摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
主要英文缩略词索引 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
1.1 类风湿关节炎概论 | 第14-17页 |
1.1.1 RA的发病机制 | 第14-16页 |
1.1.2 诊断标准进展 | 第16页 |
1.1.3 RA缓解指标进展 | 第16-17页 |
1.2 长链非编码RNA概论 | 第17-20页 |
1.3 lncRNA与免疫细胞及风湿性疾病的关系 | 第20-24页 |
1.3.1 lncRNA在免疫细胞中的作用 | 第21-22页 |
1.3.2 lncRNA在风湿性疾病中的作用 | 第22-24页 |
第二章 FLSs原代培养及鉴定 | 第24-32页 |
2.1 研究目的 | 第24页 |
2.2 实验材料 | 第24-26页 |
2.2.1 研究对象和标本收集 | 第24页 |
2.2.2 主要试剂和耗材 | 第24-25页 |
2.2.3 实验试剂配制 | 第25页 |
2.2.4 实验仪器 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-28页 |
2.3.1 FLSs原代培养 | 第26-28页 |
2.3.2 流式细胞术鉴定FLSs纯度 | 第28页 |
2.4 实验结果 | 第28-30页 |
2.4.1 原代培养细胞 | 第28-29页 |
2.4.2 流式细胞术鉴定FLSs细胞纯度 | 第29-30页 |
2.5 讨论 | 第30-32页 |
第三章 RA患者FLSs长链非编码RNA检测分析 | 第32-48页 |
3.1 研究目的 | 第32页 |
3.2 材料 | 第32-34页 |
3.2.1 研究对象 | 第32页 |
3.2.2 主要试剂和耗材 | 第32-33页 |
3.2.3 试剂配制 | 第33页 |
3.2.4 实验仪器 | 第33-34页 |
3.3 实验方法 | 第34-39页 |
3.3.1 RNA提取 | 第34页 |
3.3.2 总RNA纯化 | 第34-35页 |
3.3.3 RNA质量检测 | 第35页 |
3.3.4 逆转录和标记反应 | 第35-36页 |
3.3.5 RNA纯化及cRNA质量检测 | 第36-37页 |
3.3.6 杂交 | 第37-38页 |
3.3.7 芯片洗涤 | 第38页 |
3.3.8 数据提取 | 第38-39页 |
3.4 实验结果 | 第39-46页 |
3.4.1 总RNA提取结果 | 第39-40页 |
3.4.2 芯片结果火山图分析 | 第40-41页 |
3.4.3 差异表达的lncRNAs和mRNAs | 第41-46页 |
3.4.4 聚类分析 | 第46页 |
3.5 讨论 | 第46-48页 |
第四章 差异表达lncRNA的验证及其与临床指标相关性分析 | 第48-64页 |
4.1 研究目的 | 第48页 |
4.2 实验材料 | 第48-50页 |
4.2.1 研究对象 | 第48-49页 |
4.2.2 主要试剂和耗材 | 第49页 |
4.2.3 试剂配制 | 第49页 |
4.2.4 实验仪器 | 第49-50页 |
4.3 实验方法 | 第50-52页 |
4.3.1 RNA提取 | 第50页 |
4.3.2 总RNA纯化 | 第50页 |
4.3.3 RNA质量检测 | 第50页 |
4.3.4 lncRNA分类 | 第50页 |
4.3.5 实时定量PCR | 第50-51页 |
4.3.6 实验室指标及疾病活动性指标 | 第51-52页 |
4.3.7 lncRNA-mRNA共表达分析 | 第52页 |
4.3.8 统计学分析 | 第52页 |
4.4 实验结果 | 第52-61页 |
4.4.1 lncRNAs分类 | 第52-53页 |
4.4.2 定量PCR结果 | 第53-55页 |
4.4.3 相关性分析 | 第55-56页 |
4.4.4 ROC曲线分析 | 第56页 |
4.4.5 lncRNA-mRNA共表达分析 | 第56-61页 |
4.5 讨论 | 第61-64页 |
第五章 差异表达基因的初步生物信息学分析及验证 | 第64-75页 |
5.1 研究目的 | 第64页 |
5.2 材料 | 第64-65页 |
5.2.1 研究对象 | 第64页 |
5.2.2 主要试剂和耗材 | 第64页 |
5.2.3 试剂配制 | 第64页 |
5.2.4 实验仪器 | 第64-65页 |
5.3 实验方法 | 第65-67页 |
5.3.1 RNA提取 | 第65页 |
5.3.2 总RNA纯化 | 第65页 |
5.3.3 RNA质量检测 | 第65页 |
5.3.4 信号通路分析 | 第65页 |
5.3.5 基因本体分析 | 第65页 |
5.3.6 实时定量PCR | 第65-66页 |
5.3.7 统计学分析 | 第66-67页 |
5.4 实验结果 | 第67-73页 |
5.4.1 RA-FLSs mRNA表达谱 | 第67页 |
5.4.2 信号通路(pathway)分析 | 第67-68页 |
5.4.3 基因本体(GO)分析 | 第68-72页 |
5.4.4 细胞定量PCR结果 | 第72-73页 |
5.5 讨论 | 第73-75页 |
第六章 主要结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-80页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |