摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
1.1. 酿酒酵母与有机酸 | 第8-9页 |
1.2. 乙酸对酵母细胞的影响 | 第9-10页 |
1.2.1. 细胞摄入乙酸 | 第9页 |
1.2.2. 细胞代谢乙酸 | 第9-10页 |
1.2.3. 细胞排出乙酸 | 第10页 |
1.3. 乙酸耐受基因的解析 | 第10-14页 |
1.3.1. 遗传标记技术 | 第11-12页 |
1.3.2. 组学分析技术 | 第12-14页 |
1.4. 国内外研究进展 | 第14-15页 |
1.4.1. 国外研究进展 | 第14页 |
1.4.2. 国内研究进展 | 第14-15页 |
1.5. 立题意义与研究内容 | 第15-16页 |
1.6. 技术路线 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-24页 |
2.1. 材料 | 第17-19页 |
2.1.1. 菌株来源 | 第17页 |
2.1.2. 实验仪器 | 第17-18页 |
2.1.3. 主要试剂 | 第18页 |
2.1.4. 主要溶液 | 第18页 |
2.1.5. 培养基 | 第18-19页 |
2.2. 实验方法 | 第19-24页 |
2.2.1. 酿酒酵母乙酸耐受表型鉴定 | 第19页 |
2.2.2. 酵母单倍体融合 | 第19页 |
2.2.3. 酵母基因组提取 | 第19页 |
2.2.4. 微卫星位点的查找筛选 | 第19-20页 |
2.2.5. 微卫星位点多态性分析 | 第20页 |
2.2.6. 耐乙酸数量性状位点作图分析 | 第20页 |
2.2.7. 全基因组重测序 | 第20页 |
2.2.8. 数据处理及单核苷酸多态性位点查找分析 | 第20-21页 |
2.2.9. 极端菌株SNP分析及候选基因蛋白功能突变预测 | 第21页 |
2.2.10. 候选基因敲除过程 | 第21-23页 |
2.2.11. 大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第23页 |
2.2.12. 醋酸锂聚乙二醇介导酿酒酵母转化 | 第23-24页 |
第三章 结果与讨论 | 第24-39页 |
3.1. SSR位点分析 | 第24-29页 |
3.1.1. 乙酸耐受菌株子代群体 | 第24页 |
3.1.2. SSR位点筛选 | 第24-25页 |
3.1.3. 构建遗传图谱 | 第25-27页 |
3.1.4. SSR位点的精细定位 | 第27-28页 |
3.1.5. 小结 | 第28-29页 |
3.2. 全基因组测序及SNP分析 | 第29-34页 |
3.2.1. 全基因组测序 | 第29页 |
3.2.2. SNP分析 | 第29-32页 |
3.2.3. 基因互作分析 | 第32-34页 |
3.2.4. 蛋白质功能突变预测及候选基因的筛选鉴定 | 第34页 |
3.2.5 小结 | 第34页 |
3.3. 候选基因对酿酒酵母乙酸耐受性的影响 | 第34-37页 |
3.3.1. 敲除盒构建及酵母基因敲除 | 第35页 |
3.3.2. 候选基因缺失对乙酸耐受性的影响 | 第35-36页 |
3.3.3 小结 | 第36-37页 |
3.4. 不同菌株研究的难点 | 第37-39页 |
主要结论和展望 | 第39-41页 |
主要结论 | 第39页 |
展望 | 第39-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47-53页 |
期刊论文 | 第47页 |
参与科研项目 | 第47-48页 |
附录A | 第48-51页 |
附录B | 第51-53页 |