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花背蟾蜍(Bufo raddei)Paired box 6 variant基因与Paired box 6基因在细胞周期等方面的异同与突变位点的功能探究

缩略词表第3-4页
摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 前言第9-22页
    1.1 实验生物简介第9-10页
        1.1.1 非洲爪蟾简介第9-10页
        1.1.2 花背蟾蜍简介第10页
    1.2 眼球结构与眼睛发育的分子研究起源第10-12页
        1.2.1 眼球的相关结构组成第10-11页
        1.2.2 角膜上皮细胞结构组成第11-12页
        1.2.3 眼睛发育的分子研究起源第12页
    1.3 Paired box6基因第12-19页
        1.3.1 Paired box6(Pax6)基因简介第12-13页
        1.3.2 Pax6基因的结构分析第13-15页
        1.3.3 Pax6基因在眼域调控及周期等发育方面的调节作用第15-17页
        1.3.4 Pax6对细胞周期的影响第17-18页
        1.3.5 脊椎动物门中Pax6基因的相关系统发生与整体进化第18-19页
    1.4 Pax6 variant(vp)基因简介第19页
    1.5 Pax6 variant(vp)与pax6的序列比对第19-20页
    1.6 实验的目的和意义第20-22页
第二章 材料和方法第22-33页
    2.1 实验动物材料第22页
    2.2 主要实验仪器第22页
    2.3 主要实验药品第22-23页
    2.4 实验用载体及菌株第23-25页
        2.4.1 实验用载体第23-24页
        2.4.2 实验用菌株第24-25页
    2.5 实验试剂及相关溶液配方第25-27页
        2.5.1 基因克隆及检测所需试剂第25页
        2.5.2 Western blot所需试剂第25-26页
        2.5.3 细胞转染所需试剂第26-27页
    2.6 生物学相关数据库及生物学软件第27页
    2.7 方法第27-33页
        2.7.1 质粒构建第28-29页
        2.7.2 抗体的制备第29页
        2.7.3 突变体基因的制备第29-30页
        2.7.4 细胞培养第30-31页
        2.7.5 细胞转染第31页
        2.7.6 MTT法测定细胞增殖第31页
        2.7.7 Western Blot检测相关蛋白的表达第31-33页
第三章 结果第33-41页
    3.1 VP与PAX6对比的信息学分析第33-35页
    3.2 质粒构建结果第35-37页
        3.2.1 pax6-PMD-18T与vp-PMD-18T第35页
        3.2.2 pax6-pCI-neo与vp-pCI-neo第35页
        3.2.3 四种质粒Site361-pax6-pCI-neo、Site373-pax6-pCI-neo、Site398-pax6-pCI-neo以及Site410-pax6-pCI-neo测序结果第35-36页
        3.2.4 转染进入细胞后的质粒提取检测结果第36-37页
    3.3 Pax6与pax6 variant对细胞活性及增殖的影响第37-39页
    3.4 过表达对细胞及下游的影响第39-41页
        3.4.1 蛋白免疫印迹法检测目的蛋白第39-41页
第四章 讨论第41-45页
    4.1 Pax家族基因在发育生长中的地位第41-42页
    4.2 VP与PAX6蛋白结构域的异同第42页
    4.3 蛋白结构中pst区域的蛋白磷酸化位点对于细胞增殖的影响第42-43页
    4.4 不同磷酸化位点的影响作用与可能机理的讨论第43-44页
    4.5 进一步的展望第44-45页
第五章 结论第45-46页
参考文献第46-51页
在学期间的研究成果第51-52页
致谢第52页

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