摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表(Abbreviations) | 第10-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 哺乳动物 miRNA 与其靶基因作用机制研究进展 | 第12-24页 |
1.1 miRNA的转录及加工成熟 | 第12-13页 |
1.2 miRNA与靶基因的结合 | 第13-14页 |
1.2.1 动物miRNA的“种子序列” | 第13页 |
1.2.2 miRNA 3’端序列对“种子序列”与靶位点结合的稳固 | 第13-14页 |
1.2.3 miRNA与其靶基因的结合位点 | 第14页 |
1.3 miRNA基因的多态性对其加工成熟的影响 | 第14-15页 |
1.4 miRNA对靶基因的调控 | 第15-17页 |
1.4.1 抑制mRNA翻译起始 | 第15-16页 |
1.4.2 翻译起始后的调节 | 第16-17页 |
1.4.3 miRNA调节mRNA的降解 | 第17页 |
1.5 获取miRNA靶基因的方法 | 第17-19页 |
1.5.1 生物信息学分析的方法 | 第17-18页 |
1.5.2 差异表达谱分析法 | 第18页 |
1.5.3 miRISC免疫共沉淀法 | 第18-19页 |
1.6 哺乳动物肌肉miRNA及其靶基因研究进展 | 第19-21页 |
1.6.1 哺乳动物肌肉miRNA研究进展 | 第19-20页 |
1.6.2 肌肉miRNA靶基因研究进展 | 第20-21页 |
1.7 哺乳动物骨骼肌发育及其分子调控机制 | 第21-23页 |
1.7.1 哺乳动物胚胎期肌生成 | 第21-22页 |
1.7.2 成年动物肌肉组织的维持及修复 | 第22页 |
1.7.3 肌生成的分子调控机制 | 第22-23页 |
1.8 研究目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 绵羊骨骼肌中miRNA表达研究 | 第24-31页 |
1. 材料与方法 | 第24-27页 |
1.1 试验材料 | 第24-25页 |
1.2 方法 | 第25-27页 |
1.3 数据处理及分析 | 第27页 |
2. 结果与分析 | 第27-29页 |
2.1 总RNA提取质量检测 | 第27-28页 |
2.2 绵羊骨骼肌中miRNA表达情况 | 第28页 |
2.3 芯片检测数据的验证 | 第28-29页 |
3. 讨论 | 第29-30页 |
4. 小结 | 第30-31页 |
第三章 绵羊骨骼肌中高表达miRNA前体序列的多态性研究 | 第31-55页 |
1. 材料与方法 | 第31-40页 |
1.1 试验材料 | 第31-32页 |
1.2 试验方法 | 第32-40页 |
1.3 数据分析 | 第40页 |
2. 结果与分析 | 第40-52页 |
2.1 绵羊骨骼肌高表达miRNA前体序列突变 | 第40-42页 |
2.2 miRNA前体序列突变的特点 | 第42-43页 |
2.3 miRNA前体序列突变对其二级结构及稳定性的影响 | 第43-46页 |
2.4 序列突变在不同产肉性能绵羊品种间的差异 | 第46-49页 |
2.5 miRNA前体序列突变对其成熟加工的影响 | 第49-52页 |
3. 讨论 | 第52-54页 |
3.1 绵羊骨骼肌高表达miRNA前体序列的突变 | 第52-53页 |
3.2 miRNA前体序列突变与其成熟加工的关系 | 第53-54页 |
4. 小结 | 第54-55页 |
第四章 绵羊不同发育阶段骨骼肌中miRNA表达情况研究 | 第55-66页 |
1. 材料与方法 | 第55-59页 |
1.1 试验材料 | 第55-56页 |
1.2 方法 | 第56-59页 |
1.3 数据分析 | 第59页 |
2. 结果与分析 | 第59-64页 |
2.1 骨骼肌总RNA提取及检测 | 第59页 |
2.2 22个绵羊骨骼肌高表达miRNA在不同发育阶段骨骼肌中的表达情况 | 第59-62页 |
2.3 miRNA靶基因预测及其KEGG通路分析 | 第62-64页 |
3. 讨论 | 第64-65页 |
4. 小结 | 第65-66页 |
第五章 绵羊骨骼肌高表达miRNA靶基因的研究 | 第66-83页 |
1. 材料与方法 | 第66-75页 |
1.1 试验材料 | 第66-67页 |
1.2 试验方法 | 第67-75页 |
2. 结果与分析 | 第75-81页 |
2.1 胚胎期和成年羊骨骼肌总RNA大剂量提取结果 | 第75页 |
2.2 总RNA中混入基因组的消化及评估 | 第75-76页 |
2.3 mRNA纯化效果 | 第76-77页 |
2.4 靶基因文库的构建及初步评估 | 第77-79页 |
2.5 文库阳性克隆挑选及菌落PCR鉴定 | 第79页 |
2.6 靶基因文库测序结果比对分析 | 第79-81页 |
3. 讨论 | 第81-82页 |
4. 小结 | 第82-83页 |
第六章 miR-133对绵羊肌卫星细胞生长的影响及其靶基因的验证 | 第83-98页 |
1. 材料与方法 | 第83-90页 |
1.1 试验材料 | 第83-85页 |
1.2 试验方法 | 第85-89页 |
1.3 数据分析 | 第89-90页 |
2. 结果与分析 | 第90-94页 |
2.1 绵羊骨骼肌卫星细胞培养及转染 | 第90页 |
2.2 miR-133对绵羊骨骼肌卫星细胞生长的影响 | 第90-91页 |
2.3 miR-133对绵羊骨骼肌中4个候选靶基因表达的影响 | 第91-94页 |
3. 讨论 | 第94-97页 |
3.1 绵羊骨骼肌卫星细胞的生长特性及转染特性 | 第94-95页 |
3.2 miR-133对绵羊骨骼肌卫星细胞基因的靶向调控 | 第95-97页 |
4. 小结 | 第97-98页 |
结论 | 第98-99页 |
创新点 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
附录 | 第111-114页 |
作者简介 | 第114-115页 |
附件 | 第115页 |