摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第15-26页 |
1.1 植物抗病基因 | 第15-16页 |
1.2 植物抗病基因识别效应子的机制 | 第16-18页 |
1.3 抗病信号转导途径 | 第18-19页 |
1.3.1 激酶信号途径 | 第18页 |
1.3.2 效应因子诱导的免疫反应中的信号途径 | 第18-19页 |
1.3.3 抗病信号转导及防卫反应 | 第19页 |
1.4 NBS-LRR类抗病基因 | 第19-23页 |
1.4.1 NB-ARC结构域的结构和功能 | 第19-20页 |
1.4.2 N端TIR/CC结构域的结构和功能 | 第20-21页 |
1.4.3 LRR结构域的结构和功能 | 第21页 |
1.4.4 NBS-LRR抗病蛋白识别病原的机制 | 第21页 |
1.4.5 NBS-LRR蛋白在植物细胞中的定位分布 | 第21-22页 |
1.4.6 NBS-LRR抗病基因家族的分布和进化 | 第22-23页 |
1.5 棉花抗黄萎病机制研究进展 | 第23-25页 |
1.5.1 大丽轮枝菌的侵染过程和致病机理 | 第23-24页 |
1.5.2 棉花抗黄萎病分子机理 | 第24页 |
1.5.3 植物激素在棉花与黄萎病菌互作中的作用 | 第24-25页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 棉花RGA基因分析和黄萎病抗性位点VdRLS鉴定 | 第26-43页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第26页 |
2.1.1 实验材料 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
2.1.3 主要仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-28页 |
2.2.1 雷蒙德氏棉RGA基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.2.2 转录组样品制备 | 第27页 |
2.2.3 转录组测序结果分析 | 第27-28页 |
2.2.4 棉花中抗性QTL和抗病VdRLs之间的相关性分析 | 第28页 |
2.3 实验结果 | 第28-41页 |
2.3.1 雷蒙德氏棉中RGA基因分析 | 第28-31页 |
2.3.2 RGA基因在染色体上成簇分布 | 第31-35页 |
2.3.3 大丽轮枝菌侵染海岛棉转录组中RGA基因的表达分析 | 第35-41页 |
2.4 讨论 | 第41-43页 |
第三章 候选的黄萎病抗性位点VdRL08分析 | 第43-53页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第43页 |
3.1.1 实验材料 | 第43页 |
3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
3.1.3 主要仪器 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-45页 |
3.2.1 VdRL08位点分析 | 第43页 |
3.2.2 海岛棉中该位点基因扩增 | 第43页 |
3.2.3 海岛棉中VdRL08位点基因表达分析 | 第43-44页 |
3.2.4 海岛棉中VdRL08位点基因VIGS沉默 | 第44-45页 |
3.3 实验结果 | 第45-51页 |
3.3.1 VdRL08位点分析 | 第45-46页 |
3.3.2 海岛棉中该位点基因扩增 | 第46-47页 |
3.3.3 海岛棉中VdRL08位点基因表达分析 | 第47-48页 |
3.3.4 VIGS沉默体系建立 | 第48-49页 |
3.3.5 抗性位点VdRL08基因沉默鉴定 | 第49-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
第四章 GbaNA1基因的克隆和分析 | 第53-61页 |
4.1 实验材料、试剂和仪器 | 第53页 |
4.1.1 实验材料 | 第53页 |
4.1.2 主要试剂 | 第53页 |
4.1.3 主要仪器 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-55页 |
4.2.1 GbaNA1基因的克隆 | 第53-54页 |
4.2.2 GbaNA1基因的分析 | 第54页 |
4.2.3 GbaNA1基因激素诱导表达分析 | 第54页 |
4.2.4 GbaNA1基因亚细胞定位 | 第54-55页 |
4.3 实验结果 | 第55-59页 |
4.3.1 GbaNA1基因克隆 | 第55-56页 |
4.3.2 GbaNA1基因激素诱导表达分析 | 第56-58页 |
4.3.3 GbaNA1基因的亚细胞定位 | 第58-59页 |
4.4 讨论 | 第59-61页 |
第五章 GbaNA1基因抗黄萎病功能鉴定 | 第61-72页 |
5.1 实验材料、试剂和仪器 | 第61页 |
5.1.1 实验材料 | 第61页 |
5.1.2 主要试剂 | 第61页 |
5.1.3 主要仪器 | 第61页 |
5.2 实验方法 | 第61-64页 |
5.2.1 植物表达载体构建 | 第61-62页 |
5.2.2 GbaNA1基因的遗传转化和鉴定 | 第62-64页 |
5.2.3 GbaNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌的抗性鉴定 | 第64页 |
5.2.4 拟南芥叶片DAB染色 | 第64页 |
5.2.5 转基因拟南芥中抗病相关基因表达分析 | 第64页 |
5.3 实验结果 | 第64-70页 |
5.3.1 植物表达载体构建 | 第64-65页 |
5.3.2 转基因拟南芥的分子鉴定 | 第65-66页 |
5.3.3 GbaNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性的鉴定 | 第66-68页 |
5.3.4 拟南芥叶片ROS检测 | 第68-69页 |
5.3.5 转基因拟南芥中抗病相关基因的表达分析 | 第69-70页 |
5.4 讨论 | 第70-72页 |
第六章 GbaNA1基因多态性与功能分化研究 | 第72-82页 |
6.1 实验材料、试剂和仪器 | 第72页 |
6.1.1 实验材料 | 第72页 |
6.1.2 主要试剂 | 第72页 |
6.1.3 主要仪器 | 第72页 |
6.2 实验方法 | 第72-75页 |
6.2.1 棉花材料的准备和处理 | 第72-73页 |
6.2.2 不同材料的中GbaNA1同源基因扩增 | 第73页 |
6.2.3 棉花材料黄萎病抗性鉴定 | 第73页 |
6.2.4 不同棉花材料中基因型分析 | 第73页 |
6.2.5 GhNA1基因的cDNA序列的扩增 | 第73-74页 |
6.2.6 GhNA1基因表达分析 | 第74页 |
6.2.7 转基因拟南芥遗传转化和分子鉴定 | 第74页 |
6.2.8 GhNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性鉴定 | 第74-75页 |
6.3 实验结果 | 第75-81页 |
6.3.1 棉花材料的准备和处理 | 第75-76页 |
6.3.2 不同棉花材料的基因型的分析 | 第76-77页 |
6.3.3 GhNA1基因的cDNA序列的扩增 | 第77-78页 |
6.3.4 GhNA1基因转基因拟南芥的分子检测 | 第78-79页 |
6.3.5 GhNA1基因的表达分析 | 第79页 |
6.3.6 GhNA1转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性鉴定 | 第79-81页 |
6.4 讨论 | 第81-82页 |
第七章 全文结论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-95页 |
附录Ⅰ | 第95-100页 |
附录Ⅱ | 第100-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简历 | 第103页 |