缩略词表 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1.1 实验生物简介 | 第9-10页 |
1.1.1 非洲爪蟾简介 | 第9-10页 |
1.1.2 花背蟾蜍简介 | 第10页 |
1.2 眼球结构与眼睛发育的分子研究起源 | 第10-12页 |
1.2.1 眼球的相关结构组成 | 第10-11页 |
1.2.2 角膜上皮细胞结构组成 | 第11-12页 |
1.2.3 眼睛发育的分子研究起源 | 第12页 |
1.3 Paired box6基因 | 第12-19页 |
1.3.1 Paired box6(Pax6)基因简介 | 第12-13页 |
1.3.2 Pax6基因的结构分析 | 第13-15页 |
1.3.3 Pax6基因在眼域调控及周期等发育方面的调节作用 | 第15-17页 |
1.3.4 Pax6对细胞周期的影响 | 第17-18页 |
1.3.5 脊椎动物门中Pax6基因的相关系统发生与整体进化 | 第18-19页 |
1.4 Pax6 variant(vp)基因简介 | 第19页 |
1.5 Pax6 variant(vp)与pax6的序列比对 | 第19-20页 |
1.6 实验的目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 材料和方法 | 第22-33页 |
2.1 实验动物材料 | 第22页 |
2.2 主要实验仪器 | 第22页 |
2.3 主要实验药品 | 第22-23页 |
2.4 实验用载体及菌株 | 第23-25页 |
2.4.1 实验用载体 | 第23-24页 |
2.4.2 实验用菌株 | 第24-25页 |
2.5 实验试剂及相关溶液配方 | 第25-27页 |
2.5.1 基因克隆及检测所需试剂 | 第25页 |
2.5.2 Western blot所需试剂 | 第25-26页 |
2.5.3 细胞转染所需试剂 | 第26-27页 |
2.6 生物学相关数据库及生物学软件 | 第27页 |
2.7 方法 | 第27-33页 |
2.7.1 质粒构建 | 第28-29页 |
2.7.2 抗体的制备 | 第29页 |
2.7.3 突变体基因的制备 | 第29-30页 |
2.7.4 细胞培养 | 第30-31页 |
2.7.5 细胞转染 | 第31页 |
2.7.6 MTT法测定细胞增殖 | 第31页 |
2.7.7 Western Blot检测相关蛋白的表达 | 第31-33页 |
第三章 结果 | 第33-41页 |
3.1 VP与PAX6对比的信息学分析 | 第33-35页 |
3.2 质粒构建结果 | 第35-37页 |
3.2.1 pax6-PMD-18T与vp-PMD-18T | 第35页 |
3.2.2 pax6-pCI-neo与vp-pCI-neo | 第35页 |
3.2.3 四种质粒Site361-pax6-pCI-neo、Site373-pax6-pCI-neo、Site398-pax6-pCI-neo以及Site410-pax6-pCI-neo测序结果 | 第35-36页 |
3.2.4 转染进入细胞后的质粒提取检测结果 | 第36-37页 |
3.3 Pax6与pax6 variant对细胞活性及增殖的影响 | 第37-39页 |
3.4 过表达对细胞及下游的影响 | 第39-41页 |
3.4.1 蛋白免疫印迹法检测目的蛋白 | 第39-41页 |
第四章 讨论 | 第41-45页 |
4.1 Pax家族基因在发育生长中的地位 | 第41-42页 |
4.2 VP与PAX6蛋白结构域的异同 | 第42页 |
4.3 蛋白结构中pst区域的蛋白磷酸化位点对于细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
4.4 不同磷酸化位点的影响作用与可能机理的讨论 | 第43-44页 |
4.5 进一步的展望 | 第44-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
在学期间的研究成果 | 第51-52页 |
致谢 | 第52页 |