| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写说明 | 第19-20页 |
| 第1章 绪论 | 第20-44页 |
| 1.1 多不饱和脂肪酸合成途径的研究进展 | 第20-23页 |
| 1.1.1 多不饱和脂肪酸 | 第20页 |
| 1.1.2 多不饱和脂肪酸的生物学活性 | 第20-21页 |
| 1.1.3 生物体内多不饱和脂肪酸的合成 | 第21-23页 |
| 1.2 α-亚麻酸和 γ-亚麻酸的研究进展 | 第23-26页 |
| 1.2.1 α-亚麻酸的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.2.2 γ-亚麻酸研究进展 | 第25-26页 |
| 1.3 脂肪酸脱氢酶基因的研究进展 | 第26-36页 |
| 1.3.1 脂肪酸脱氢酶的基本概况 | 第26-28页 |
| 1.3.2 脂肪酸脱氢酶基因研究的常用方法 | 第28页 |
| 1.3.3 ω3-脂肪酸脱氢酶的研究进展 | 第28-30页 |
| 1.3.4 Δ6-脂肪酸脱氢酶研究进展 | 第30-32页 |
| 1.3.5 Δ6-脂肪酸脱氢酶的结构与功能 | 第32-33页 |
| 1.3.6 Δ6-脂肪酸脱氢酶的系统进化研究进展 | 第33-36页 |
| 1.4 昆虫脂肪酸脱氢酶的研究进展 | 第36-41页 |
| 1.4.1 昆虫脂肪酸概述 | 第36-37页 |
| 1.4.2 昆虫脂肪酸脱氢酶概述 | 第37-40页 |
| 1.4.3 家蚕脂肪酸脱氢酶概述 | 第40-41页 |
| 1.5 研究背景及意义 | 第41-44页 |
| 1.5.1 研究的主要内容 | 第42-43页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第43-44页 |
| 第2章 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的克隆与序列分析 | 第44-74页 |
| 2.1 引言 | 第44页 |
| 2.2 材料与设备 | 第44-47页 |
| 2.2.1 材料 | 第44-45页 |
| 2.2.2 酶和试剂 | 第45页 |
| 2.2.3 引物合成和测序 | 第45-46页 |
| 2.2.4 培养基和溶液配制 | 第46页 |
| 2.2.5 仪器和设备 | 第46-47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-56页 |
| 2.3.1 家蚕总RNA和基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.3.2 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因核心片段的获取 | 第48-49页 |
| 2.3.3 重组质粒的构建与检测 | 第49-52页 |
| 2.3.4 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因 5’-RACE-Ready cDNA的合成 | 第52页 |
| 2.3.5 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因 5’SMART RACE PCR扩增 | 第52-53页 |
| 2.3.6 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因 3’-RACE-Ready cDNA的合成 | 第53-54页 |
| 2.3.7 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因 3’ SMART RACE PCR扩增 | 第54-55页 |
| 2.3.8 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的表达模式 | 第55-56页 |
| 2.3.9 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的序列分析 | 第56页 |
| 2.3.10 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的进化树构建 | 第56页 |
| 2.4 结果与分析 | 第56-70页 |
| 2.4.1 家蚕总RNA抽提结果 | 第56-57页 |
| 2.4.2 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES RACE扩增电泳结果 | 第57-58页 |
| 2.4.3 BmFAD3-like和BmD6DES RACE全长扩增拼接结果 | 第58-61页 |
| 2.4.5 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的序列分析 | 第61-64页 |
| 2.4.6 BmFAD3-like和BmD6DES基因的同源序列比对和进化分析 | 第64-69页 |
| 2.4.7 BmFAD3-like和BmD6DES基因表达谱分析 | 第69-70页 |
| 2.5 讨论 | 第70-74页 |
| 第3章 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的原核表达 | 第74-86页 |
| 3.1 引言 | 第74页 |
| 3.2 材料与方法 | 第74-76页 |
| 3.2.1 主要载体及试剂 | 第74-75页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第75页 |
| 3.2.3 主要试剂配制方法 | 第75-76页 |
| 3.3 实验方法 | 第76-80页 |
| 3.3.1 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因重组表达质粒的构建 | 第76-78页 |
| 3.3.2 转化细胞的诱导表达 | 第78页 |
| 3.3.3 电泳 | 第78-79页 |
| 3.3.4 Western bloting检测 | 第79-80页 |
| 3.4 结果与分析 | 第80-83页 |
| 3.4.1 原核表达载体的构建 | 第80-81页 |
| 3.4.2 基因重组质粒的构建 | 第81-82页 |
| 3.4.3 BmFAD3-like和BmD6DES蛋白诱导及表达形式鉴定 | 第82页 |
| 3.4.4 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES蛋白的Western blotting检测 | 第82-83页 |
| 3.5 讨论 | 第83-86页 |
| 第4章 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因在酿酒酵母中的表达 | 第86-98页 |
| 4.1 引言 | 第86页 |
| 4.2 材料和方法 | 第86-88页 |
| 4.2.1 材料 | 第86页 |
| 4.2.2 菌株和质粒 | 第86页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第86-87页 |
| 4.2.4 培养基 | 第87页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第87-88页 |
| 4.3 实验方法 | 第88-92页 |
| 4.3.1 重组表达载体的构建 | 第88-90页 |
| 4.3.2 酿酒酵母感受态细胞的制备及转化(醋酸锂法) | 第90页 |
| 4.3.3 酵母阳性转化子质粒提取及检测 | 第90-91页 |
| 4.3.4 酿酒酵母工程菌的筛选和诱导表达 | 第91-92页 |
| 4.3.5 重组基因表达产物样品的气相色谱分析 | 第92页 |
| 4.4 实验结果 | 第92-96页 |
| 4.4.1 表达载体构建 | 第92-93页 |
| 4.4.2 阳性克隆的筛选 | 第93-94页 |
| 4.4.3 脂肪酸GC检测 | 第94-96页 |
| 4.5 讨论 | 第96-98页 |
| 第5章 家蚕BmFAD3-like和BmD6DES基因的表达调控研究 | 第98-108页 |
| 5.1 引言 | 第98-99页 |
| 5.2 材料与方法 | 第99-101页 |
| 5.2.1 材料 | 第99页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第99-100页 |
| 5.2.3 方法 | 第100-101页 |
| 5.3 结果与分析 | 第101-105页 |
| 5.3.1 低温诱导对家蚕BmFAD3-like和BmD6DES mRNA相对转录水平的影响 | 第101-102页 |
| 5.3.2 真菌侵染对家蚕BmFAD3-like和BmD6DES mRNA相对转录水平的影响 | 第102-104页 |
| 5.3.3 注射siRNA后对家蚕BmFAD3-like和BmD6DES mRNA相对转录水平的影响 | 第104-105页 |
| 5.4 讨论 | 第105-108页 |
| 结论 | 第108-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
