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棉花抗黄萎病基因筛选及NBS-LRR类抗病基因GbaNA1功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 引言第15-26页
    1.1 植物抗病基因第15-16页
    1.2 植物抗病基因识别效应子的机制第16-18页
    1.3 抗病信号转导途径第18-19页
        1.3.1 激酶信号途径第18页
        1.3.2 效应因子诱导的免疫反应中的信号途径第18-19页
        1.3.3 抗病信号转导及防卫反应第19页
    1.4 NBS-LRR类抗病基因第19-23页
        1.4.1 NB-ARC结构域的结构和功能第19-20页
        1.4.2 N端TIR/CC结构域的结构和功能第20-21页
        1.4.3 LRR结构域的结构和功能第21页
        1.4.4 NBS-LRR抗病蛋白识别病原的机制第21页
        1.4.5 NBS-LRR蛋白在植物细胞中的定位分布第21-22页
        1.4.6 NBS-LRR抗病基因家族的分布和进化第22-23页
    1.5 棉花抗黄萎病机制研究进展第23-25页
        1.5.1 大丽轮枝菌的侵染过程和致病机理第23-24页
        1.5.2 棉花抗黄萎病分子机理第24页
        1.5.3 植物激素在棉花与黄萎病菌互作中的作用第24-25页
    1.6 本研究的目的和意义第25-26页
第二章 棉花RGA基因分析和黄萎病抗性位点VdRLS鉴定第26-43页
    2.1 实验材料和试剂第26页
        2.1.1 实验材料第26页
        2.1.2 主要试剂第26页
        2.1.3 主要仪器第26页
    2.2 实验方法第26-28页
        2.2.1 雷蒙德氏棉RGA基因的生物信息学分析第26-27页
        2.2.2 转录组样品制备第27页
        2.2.3 转录组测序结果分析第27-28页
        2.2.4 棉花中抗性QTL和抗病VdRLs之间的相关性分析第28页
    2.3 实验结果第28-41页
        2.3.1 雷蒙德氏棉中RGA基因分析第28-31页
        2.3.2 RGA基因在染色体上成簇分布第31-35页
        2.3.3 大丽轮枝菌侵染海岛棉转录组中RGA基因的表达分析第35-41页
    2.4 讨论第41-43页
第三章 候选的黄萎病抗性位点VdRL08分析第43-53页
    3.1 实验材料、试剂和仪器第43页
        3.1.1 实验材料第43页
        3.1.2 主要试剂第43页
        3.1.3 主要仪器第43页
    3.2 实验方法第43-45页
        3.2.1 VdRL08位点分析第43页
        3.2.2 海岛棉中该位点基因扩增第43页
        3.2.3 海岛棉中VdRL08位点基因表达分析第43-44页
        3.2.4 海岛棉中VdRL08位点基因VIGS沉默第44-45页
    3.3 实验结果第45-51页
        3.3.1 VdRL08位点分析第45-46页
        3.3.2 海岛棉中该位点基因扩增第46-47页
        3.3.3 海岛棉中VdRL08位点基因表达分析第47-48页
        3.3.4 VIGS沉默体系建立第48-49页
        3.3.5 抗性位点VdRL08基因沉默鉴定第49-51页
    3.4 讨论第51-53页
第四章 GbaNA1基因的克隆和分析第53-61页
    4.1 实验材料、试剂和仪器第53页
        4.1.1 实验材料第53页
        4.1.2 主要试剂第53页
        4.1.3 主要仪器第53页
    4.2 实验方法第53-55页
        4.2.1 GbaNA1基因的克隆第53-54页
        4.2.2 GbaNA1基因的分析第54页
        4.2.3 GbaNA1基因激素诱导表达分析第54页
        4.2.4 GbaNA1基因亚细胞定位第54-55页
    4.3 实验结果第55-59页
        4.3.1 GbaNA1基因克隆第55-56页
        4.3.2 GbaNA1基因激素诱导表达分析第56-58页
        4.3.3 GbaNA1基因的亚细胞定位第58-59页
    4.4 讨论第59-61页
第五章 GbaNA1基因抗黄萎病功能鉴定第61-72页
    5.1 实验材料、试剂和仪器第61页
        5.1.1 实验材料第61页
        5.1.2 主要试剂第61页
        5.1.3 主要仪器第61页
    5.2 实验方法第61-64页
        5.2.1 植物表达载体构建第61-62页
        5.2.2 GbaNA1基因的遗传转化和鉴定第62-64页
        5.2.3 GbaNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌的抗性鉴定第64页
        5.2.4 拟南芥叶片DAB染色第64页
        5.2.5 转基因拟南芥中抗病相关基因表达分析第64页
    5.3 实验结果第64-70页
        5.3.1 植物表达载体构建第64-65页
        5.3.2 转基因拟南芥的分子鉴定第65-66页
        5.3.3 GbaNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性的鉴定第66-68页
        5.3.4 拟南芥叶片ROS检测第68-69页
        5.3.5 转基因拟南芥中抗病相关基因的表达分析第69-70页
    5.4 讨论第70-72页
第六章 GbaNA1基因多态性与功能分化研究第72-82页
    6.1 实验材料、试剂和仪器第72页
        6.1.1 实验材料第72页
        6.1.2 主要试剂第72页
        6.1.3 主要仪器第72页
    6.2 实验方法第72-75页
        6.2.1 棉花材料的准备和处理第72-73页
        6.2.2 不同材料的中GbaNA1同源基因扩增第73页
        6.2.3 棉花材料黄萎病抗性鉴定第73页
        6.2.4 不同棉花材料中基因型分析第73页
        6.2.5 GhNA1基因的cDNA序列的扩增第73-74页
        6.2.6 GhNA1基因表达分析第74页
        6.2.7 转基因拟南芥遗传转化和分子鉴定第74页
        6.2.8 GhNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性鉴定第74-75页
    6.3 实验结果第75-81页
        6.3.1 棉花材料的准备和处理第75-76页
        6.3.2 不同棉花材料的基因型的分析第76-77页
        6.3.3 GhNA1基因的cDNA序列的扩增第77-78页
        6.3.4 GhNA1基因转基因拟南芥的分子检测第78-79页
        6.3.5 GhNA1基因的表达分析第79页
        6.3.6 GhNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性鉴定第79-81页
    6.4 讨论第81-82页
第七章 全文结论第82-84页
参考文献第84-95页
附录Ⅰ第95-100页
附录Ⅱ第100-102页
致谢第102-103页
作者简历第103页

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