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池蝶蚌亲环蛋白A(CyPA)基因特异性表达及多克隆抗体制备

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第1章 文献综述第12-22页
   ·亲环素家族介绍第12-13页
   ·亲环素A的结构特征第13-14页
   ·亲环素的生物学功能第14-16页
     ·亲环素与蛋白折叠第14页
     ·亲环素与免疫抑制第14-15页
     ·亲环素与细胞信号传导第15页
     ·亲环素与细胞凋亡第15-16页
   ·目前的研究热点第16-20页
     ·CyPA与HIV病毒第16-17页
     ·CyPA与肿瘤第17页
     ·CyPA与心脑血管疾病第17-18页
     ·CyPA与炎症反应第18-19页
     ·亲环素与植物抗逆性的研究第19页
     ·CyPA抑制剂药物的开发第19-20页
   ·本研究的内容、目的及意义第20-22页
第2章 池蝶蚌CyPA基因的时空表达及嗜水气单胞杆菌诱导后的特异性表达第22-41页
 摘要第22页
   ·引言第22页
   ·材料和方法第22-27页
     ·材料第22-23页
     ·嗜水气单胞杆菌灭活菌液的制备第23页
     ·池蝶蚌不同组织组织CyPA基因的表达第23-27页
     ·池蝶蚌不同年龄CyPA基因的表达第27页
     ·嗜水汽单胞杆菌诱导池蝶蚌性腺中CyPA基因的表达第27页
     ·嗜水汽单胞杆菌诱导池蝶蚌肝脏中CyPA基因的表达第27页
     ·嗜水汽单胞杆菌诱导池蝶蚌血淋巴中CyPA基因的表达第27页
   ·实验结果第27-39页
     ·池蝶蚌CyPA基因的结构与特征第27-28页
     ·提取的总RNA第28页
     ·cDNA模板检测第28-29页
     ·池蝶蚌不同组织中CyPA基因表达的研究第29-31页
     ·池蝶蚌不同年龄中CyPA基因表达的研究第31-32页
     ·嗜水气单胞杆菌诱导池蝶蚌CyPA基因在性腺中表达研究第32-35页
     ·嗜水气单胞杆菌诱导池蝶蚌CyPA基因在肝脏中表达研究第35-37页
     ·嗜水气单胞杆菌诱导池蝶蚌CyPA基因在血淋巴中表达研究第37-39页
   ·分析与讨论第39-41页
第3章 池蝶蚌CyPA蛋白表达纯化及多克隆抗体制备第41-62页
   ·材料和方法第41-52页
     ·目的片段cDNA的克隆第41-43页
     ·池蝶蚌pET-32a-CyPA重组质粒的构建与鉴定第43-46页
     ·重组蛋白的原核表达第46-47页
     ·可溶性重组CyPA蛋白表达条件优化第47页
     ·表达蛋白的纯化第47-49页
     ·Bradford法测定蛋白浓度第49-50页
     ·糜蛋白酶偶联法测定CyPA重组蛋白的活性第50-51页
     ·多克隆抗体的制备第51页
     ·ELISA间接法测定多克隆抗体效价第51-52页
   ·实验结果第52-61页
     ·目的片段PCR扩增第52-53页
     ·PCR产物回收第53页
     ·阳性重组质粒的筛选第53-54页
     ·重组质双酶切鉴定第54页
     ·目的蛋白诱导表达第54-55页
     ·可溶性重组CyPA蛋白表达条件优化第55-56页
     ·蛋白纯化第56-57页
     ·Bradford法测定蛋白浓度第57-59页
     ·CyPA重组蛋白活性检测结果第59-60页
     ·多隆抗体效价第60-61页
   ·分析与讨论第61-62页
第4章 结论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-69页

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