| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩写词与中英文对照 | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 CTV的生物学特征 | 第13-14页 |
| 1.1.1 分类地位 | 第13页 |
| 1.1.2 寄主范围 | 第13页 |
| 1.1.3 传播方式 | 第13页 |
| 1.1.4 株系分化及症状 | 第13-14页 |
| 1.2 CTV基因组分子生物学特征 | 第14页 |
| 1.3 检测方法 | 第14-18页 |
| 1.3.1 指示植物鉴定法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 血清学检测方法 | 第16页 |
| 1.3.3 分子生物学检测方法 | 第16-18页 |
| 1.4 CTV株系基因型分析 | 第18-19页 |
| 1.4.1 血清学检测分析 | 第19页 |
| 1.4.2 多重分子标记分析 | 第19页 |
| 1.4.3 Real time RT-PCR检测分析 | 第19页 |
| 1.5 病毒在植株内含量的时空变化规律 | 第19-20页 |
| 1.6 弱毒株交叉保护研究 | 第20-21页 |
| 第2章 引言 | 第21-23页 |
| 第3章 T3基因型CTV实时荧光定量RT-PCR检测体系建立 | 第23-37页 |
| 3.1 材料和方法 | 第23-25页 |
| 3.1.1 供试毒源 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 3.1.4 常用储备液及缓冲液 | 第24-25页 |
| 3.2 试验方法 | 第25-31页 |
| 3.2.1 柑橘叶片总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 3.2.2 引物的设计 | 第26页 |
| 3.2.3 RT-PCR扩增与克隆鉴定 | 第26-29页 |
| 3.2.4 标准品cRNA的制备 | 第29-30页 |
| 3.2.5 实时荧光定量RT-PCR条件的优化和标准曲线的建立 | 第30页 |
| 3.2.6 反应体系的方法学测试 | 第30-31页 |
| 3.2.7 田间样品CTV T3基因型相对含量检测 | 第31页 |
| 3.3 试验结果 | 第31-35页 |
| 3.3.1 RT-PCR扩增与克隆鉴定 | 第31页 |
| 3.3.2 实时荧光定量RT-PCR条件的优化和反应体系的确定 | 第31-32页 |
| 3.3.3 实时荧光定量RT-PCR反应体系的方法学测试 | 第32-34页 |
| 3.3.4 田间甜橙中CTV T3基因型的相对含量检测 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 3.5 小结 | 第36-37页 |
| 第4章 弱毒交叉保护植株中CTV基因型的时空变化规律 | 第37-45页 |
| 4.1 试验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 供试毒源 | 第37页 |
| 4.1.2 供试植物材料 | 第37页 |
| 4.1.3 取样方法 | 第37页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第37页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第37页 |
| 4.2 试验方法 | 第37-39页 |
| 4.2.1 柑橘总RNA提取 | 第37页 |
| 4.2.2总RNA纯度和完整性 | 第37-38页 |
| 4.2.3 不同基因型实时荧光定量PCR引物 | 第38页 |
| 4.2.4 cDNA的合成 | 第38页 |
| 4.2.5 实时荧光定量PCR检测不同时期不同组织部位各基因型CTV含量 | 第38-39页 |
| 4.3 结果与分析 | 第39-44页 |
| 4.3.1 RNA纯度和完整性 | 第39页 |
| 4.3.2 弱毒株CT11分离株 | 第39-41页 |
| 4.3.3 弱毒株CT31分离株 | 第41-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44页 |
| 4.5小结 | 第44-45页 |
| 第5章 田间甜橙弱毒株交叉保护作用防效评估 | 第45-55页 |
| 5.1 材料和方法 | 第45-46页 |
| 5.1.1 供试毒源 | 第45页 |
| 5.1.2 试验地点与材料 | 第45-46页 |
| 5.1.3主要试剂 | 第46页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第46页 |
| 5.1.5 常用储备液及缓冲液 | 第46页 |
| 5.2 试验方法 | 第46-48页 |
| 5.2.1 应用RT-PCR技术检测田间植株CTV | 第46-47页 |
| 5.2.2植株长势调查 | 第47页 |
| 5.2.3果实大小外观指标的测定 | 第47页 |
| 5.2.4果实品质常规检测 | 第47-48页 |
| 5.2.5田间甜橙植株T30基因型CTV含量测定 | 第48页 |
| 5.3 试验结果 | 第48-53页 |
| 5.3.1 田间植株检测结果 | 第48-49页 |
| 5.3.2植株长势分析结果 | 第49-51页 |
| 5.3.3果实大小分级 | 第51-52页 |
| 5.3.4不同植株果实可溶性固形物等常规品质的比较 | 第52-53页 |
| 5.3.5田间弱毒株植株T30基因型CTV含量比较 | 第53页 |
| 5.4 讨论 | 第53-54页 |
| 5.5 小结 | 第54-55页 |
| 第6章 结论及展望 | 第55-57页 |
| 6.1 结论 | 第55页 |
| 6.2 展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 攻读学位期间发表论文及参加科研项目 | 第67页 |
