中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-22页 |
研究现状、成果 | 第13-20页 |
研究目的、方法 | 第20-22页 |
一、人GRP94基因慢病毒载体的构建 | 第22-42页 |
1.1 对象和方法 | 第22-34页 |
1.1.1 细胞、细菌及质粒 | 第22页 |
1.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
1.1.3 主要溶液、缓冲液与培养基 | 第23-26页 |
1.1.4 主要仪器和设备 | 第26-27页 |
1.1.5 实验方法和流程 | 第27-34页 |
1.1.5.1 人GRP94基因慢病毒质粒的构建 | 第27-32页 |
1.1.5.2 稳定表达GRP94蛋白的人宫颈癌HeLa细胞株筛选及鉴定 | 第32-34页 |
1.2 结果 | 第34-39页 |
1.2.1 GRP94目的片段 | 第34-35页 |
1.2.2 线性pLV-IRES-Puro质粒载体 | 第35-36页 |
1.2.3 重组真核表达质粒pLV-IRES- FLAG-GRP94鉴定结果 | 第36-38页 |
1.2.4 HeLa细胞稳定表达FLAG-GRP94蛋白的细胞株的鉴定 | 第38-39页 |
1.3 讨论 | 第39-40页 |
1.4 小结 | 第40-42页 |
二、作用蛋白筛选 | 第42-49页 |
2.1 对象和方法 | 第42-45页 |
2.1.1 研究细胞 | 第42页 |
2.1.2 主要试剂 | 第42页 |
2.1.3 主要主要溶液、缓冲液与培养基 | 第42页 |
2.1.4 主要仪器和设备 | 第42页 |
2.1.5 实验方法和流程 | 第42-45页 |
2.1.5.1 收取HeLa细胞总蛋白 | 第42-43页 |
2.1.5.2 Flag-IP实验 | 第43页 |
2.1.5.3 聚丙酰胺凝胶电泳 | 第43-44页 |
2.1.5.4 银染 | 第44页 |
2.1.5.5 质谱分析 | 第44-45页 |
2.1.5.6 Co-IP验证GRP94与SND1、HLA-A的结合 | 第45页 |
2.2 结果 | 第45-46页 |
2.2.1 银染胶质谱分析结果 | 第45-46页 |
2.2.2 GRP94与HLA-A、SND1的结合结果 | 第46页 |
2.3 讨论 | 第46-48页 |
2.4 小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第57-58页 |
综述 GRP94的生物学特性及其与肿瘤的关系 | 第58-67页 |
综述参考文献 | 第64-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
个人简历 | 第68页 |