摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略语表 | 第10-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-21页 |
第一章 自噬研究进展 | 第13-18页 |
1. 自噬的类型 | 第13-14页 |
1.1 分子伴侣介导的自噬 | 第13页 |
1.2 微自噬 | 第13页 |
1.3 巨自噬 | 第13-14页 |
2 自噬的过程 | 第14-16页 |
2.1 自噬的介导 | 第14-15页 |
2.2 自噬体的形成 | 第15-16页 |
2.3 自噬体的运输及融合 | 第16页 |
2.4 自噬溶酶体的降解 | 第16页 |
3 自噬与PI3K/AKT/MTOR通路 | 第16页 |
4 自噬的作用 | 第16-18页 |
第二章 镉毒性研究进展 | 第18-21页 |
1. 镉的毒性机理 | 第18-19页 |
2. 镉的肝毒性 | 第19页 |
3. 镉与自噬 | 第19-21页 |
本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二部分 试验研究 | 第22-39页 |
第一章 镉对BRL3A细胞自噬的影响 | 第22-29页 |
1. 材料与方法 | 第22-25页 |
1.1 细胞系 | 第22页 |
1.2 主要试剂与仪器 | 第22-23页 |
1.3 细胞冻存与复苏 | 第23页 |
1.4 细胞培养 | 第23页 |
1.5 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
1.6 免疫印迹法检测LC3蛋白表达 | 第24页 |
1.6.1 制备蛋白样品 | 第24页 |
1.6.2 免疫印迹法 | 第24页 |
1.7 免疫荧光检测LC3聚点 | 第24页 |
1.8 单丹磺酰尸胺染色 | 第24-25页 |
1.9 统计学分析 | 第25页 |
2. 结果 | 第25-27页 |
2.1 镉对自噬体标志性蛋白LC3表达的影响 | 第25页 |
2.2 免疫荧光检测LC3聚点 | 第25-26页 |
2.3 MDC染色观察晚期自噬溶酶体 | 第26-27页 |
3. 讨论 | 第27-29页 |
第二章 自噬对镉致BRL 3A细胞损伤的保护作用 | 第29-34页 |
1. 材料与方法 | 第29-30页 |
1.1 细胞系 | 第29页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第29页 |
1.3 主要试剂配制 | 第29页 |
1.4 细胞处理 | 第29页 |
1.5 MTT法检测细胞存活率 | 第29-30页 |
1.6 免疫印迹检测LC3表达 | 第30页 |
1.7 统计学分析 | 第30页 |
2. 结果 | 第30-32页 |
2.1 自噬抑制剂对LC3蛋白表达的影响 | 第30页 |
2.2 自噬抑制剂对细胞存活率的影响 | 第30-31页 |
2.3 自噬促进剂对细胞LC3蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
2.4 自噬促进剂对细胞存活率的影响 | 第32页 |
3. 讨论 | 第32-34页 |
第三章 PI3K/AKT/MTOR通路在镉致BRL 3A细胞自噬中的作用 | 第34-39页 |
1. 材料与方法 | 第34-35页 |
1.1 细胞系 | 第34页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第34页 |
1.3 细胞处理 | 第34页 |
1.4 免疫印迹法检测PI3K/AKT/MTOR通路相关蛋白以及LC3表达 | 第34-35页 |
1.5 MDC染色 | 第35页 |
1.6 统计学分析 | 第35页 |
2. 结果 | 第35-37页 |
2.1 不同浓度醋酸镉对PI3K/AKT/MTOR通路相关蛋白表达的影响 | 第35页 |
2.2 PI3K抑制剂对AKT、P-AKT和LC3表达的影响 | 第35-36页 |
2.3 PI3K抑制剂对晚期自噬溶酶体的影响 | 第36-37页 |
3. 讨论 | 第37-39页 |
全文结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第52-53页 |