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基于转录组与蛋白质组联合分析揭示羔羊断母乳应激调控机制研究

内容摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第10-27页
    1.1 引言第10页
    1.2 湖羊的品种特点第10-11页
    1.3 羔羊早期断奶研究进展第11-14页
        1.3.1 早期断奶技术第11页
        1.3.2 品种与断奶日龄第11-13页
        1.3.3 营养水平影响第13-14页
        1.3.4 营养素对动物基因表达调控的影响第14页
    1.4 缓解断奶应激反应的相关研究第14-17页
        1.4.1 羔羊断奶应激第15页
        1.4.2 犊牛断奶应激第15-16页
        1.4.3 仔猪断奶应激第16-17页
    1.5 转录组分析技术及应用第17-19页
        1.5.1 转录组学概述第17-18页
        1.5.2 RNA-seq技术在畜牧生产中的应用第18-19页
    1.6 蛋白质组分析技术及应用第19-25页
        1.6.1 蛋白质组学概述第19-20页
        1.6.2 蛋白质组学的研究技术第20-24页
            1.6.2.1 荧光双向差异电泳技术(2D-DIGE)第20-21页
            1.6.2.2 同位素亲和标签技术(ICAT)第21-22页
            1.6.2.3 细胞培养稳定同位素技术(SILAC)第22-23页
            1.6.2.4 同位素的相对和绝对定量技术(iTRAQ)第23-24页
        1.6.3 蛋白质组学技术在畜牧学中的应用第24-25页
    1.7 本研究的内容和意义第25-27页
第二章 断母乳羔羊肠道组织RNA-seq测序分析第27-54页
    2.1 前言第27页
    2.2 材料与方法第27-35页
        2.2.1 试验材料第27-28页
            2.2.1.1 试验时间和地点第27页
            2.2.1.2 试验设计第27页
            2.2.1.3 试验饲粮第27-28页
            2.2.1.4 饲养管理第28页
        2.2.2 主要仪器与试剂第28-29页
            2.2.2.1 主要仪器第28-29页
            2.2.2.2 主要试剂第29页
        2.2.3 试验方法第29-32页
            2.2.3.1 总RNA的提取第29-30页
            2.2.3.2 RNA提取质量检测第30页
            2.2.3.3 文库构建及上机测序第30-32页
        2.2.4 RNA-seq测序数据分析第32-35页
            2.2.4.1 数据分析流程图第32页
            2.2.4.2 转录组原始数据质控第32-33页
            2.2.4.3 测序reads比对拼接第33页
            2.2.4.4 转录本表达水平统计及定量分析第33页
            2.2.4.5 转录本表达估计质量控制第33-34页
            2.2.4.6 差异表达基因鉴定第34页
            2.2.4.7 差异表达基因的GO分析第34页
            2.2.4.8 差异表达基因的Pathway分析第34-35页
            2.2.4.9 可变剪切事件及样本SNP分析第35页
    2.3 结果与分析第35-50页
        2.3.1 RNA提取与质量检测第35-37页
        2.3.2 RNA-seq原始测序数据质控第37-43页
            2.3.2.1 测序错误率检测第37-38页
            2.3.2.2 GC含量分布第38页
            2.3.2.3 测序质量评估第38-39页
            2.3.2.4 测序数据统计第39页
            2.3.2.5 饱和度分析第39-40页
            2.3.2.6 RNA-seq相关性检验第40-43页
        2.3.3 差异表达基因筛选及功能分析第43-50页
            2.3.3.1 差异表达基因的鉴定第43-44页
            2.3.3.2 差异表达基因GO功能分析第44-47页
            2.3.3.3 差异表达基因KEGG分析第47-50页
    2.4 讨论第50-54页
第三章 断母乳羔羊肠道组织差异表达蛋白鉴定与功能分析第54-83页
    3.1 前言第54页
    3.2 材料与方法第54-55页
        3.2.1 材料第54页
        3.2.2 主要试剂和配制第54-55页
        3.2.3 主要仪器第55页
    3.3 试验方法第55-60页
        3.3.1 蛋白质提取第55-56页
        3.3.2 蛋白质浓度测定第56页
        3.3.3 蛋白质质量检测第56页
        3.3.4 蛋白质酶解第56-57页
        3.3.5 iTRAQ标记第57页
        3.3.6 SCX分离第57页
        3.3.7 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MSMS分析第57-58页
        3.3.8 生物信息分析第58-60页
            3.3.8.1 原始数据处理第59-60页
            3.3.8.2 蛋白基本信息统计第60页
            3.3.8.3 COG分析第60页
            3.3.8.4 差异蛋白GO功能分析第60页
            3.3.8.5 差异蛋白Pathway分析第60页
            3.3.8.6 MGI分析第60页
    3.4 结果与分析第60-80页
        3.4.1 蛋白质检测第61页
        3.4.2 蛋白质鉴定第61-66页
            3.4.2.1 肽段鉴定质量评估第61-62页
            3.4.2.2 基本鉴定信息第62-63页
            3.4.2.3 蛋白分子质量分布第63-64页
            3.4.2.4 肽段序列长度分布第64页
            3.4.2.5 肽段序列覆盖度分布第64-65页
            3.4.2.6 Unique肽段数量分布第65-66页
        3.4.3 蛋白质注释第66-70页
            3.4.3.1 GO分析第66-68页
            3.4.3.2 COG功能分析第68-69页
            3.4.3.3 Pathway分析第69-70页
        3.4.4 差异蛋白表达分析第70-80页
            3.4.4.1 差异蛋白统计分析第70-72页
            3.4.4.2 差异蛋白GO分析第72-74页
            3.4.4.3 差异蛋白的Pathway富集分析第74-76页
            3.4.4.4 蛋白交互网络分析第76页
            3.4.4.5 MGI分析第76-77页
            3.4.4.6 肠道组织形态学观察第77-78页
            3.4.4.7 蛋白质组与转录组联合分析第78-80页
    3.5 讨论第80-83页
第四章 结论第83-84页
参考文献第84-92页
致谢第92-93页
个人简历第93-94页
附图第94-97页

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