摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
1.1 无脊椎动物的先天免疫 | 第9页 |
1.2 甲壳类动物的免疫系统 | 第9-11页 |
1.2.1 物理防御 | 第9-10页 |
1.2.2 细胞免疫 | 第10页 |
1.2.3 体液免疫 | 第10-11页 |
1.3 无脊椎动物的免疫相关信号通路 | 第11页 |
1.4 Toll信号通路 | 第11-12页 |
1.5 C型凝集素 | 第12-13页 |
1.6 国内外研究现状综述 | 第13-15页 |
1.6.1 Toll样受体的研究 | 第13-14页 |
1.6.2 C型凝集素的研究 | 第14-15页 |
1.7 本研究的目的意义和技术路线 | 第15-17页 |
第二章 罗氏沼虾C型凝集素的克隆和功能研究 | 第17-38页 |
2.1 引言 | 第17-18页 |
2.2 材料与方法 | 第18-27页 |
2.2.1 病毒、菌株和载体 | 第18页 |
2.2.2 试剂和仪器 | 第18-19页 |
2.2.3 实验试剂配方 | 第19-20页 |
2.2.4 实验动物及免疫刺激 | 第20页 |
2.2.5 RNA提取和cDNA合成 | 第20-21页 |
2.2.6 罗氏沼虾MrLec cDNA全长克隆 | 第21-22页 |
2.2.7 序列信息分析 | 第22页 |
2.2.8 实时定量PCR (qRT-PCR)分析MrLec的组织分布和表达模式 | 第22页 |
2.2.9 MrLec重组蛋白的表达和纯化 | 第22-24页 |
2.2.10 细菌结合实验 | 第24-25页 |
2.2.11 糖结合实验 | 第25页 |
2.2.12 细菌凝集实验 | 第25-26页 |
2.2.13 细菌清除实验 | 第26页 |
2.2.14 RNA干扰实验(RNAi) | 第26-27页 |
2.3 结果 | 第27-36页 |
2.3.1 MrLec全长cDNA克隆和序列分析 | 第27-30页 |
2.3.2 MrLec的组织分布 | 第30-31页 |
2.3.3 MrLec在弧菌感染的虾体中表达上调 | 第31-32页 |
2.3.4 MrLec重组表达和纯化 | 第32-33页 |
2.3.5 重组表达的MrLec能够结合不同的细菌 | 第33-34页 |
2.3.6 重组表达的MrLec能够结合多糖 | 第34页 |
2.3.7 重组表达的MrLec具有细菌凝集的能力 | 第34-35页 |
2.3.8 MrLec重组蛋白能够促进弧菌的清除 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
第三章 罗氏沼虾Toll样受体的克隆和功能研究 | 第38-56页 |
3.1 引言 | 第38-39页 |
3.2 材料和方法 | 第39-43页 |
3.2.1 病毒、试剂和仪器 | 第39页 |
3.2.2 白斑病毒感染罗氏沼虾和组织材料的收集 | 第39页 |
3.2.3 RNA提取和cDNA合成 | 第39页 |
3.2.4 罗氏沼虾MrToll基因的扩增和序列分析 | 第39页 |
3.2.5 MrToll组织分布和刺激后表达模式分析 | 第39-40页 |
3.2.6 罗氏沼虾受WSSV感染后抗菌肽的表达模式 | 第40页 |
3.2.7 RNA干扰实验及干扰后抗菌肽的表达 | 第40-43页 |
3.3 结果 | 第43-54页 |
3.3.1 MrToll cDNA的序列分析 | 第43-48页 |
3.3.2 多重序列比对和系统发育分析 | 第48-49页 |
3.3.3 MrToll的组织分布和抗菌肽基因在鳃组织中的表达 | 第49-50页 |
3.3.4 MrToll受到WSSV攻击后在鳃中的表达模式和MrToll的RNAi | 第50-51页 |
3.3.5 干扰MrToll基因后检测抗菌肽的表达 | 第51-54页 |
3.4 讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-69页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |