3.1.1 数据库和基因序列来源 | 第47页 |
3.1.2 序列分析软件 | 第47页 |
3.1.3 实验材料 | 第47-48页 |
3.1.4 主要仪器和试剂 | 第48页 |
3.1.5 实验方法 | 第48-53页 |
3.2 结果与分析 | 第53-60页 |
3.2.1 家蚕BmAPH候选基因的确定 | 第53-54页 |
3.2.2 家蚕BmAPH候选基因ORF的克隆 | 第54-55页 |
3.2.3 家蚕BmAPH候选基因的序列分析 | 第55-60页 |
3.3 总结与讨论 | 第60-63页 |
4 家蚕Bm APH候选基因的原核表达、纯化及鉴定 | 第63-87页 |
4.1 材料与方法 | 第63-75页 |
4.1.1 实验材料 | 第63页 |
4.1.2 载体与菌株 | 第63页 |
4.1.3 主要仪器和试剂 | 第63-69页 |
4.1.4 实验方法与步骤 | 第69-75页 |
4.2 结果与分析 | 第75-85页 |
4.2.1 原核表达载体的构建 | 第75-77页 |
4.2.2 BmAPH-pET28a的原核表达 | 第77-81页 |
4.2.3 BmAPH重组蛋白的纯化与鉴定 | 第81-85页 |
4.3 总结与讨论 | 第85-87页 |
4.3.1 家蚕BmAPH候选基因的原核表达情况 | 第85-86页 |
4.3.2 重组蛋白的纯化情况 | 第86页 |
4.3.3 纯化蛋白的鉴定 | 第86-87页 |
5 家蚕BmAPH的表达模式及活性测定 | 第87-109页 |
5.1 材料与方法 | 第87-96页 |
5.1.1 实验材料 | 第87页 |
5.1.2 主要仪器及试剂 | 第87-91页 |
5.1.3 实验方法与步骤 | 第91-96页 |
5.2 结果与分析 | 第96-106页 |
5.2.1 家蚕BmAPH候选基因的表达模式分析 | 第96-98页 |
5.2.2 家蚕BmAPH蛋白二级结构预测 | 第98-101页 |
5.2.3 家蚕BmAPH蛋白抗原特异性分析 | 第101页 |
5.2.4 重组蛋白BmAPH抗体特异性检测 | 第101页 |
5.2.5 家蚕BmAPH蛋白在头和中肠中的定位 | 第101-102页 |
5.2.6 家蚕BmAPH蛋白的活性测定 | 第102-106页 |
5.3 总结与讨论 | 第106-109页 |
5.3.1 家蚕BmAPH候选基因的表达模式分析 | 第106-107页 |
5.3.2 家蚕BmAPH蛋白的组织定位 | 第107页 |
5.3.3 家蚕BmAPH蛋白的活性测定 | 第107-109页 |
6 结论与展望 | 第109-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
参考文献 | 第113-125页 |
附录 | 第125-129页 |
A. 作者在攻读博士学位期间已发表的论文 | 第125页 |
B. 作者在攻读博士学位期间待发表的论文 | 第125页 |
C. 作者在攻读博士学位期间参加的研究课题 | 第125-126页 |
D. 第二章所用序列在NCBI里的具体信息 | 第126-129页 |
E. 原核表达载体pET28(+)结构图 | 第129页 |