| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 引言 | 第13-25页 |
| 1 甘蔗概述 | 第13-16页 |
| 1.1 甘蔗的分类和起源 | 第13-14页 |
| 1.2 甘蔗是重要的糖料和能源作物 | 第14-15页 |
| 1.3 甘蔗与近缘属高粱基因组的共线性 | 第15-16页 |
| 2 植物SWEET蛋白的结构和功能 | 第16-23页 |
| 2.1 SWEET蛋白的结构的研究 | 第16-18页 |
| 2.2 SWEET蛋白的生物学功能 | 第18-23页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第一章 甘蔗SWEET基因家族的鉴定及演化分析 | 第25-46页 |
| 1 实验材料 | 第25页 |
| 2 实验试剂和仪器 | 第25-26页 |
| 2.1 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验仪器 | 第26页 |
| 3 实验方法 | 第26-30页 |
| 3.1 甘蔗割手密种BAC文库的测序和组装 | 第26页 |
| 3.2 甘蔗SWEET基因家族的预测 | 第26-27页 |
| 3.3 SWEET基因家族系统进化树的构建和基因结构比较 | 第27-30页 |
| 4 实验结果与分析 | 第30-42页 |
| 4.1 甘蔗SWEET基因家族的鉴定 | 第30-36页 |
| 4.2 甘蔗SWEET基因家族选择压力分析 | 第36-37页 |
| 4.3 甘蔗SWEET基因的系统演化 | 第37-42页 |
| 5 讨论与小结 | 第42-46页 |
| 第二章 甘蔗SWEET基因家族的表达谱分析 | 第46-60页 |
| 1 实验材料 | 第46页 |
| 2 实验试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 2.1 实验试剂 | 第46-47页 |
| 2.2 实验仪器 | 第47页 |
| 3 实验方法 | 第47-51页 |
| 3.1 不同甘蔗组织总RNA的提取 | 第47-49页 |
| 3.2 不同甘蔗样品RNA-seq文库的构建 | 第49页 |
| 3.3 不同甘蔗样品RNA-seq分析 | 第49-50页 |
| 3.4 甘蔗SWEET基因家族实时荧光定量PCR的分析 | 第50-51页 |
| 4 结果与分析 | 第51-56页 |
| 4.1 甘蔗原始种苗期和成熟期SWEET基因家族的表达谱分析 | 第51-52页 |
| 4.2 甘蔗SWEET基因家族在甘蔗发育叶片中共表达的比较 | 第52-54页 |
| 4.3 转录组数据的qRT-PCR验证 | 第54-56页 |
| 5 讨论与小结 | 第56-60页 |
| 第三章 拟南芥SWEET基因家族T-DNA插入纯合突变体的鉴定 | 第60-69页 |
| 1 实验材料 | 第60页 |
| 2 实验仪器及试剂 | 第60-61页 |
| 2.1 实验试剂 | 第60-61页 |
| 2.2 实验仪器 | 第61页 |
| 3 实验方法 | 第61-63页 |
| 3.1 拟南芥突变体的购买 | 第61页 |
| 3.2 拟南芥SWEET基因T-DNA插入纯合突变体的筛选 | 第61-63页 |
| 3.3 拟南芥SWEET基因突变体筛选的引物设计及合成 | 第63页 |
| 3.4 拟南芥植株基因组DNA的提取 | 第63页 |
| 4 结果与分析 | 第63-67页 |
| 4.1 拟南芥SWEET基因家族T-DNA突变体信息 | 第63-64页 |
| 4.2 拟南芥SWEET基因家族T-DNA插入纯合突变体的筛选 | 第64-67页 |
| 5 讨论与小结 | 第67-69页 |
| 第四章 甘蔗SWEET基因在酵母中的异源功能验证 | 第69-81页 |
| 1 实验材料、试剂及仪器 | 第69-70页 |
| 1.1 甘蔗材料 | 第69页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第69页 |
| 1.3 酶及主要试剂 | 第69-70页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第70页 |
| 2 实验方法 | 第70-77页 |
| 2.1 甘蔗叶片总RNA的提取 | 第70页 |
| 2.2 cDNA的合成 | 第70-71页 |
| 2.3 甘蔗SWEET基因cDNA克隆的引物设计 | 第71页 |
| 2.4 甘蔗SWEET基因的cDNA克隆 | 第71-72页 |
| 2.5 PCR产物的回收 | 第72-73页 |
| 2.6 使用Gateway技术构建酵母表达载体 | 第73-74页 |
| 2.7 突变体酵母菌株EBY.VW4000感受态的制备 | 第74-75页 |
| 2.8 表达载体转化酵母感受态细胞 | 第75-76页 |
| 2.9 转化酵母菌pDRf1-GW-SWEET-EBY.VW4000的验证 | 第76-77页 |
| 2.10 缺陷型酵母的糖吸收功能互补实验 | 第77页 |
| 3 结果与分析 | 第77-79页 |
| 3.1 酵母表达载体的构建 | 第77-78页 |
| 3.2 己糖吸收突变型酵母互补实验 | 第78-79页 |
| 4 讨论与小结 | 第79-81页 |
| 总结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 攻读硕士学位期间参与的科研项目及主要成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
