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绵羊骨骼肌高表达miRNA靶基因的高通量获取及部分候选靶基因生物功能研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词表(Abbreviations)第10-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述 哺乳动物 miRNA 与其靶基因作用机制研究进展第12-24页
    1.1 miRNA的转录及加工成熟第12-13页
    1.2 miRNA与靶基因的结合第13-14页
        1.2.1 动物miRNA的“种子序列”第13页
        1.2.2 miRNA 3’端序列对“种子序列”与靶位点结合的稳固第13-14页
        1.2.3 miRNA与其靶基因的结合位点第14页
    1.3 miRNA基因的多态性对其加工成熟的影响第14-15页
    1.4 miRNA对靶基因的调控第15-17页
        1.4.1 抑制mRNA翻译起始第15-16页
        1.4.2 翻译起始后的调节第16-17页
        1.4.3 miRNA调节mRNA的降解第17页
    1.5 获取miRNA靶基因的方法第17-19页
        1.5.1 生物信息学分析的方法第17-18页
        1.5.2 差异表达谱分析法第18页
        1.5.3 miRISC免疫共沉淀法第18-19页
    1.6 哺乳动物肌肉miRNA及其靶基因研究进展第19-21页
        1.6.1 哺乳动物肌肉miRNA研究进展第19-20页
        1.6.2 肌肉miRNA靶基因研究进展第20-21页
    1.7 哺乳动物骨骼肌发育及其分子调控机制第21-23页
        1.7.1 哺乳动物胚胎期肌生成第21-22页
        1.7.2 成年动物肌肉组织的维持及修复第22页
        1.7.3 肌生成的分子调控机制第22-23页
    1.8 研究目的和意义第23-24页
第二章 绵羊骨骼肌中miRNA表达研究第24-31页
    1. 材料与方法第24-27页
        1.1 试验材料第24-25页
        1.2 方法第25-27页
        1.3 数据处理及分析第27页
    2. 结果与分析第27-29页
        2.1 总RNA提取质量检测第27-28页
        2.2 绵羊骨骼肌中miRNA表达情况第28页
        2.3 芯片检测数据的验证第28-29页
    3. 讨论第29-30页
    4. 小结第30-31页
第三章 绵羊骨骼肌中高表达miRNA前体序列的多态性研究第31-55页
    1. 材料与方法第31-40页
        1.1 试验材料第31-32页
        1.2 试验方法第32-40页
        1.3 数据分析第40页
    2. 结果与分析第40-52页
        2.1 绵羊骨骼肌高表达miRNA前体序列突变第40-42页
        2.2 miRNA前体序列突变的特点第42-43页
        2.3 miRNA前体序列突变对其二级结构及稳定性的影响第43-46页
        2.4 序列突变在不同产肉性能绵羊品种间的差异第46-49页
        2.5 miRNA前体序列突变对其成熟加工的影响第49-52页
    3. 讨论第52-54页
        3.1 绵羊骨骼肌高表达miRNA前体序列的突变第52-53页
        3.2 miRNA前体序列突变与其成熟加工的关系第53-54页
    4. 小结第54-55页
第四章 绵羊不同发育阶段骨骼肌中miRNA表达情况研究第55-66页
    1. 材料与方法第55-59页
        1.1 试验材料第55-56页
        1.2 方法第56-59页
        1.3 数据分析第59页
    2. 结果与分析第59-64页
        2.1 骨骼肌总RNA提取及检测第59页
        2.2 22个绵羊骨骼肌高表达miRNA在不同发育阶段骨骼肌中的表达情况第59-62页
        2.3 miRNA靶基因预测及其KEGG通路分析第62-64页
    3. 讨论第64-65页
    4. 小结第65-66页
第五章 绵羊骨骼肌高表达miRNA靶基因的研究第66-83页
    1. 材料与方法第66-75页
        1.1 试验材料第66-67页
        1.2 试验方法第67-75页
    2. 结果与分析第75-81页
        2.1 胚胎期和成年羊骨骼肌总RNA大剂量提取结果第75页
        2.2 总RNA中混入基因组的消化及评估第75-76页
        2.3 mRNA纯化效果第76-77页
        2.4 靶基因文库的构建及初步评估第77-79页
        2.5 文库阳性克隆挑选及菌落PCR鉴定第79页
        2.6 靶基因文库测序结果比对分析第79-81页
    3. 讨论第81-82页
    4. 小结第82-83页
第六章 miR-133对绵羊肌卫星细胞生长的影响及其靶基因的验证第83-98页
    1. 材料与方法第83-90页
        1.1 试验材料第83-85页
        1.2 试验方法第85-89页
        1.3 数据分析第89-90页
    2. 结果与分析第90-94页
        2.1 绵羊骨骼肌卫星细胞培养及转染第90页
        2.2 miR-133对绵羊骨骼肌卫星细胞生长的影响第90-91页
        2.3 miR-133对绵羊骨骼肌中4个候选靶基因表达的影响第91-94页
    3. 讨论第94-97页
        3.1 绵羊骨骼肌卫星细胞的生长特性及转染特性第94-95页
        3.2 miR-133对绵羊骨骼肌卫星细胞基因的靶向调控第95-97页
    4. 小结第97-98页
结论第98-99页
创新点第99-100页
参考文献第100-110页
致谢第110-111页
附录第111-114页
作者简介第114-115页
附件第115页

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