| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 葡萄综述 | 第11-12页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第12-13页 |
| 1.3 VDAC与细胞凋亡 | 第13-16页 |
| 1.4 植物VDAC蛋白功能研究进展 | 第16页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 第二章 无核白葡萄VvVDAC基因家族序列分析与蛋白质三维结构预测 | 第18-31页 |
| 2.1 方法 | 第18页 |
| 2.2 结果与分析 | 第18-29页 |
| 2.2.1 无核白葡萄VDAC基因家族的聚类分析 | 第18-21页 |
| 2.2.2 无核白葡萄VDAC基因家族的遗传定位分析 | 第21-22页 |
| 2.2.3 无核白葡萄VvVDAC基因家族与其他主要模式植物VDAC蛋白聚类分析 | 第22-24页 |
| 2.2.4 无核白葡萄VADC基因家族内线粒体通道蛋白标志性结构域(mitochondrial porin signature, MPS)分析 | 第24-25页 |
| 2.2.5 无核白葡萄VDAC基因家族蛋白质三维结构预测及MPS结构域定位预测 | 第25-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 无核白葡萄VvVDAC基因功能分析 | 第31-55页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 3.1.2 菌株及载体 | 第31页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.4 仪器设备 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-43页 |
| 3.2.1 pCambia2300GFP-VvVDAC植物双元表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.1.1 PCR扩增VvVDAC基因片段 | 第32页 |
| 3.2.1.2 PCR回收产物酶切与连接 | 第32-34页 |
| 3.2.1.3 重组载体的转化、鉴定 | 第34页 |
| 3.2.2 PEG介导的原生质体亚细胞定位 | 第34-36页 |
| 3.2.2.1 烟草原生质体的制备 | 第34-35页 |
| 3.2.2.2 PEG介导的原生质体的瞬时转化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 农杆菌介导的烟草瞬时遗传转化 | 第36-37页 |
| 3.2.3.1 农杆菌感受态的制备 | 第36页 |
| 3.2.3.2 农杆菌电击转化 | 第36-37页 |
| 3.2.3.3 农杆菌介导的烟草叶片瞬时转化 | 第37页 |
| 3.2.4 水杨酸诱导瞬时转化烟草叶片的坏死检测 | 第37-38页 |
| 3.2.4.1 台盼蓝染色（Trypan blue staining） | 第37-38页 |
| 3.2.4.2 DAB染色检测过氧化氢（DAB staining） | 第38页 |
| 3.2.5 瞬时转化烟草叶片的蛋白水平检测 | 第38-39页 |
| 3.2.5.1 烟草叶片总蛋白的提取 | 第38-39页 |
| 3.2.5.2 顺转烟草叶片中VvVDAC蛋白的Western blot分析 | 第39页 |
| 3.2.6 无核白葡萄不同组织总RNA提取与cDNA的合成 | 第39-41页 |
| 3.2.6.1 无核白不同组织RNA提取 | 第39-41页 |
| 3.2.6.2 无核白不同组织第一链cDNA的合成 | 第41页 |
| 3.2.7 荧光实时定量PCR检测无核白不同组织VDAC基因家族表达量 | 第41-43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-52页 |
| 3.3.1 植物双元表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.2 VvVDAC基因家族蛋白质的亚细胞定位特征 | 第44-47页 |
| 3.3.3 水杨酸诱导对瞬时转化VDAC基因烟草叶片的致死性分析 | 第47-51页 |
| 3.3.4 水杨酸诱导对VvVDAC5蛋白表达水平的影响 | 第51页 |
| 3.3.5 VvVDAC基因家族各基因于不同组织表达模式 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-55页 |
| 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
