| 英文缩略词表 | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-20页 |
| 前言 | 第21-24页 |
| 材料与方法 | 第24-50页 |
| 1 实验材料 | 第24-27页 |
| 1.1 药品 | 第24页 |
| 1.2 实验试剂 | 第24-26页 |
| 1.3 实验仪器 | 第26页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第26-27页 |
| 1.5 细胞株 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-49页 |
| 2.1 受试化合物的配制方法 | 第27页 |
| 2.2 MTT法检测Zey体外对肿瘤细胞存活率的影响 | 第27-28页 |
| 2.3 细胞培养及形态观察 | 第28页 |
| 2.4 DAPI染色检测Zey对HeLa和Caski细胞核的影响 | 第28-29页 |
| 2.5 克隆原形成试验测定Zey对HeLa和Caski细胞集落形成能力的影响 | 第29页 |
| 2.6 流式细胞术分析Zey对HeLa和Caski细胞周期分布的影响 | 第29-30页 |
| 2.7 明胶酶谱法检测Zey对HeLa细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)的影响 | 第30-31页 |
| 2.8 SILAC蛋白定量试剂盒检测Zey对HeLa细胞蛋白表达的影响 | 第31-36页 |
| 2.9 透射电子显微镜检测Zey对HeLa和Caski细胞超微结构的影响 | 第36页 |
| 2.10 AO/EB染色检测Zey对HeLa和Caski细胞凋亡的影响 | 第36-37页 |
| 2.11 JC-1染色检测Zey对HeLa和Caski细胞线粒体膜电位的影响 | 第37页 |
| 2.12 Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒检测Zey对HeLa和Caski细胞诱导凋亡的作用 | 第37-38页 |
| 2.13 DCFH-DA荧光探针检测化合物对HeLa细胞活性氧产生的影响 | 第38-39页 |
| 2.14 TUNEL原位检测Zey对HeLa和Caski细胞诱导凋亡的作用 | 第39页 |
| 2.15 Caspase-3荧光活性检测Zey对HeLa和Caski细胞诱导凋亡的作用 | 第39-40页 |
| 2.16 PharmaDB药效团模型筛选Zey作用靶点 | 第40-41页 |
| 2.17 Western blot分析Zey对HeLa和Caski细胞蛋白表达的影响 | 第41-44页 |
| 2.18 应用小分子抑制剂寻找Zey作用于HeLa和Caski细胞的关键蛋白 | 第44页 |
| 2.19 Real-Time PCR | 第44-46页 |
| 2.20 Zey对人宫颈癌细胞HeLa裸鼠异体移植瘤的抑制作用 | 第46-49页 |
| 3 数据处理与统计学分析 | 第49-50页 |
| 实验结果 | 第50-104页 |
| 1 Zey体外抗肿瘤作用初步研究 | 第50-59页 |
| 1.1 Zey的瘤谱筛查 | 第50页 |
| 1.2 Zey抑制HeLa和Caski细胞增殖的时效和量效关系 | 第50-51页 |
| 1.3 Zey对HeLa和Caski细胞形态的影响 | 第51-52页 |
| 1.4 Zey对HeLa和Caski细胞核形态的影响 | 第52-55页 |
| 1.5 Zey对HeLa和Caski细胞克隆原集落形成能力的影响 | 第55-56页 |
| 1.6 Zey对HeLa和Caski细胞周期的影响 | 第56-58页 |
| 1.7 Zey对HeLa细胞基质金属蛋白酶分泌的影响 | 第58-59页 |
| 2 SILAC分析Zey对肿瘤细胞蛋白质组表达变化的影响 | 第59-65页 |
| 2.1 标记效率的检测 | 第59-60页 |
| 2.2 SILAC和HPLC-ESI-MS/MS检测Zey处理前后HeLa细胞差异蛋白 | 第60页 |
| 2.3 蛋白分类 | 第60-63页 |
| 2.4 Zey通过14-3-3家族和Bcl-2通路诱导凋亡 | 第63页 |
| 2.5 Zey通过HSP70家族诱导凋亡 | 第63页 |
