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慢病毒介导VEGF165感染hADSCs与HUVEC共培养构建工程脂肪修复大鼠软组织缺损的实验研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词表第7-12页
前言第12-14页
第一部分 慢病毒载体介导增强绿色荧光蛋白感染人脂肪间充质干细胞及其成脂分化的实验研究第14-19页
    1 材料和方法第14-16页
        1.1 材料第14页
        1.2 实验方法第14-16页
            1.2.1 hADSCs分离、培养与表面标志第14-15页
            1.2.2 hADSCs的多向诱导分化第15页
            1.2.3 慢病毒载体感染hADSCs第15页
            1.2.4 流式细胞仪检测感染效第15页
            1.2.5 MTT法检测感染前后细胞增殖情况第15页
            1.2.6 油红O染色比较细胞的成脂能力第15-16页
            1.2.7 统计学分析第16页
    2 结果第16-17页
        2.1 hADSCs的形态特征第16页
        2.2 流式细胞仪鉴定细胞表面分子第16页
        2.3 hADSCs多向诱导分化第16页
        2.4 慢病毒载体感染hADSCs第16-17页
            2.4.1 感染后hADSCs的荧光表达第16-17页
            2.4.2 感染后hADSCs的形态学变化第17页
        2.5 慢病毒感染后对hADSCs增殖的影响第17页
        2.6 慢病毒感染后对hADSCs成脂能力的影响第17页
    3 讨论第17-19页
第二部分 人脂肪间充质干细胞与脐静脉内皮细胞共培养与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的体外研究第19-26页
    1 材料与方法第19-22页
        1.1 材料来源第19页
        1.2 主要试剂和仪器第19-20页
        1.3 实验方法第20-22页
            1.3.1 hADSCs的分离培养、扩增与鉴定第20页
            1.3.2 HUVEC的培养、扩增与鉴定第20页
            1.3.3 MTT法比较hADSCs与HUVEC增殖曲线第20页
            1.3.4 hADSCs与HUVEC共培养比例的探索第20-21页
            1.3.5 丝素蛋白支架材料上三维培养第21页
            1.3.6 细胞支架复合物的扫描电镜与油红O染色第21页
            1.3.7 RT-PCR检测成脂基因PPARγ-2第21-22页
            1.3.8 统计学分析第22页
    2 结果第22-24页
        2.1 hADSCs的性状特征、表面分子及多向诱导分化第22页
        2.2 HUVEC的性状特征与表面分子第22-23页
        2.3 hADSCs与HUVEC生长曲线比较第23页
        2.4 hADSCs与HUVEC不同比例直接共培养第23页
        2.5 支架材料上三维培养比较血管形成能力第23页
        2.6 丝素蛋白的大体观与镜下观第23页
        2.7 细胞支架复合物的扫描电镜第23-24页
        2.8 RT-PCR检测成脂基因PPARγ-2第24页
    3 讨论第24-26页
第三部分 VEGF165介导的慢病毒感染hADSCs与HUVEC共培养构建工程脂肪修复软组织缺损的体内实验研究第26-33页
    1 材料及方法第26-30页
        1.1 实验材料第26-27页
            1.1.1 组织来源第26-27页
            1.1.2 主要试剂及实验用品第27页
        1.2 实验方法第27-28页
            1.2.1 人脂肪间充质干细胞的分离、培养与鉴定第27页
            1.2.2 HUVEC的性状特征与表面分子第27页
            1.2.3 EGFP介导的慢病毒载体感染人脂肪间充质干细胞最适感染复数的探索第27页
            1.2.4 细胞种植于丝素蛋白支架材料第27-28页
            1.2.5 大鼠软组织缺损模型的制备细胞-支架复合物的体内移植第28页
            1.2.6 体内材料油红O染色第28页
            1.2.7 体内材料的HE染色第28页
            1.2.8 统计学分析第28页
        2.3 实验结果第28-30页
            2.3.1 人脂肪间充质干细胞的分离、培养与鉴定第28-29页
            2.3.2 慢病毒载体介导EGFP感染hADSCs最适感染复数的探索第29页
            2.3.3 细胞种植于丝素蛋白支架材料第29页
            2.3.4 大体观察第29页
            2.3.5 体内材料的电镜观察第29-30页
            2.3.6 体内材料的油红0染色与绿色荧光表达第30页
            2.3.7 体内材料的HE染色第30页
    3 讨论第30-33页
结论第33-34页
参考文献第34-37页
在学期间的研究成果第37-38页
致谢第38-39页
综述第39-47页
    参考文献第44-47页
附图第47-57页

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