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类风湿关节炎患者关节成纤维样滑膜细胞差异表达lncRNAs检测及初步生物信息学分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
主要英文缩略词索引第13-14页
第一章 绪论第14-24页
    1.1 类风湿关节炎概论第14-17页
        1.1.1 RA的发病机制第14-16页
        1.1.2 诊断标准进展第16页
        1.1.3 RA缓解指标进展第16-17页
    1.2 长链非编码RNA概论第17-20页
    1.3 lncRNA与免疫细胞及风湿性疾病的关系第20-24页
        1.3.1 lncRNA在免疫细胞中的作用第21-22页
        1.3.2 lncRNA在风湿性疾病中的作用第22-24页
第二章 FLSs原代培养及鉴定第24-32页
    2.1 研究目的第24页
    2.2 实验材料第24-26页
        2.2.1 研究对象和标本收集第24页
        2.2.2 主要试剂和耗材第24-25页
        2.2.3 实验试剂配制第25页
        2.2.4 实验仪器第25-26页
    2.3 实验方法第26-28页
        2.3.1 FLSs原代培养第26-28页
        2.3.2 流式细胞术鉴定FLSs纯度第28页
    2.4 实验结果第28-30页
        2.4.1 原代培养细胞第28-29页
        2.4.2 流式细胞术鉴定FLSs细胞纯度第29-30页
    2.5 讨论第30-32页
第三章 RA患者FLSs长链非编码RNA检测分析第32-48页
    3.1 研究目的第32页
    3.2 材料第32-34页
        3.2.1 研究对象第32页
        3.2.2 主要试剂和耗材第32-33页
        3.2.3 试剂配制第33页
        3.2.4 实验仪器第33-34页
    3.3 实验方法第34-39页
        3.3.1 RNA提取第34页
        3.3.2 总RNA纯化第34-35页
        3.3.3 RNA质量检测第35页
        3.3.4 逆转录和标记反应第35-36页
        3.3.5 RNA纯化及cRNA质量检测第36-37页
        3.3.6 杂交第37-38页
        3.3.7 芯片洗涤第38页
        3.3.8 数据提取第38-39页
    3.4 实验结果第39-46页
        3.4.1 总RNA提取结果第39-40页
        3.4.2 芯片结果火山图分析第40-41页
        3.4.3 差异表达的lncRNAs和mRNAs第41-46页
        3.4.4 聚类分析第46页
    3.5 讨论第46-48页
第四章 差异表达lncRNA的验证及其与临床指标相关性分析第48-64页
    4.1 研究目的第48页
    4.2 实验材料第48-50页
        4.2.1 研究对象第48-49页
        4.2.2 主要试剂和耗材第49页
        4.2.3 试剂配制第49页
        4.2.4 实验仪器第49-50页
    4.3 实验方法第50-52页
        4.3.1 RNA提取第50页
        4.3.2 总RNA纯化第50页
        4.3.3 RNA质量检测第50页
        4.3.4 lncRNA分类第50页
        4.3.5 实时定量PCR第50-51页
        4.3.6 实验室指标及疾病活动性指标第51-52页
        4.3.7 lncRNA-mRNA共表达分析第52页
        4.3.8 统计学分析第52页
    4.4 实验结果第52-61页
        4.4.1 lncRNAs分类第52-53页
        4.4.2 定量PCR结果第53-55页
        4.4.3 相关性分析第55-56页
        4.4.4 ROC曲线分析第56页
        4.4.5 lncRNA-mRNA共表达分析第56-61页
    4.5 讨论第61-64页
第五章 差异表达基因的初步生物信息学分析及验证第64-75页
    5.1 研究目的第64页
    5.2 材料第64-65页
        5.2.1 研究对象第64页
        5.2.2 主要试剂和耗材第64页
        5.2.3 试剂配制第64页
        5.2.4 实验仪器第64-65页
    5.3 实验方法第65-67页
        5.3.1 RNA提取第65页
        5.3.2 总RNA纯化第65页
        5.3.3 RNA质量检测第65页
        5.3.4 信号通路分析第65页
        5.3.5 基因本体分析第65页
        5.3.6 实时定量PCR第65-66页
        5.3.7 统计学分析第66-67页
    5.4 实验结果第67-73页
        5.4.1 RA-FLSs mRNA表达谱第67页
        5.4.2 信号通路(pathway)分析第67-68页
        5.4.3 基因本体(GO)分析第68-72页
        5.4.4 细胞定量PCR结果第72-73页
    5.5 讨论第73-75页
第六章 主要结论第75-76页
参考文献第76-80页
攻读硕士学位期间发表文章第80-81页
致谢第81页

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