| 2.6 Zey通过核糖体核蛋白诱导凋亡 | 第63-65页 |
| 3 Zey诱导肿瘤细胞凋亡作用研究 | 第65-75页 |
| 3.1 透射电子显微镜观察Zey对HeLa和Caski细胞超微结构的影响 | 第65-68页 |
| 3.2 Zey对HeLa和Caski细胞AO/EB染色的影响 | 第68-69页 |
| 3.3 Zey对HeLa和Caski细胞线粒体膜电位的影响 | 第69页 |
| 3.4 Annexin V-FITC/PI双染色分析Zey对HeLa和Caski细胞凋亡的影响 | 第69-72页 |
| 3.5 TUNEL染色分析Zey对HeLa和Caski细胞凋亡的影响 | 第72-74页 |
| 3.6 Zey对HeLa和Caski细胞活性氧产生的影响 | 第74-75页 |
| 4 Zey体外抗肿瘤分子机制研究 | 第75-97页 |
| 4.1 Western blot技术研究Zey对凋亡相关信号通路的影响 | 第76-87页 |
| 4.1.1 Zey对内源凋亡通路的影响 | 第76-78页 |
| 4.1.2 Zey对外源凋亡通路的影响 | 第78-81页 |
| 4.1.3 Zey对caspase家族蛋白的影响 | 第81-84页 |
| 4.1.4 Zey对Bcl-2家族蛋白表达的影响 | 第84-87页 |
| 4.2 Zey对ERK/PK和PI3K/AKT/mTOR信号通路激酶磷酸化水平的影响 | 第87-93页 |
| 4.2.1 应用Discovery Studio 3.5中的PharmaDB药效团库寻找Zey潜在的靶标 | 第87-88页 |
| 4.2.2 Zey对ERK/MAPK信号通路激酶磷酸化水平的影响 | 第88-90页 |
| 4.2.3 Zey对PI3K/AKT/mTOR信号通路激酶磷酸化水平的影响 | 第90-93页 |
| 4.3 PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂探究Zey对激酶磷酸化水平的影响 | 第93-97页 |
| 5 Zey体内对人宫颈癌HeLa裸鼠移植瘤药效实验及分子机制研究 | 第97-104页 |
| 5.1 Zey对宫颈癌细胞HeLa移植瘤小鼠体重和肿瘤体积的影响 | 第97-99页 |
| 5.2 Zey对宫颈癌细胞HeLa移植瘤小鼠瘤重的影响 | 第99-100页 |
| 5.3 相对肿瘤增殖率的时效关系 | 第100-101页 |
| 5.4 相对肿瘤增殖率的量效关系 | 第101页 |
| 5.5 Zey对宫颈癌肿瘤组织中p-PI3K蛋白表达的影响 | 第101-102页 |
| 5.6 Zey对宫颈癌肿瘤组织中增殖、凋亡信号通路的影响 | 第102-104页 |
| 讨论 | 第104-114页 |
| 1 Zey的体外药效作用特点 | 第104-107页 |
| 1.1 Zey对肿瘤细胞增殖的选择性抑制作用 | 第104页 |
| 1.2 Zey对肿瘤细胞的周期阻滞作用 | 第104-105页 |
| 1.3 Zey对肿瘤细胞生物学行为的影响 | 第105-106页 |
| 1.4 Zey诱导肿瘤细胞凋亡的作用 | 第106-107页 |
| 2 Zey体外抗肿瘤作用的机制研究 | 第107-110页 |
| 2.1 SILAC对Zey处理前后HeLa细胞蛋白变化的影响 | 第107-108页 |
| 2.2 Zey对凋亡相关通路的影响 | 第108-109页 |
| 2.3 Zey对ERK/MAPK和PI3K/AKT/mTOR信号通路激酶磷酸化水平的影响 | 第109-110页 |
| 3 PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂探究Zey作用靶点 | 第110-112页 |
| 4 Zey对人宫颈癌细胞HeLa裸鼠异体移植瘤模型的影响 | 第112页 |
| 5 Zey体内抗肿瘤作用的机制研究 | 第112-114页 |
| 结论 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-121页 |
| 文献综述一 | 第121-133页 |
| 参考文献 | 第129-133页 |
| 文献综述二 | 第133-141页 |
| 参考文献 | 第137-141页 |
| 附录 | 第141-170页 |
| 致谢 | 第170-171页 |
| 作者简介及发表文章 | 第171页 |
